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# Biologie# Bioengineering

Fortschritte in der Abwasser-Epidemiologie zur Krankheitsdetektion

Neue Methoden verbessern die Überwachung von bakteriellen Infektionen in Abwasser und unterstützen die öffentliche Gesundheit.

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Abwasser-basierte Epidemiologie (WBE) ist 'ne Methode, um die Ausbreitung von Krankheiten in Gemeinschaften zu überwachen. Man schaut sich das Abwasser an, um herauszufinden, welche Krankheiten da sein könnten. Diese Technik war schon hilfreich für die Verfolgung von Krankheiten wie Typhus und Poliomyelitis, und in letzter Zeit ist sie wichtiger geworden für das Monitoring von COVID-19 und anderen Krankheiten wie Masern, HIV und Influenza.

Der Einsatz von WBE hat sich hauptsächlich auf virale Krankheiten konzentriert. Es wächst aber der Bedarf, diese Methode auch auf bakterielle Infektionen anzuwenden. Bakterielle Infektionen sind weltweit eine Haupttodesursache, und mit der Zunahme von Antibiotikaresistenzen wird das Monitoring dieser Infektionen immer wichtiger. In neueren Studien wurde WBE genutzt, um spezifische Bakterien wie Salmonellen und Pilzinfektionen wie Candida auris zu verfolgen. Diese Fähigkeit zur Überwachung von Bakterien kann helfen, Ausbrüche zu bewältigen, bevor sie sich ausbreiten.

Wie WBE funktioniert

Die aktuellen Methoden der WBE verwenden oft Techniken, die spezifische genetische Materialien von Krankheitserregern nachweisen. Eine beliebte Methode heisst digitale Polymerase-Kettenreaktion (PCR), die sehr sensitiv und spezifisch ist. Allerdings hat PCR einige Einschränkungen. Man muss die einzigartigen genetischen Marker der Bakterien kennen, was schwierig sein kann, da es so viele Bakterienarten gibt.

Ausserdem können Bakterien unterschiedliche Verhaltensweisen und Eigenschaften zeigen, die ihre Virulenz beeinflussen können. Diese Eigenschaften sind nicht immer allein durch genetische Analysen offensichtlich. Neue und aufkommende Stämme von antibiotikaresistenten Bakterien können auch übersehen werden, da PCR auf dem vorherigen Wissen über genetische Sequenzen bekannter Krankheitserreger beruht.

Vibrationsspektroskopie

Vibrationsspektroskopie, zu der Techniken wie Raman- und Infrarotspektroskopie gehören, bietet eine Möglichkeit, eine breite Palette von Bakterien im Abwasser zu identifizieren, ohne im Voraus zu wissen, welche Krankheitserreger vorhanden sind. Diese Techniken funktionieren, indem sie messen, wie Moleküle in den Bakterien vibrieren, wenn sie Licht ausgesetzt sind.

Raman-Spektroskopie ist besonders geeignet für die Analyse von Abwasser, da sie gut mit Flüssigkeitsproben funktioniert und weniger wahrscheinlich durch das Wasser selbst beeinflusst wird. Dadurch können verschiedene Arten und sogar Unterarten von Bakterien basierend auf ihren einzigartigen Raman-Signaturen klar identifiziert werden.

Verbesserte Detektion mit Gold-Nanorods

Um die Detektion von Bakterien im Abwasser zu verbessern, nutzen Forscher Gold-Nanorods (AuNRs). Diese winzigen Partikel können die Raman-Signale von Bakterien verstärken, was es einfacher macht, sie selbst in komplexen Mischungen, die Proteine, Nukleinsäuren und andere Substanzen aus dem Abwasser enthalten, nachzuweisen.

Wenn AuNRs zu einer Probe hinzugefügt werden, verstärken sie selektiv die Signale von Bakterien. Das geschieht durch eine Technik namens Oberflächenverstärkte Raman-Spektroskopie (SERS). In dieser Technik binden sich die AuNRs an die Oberfläche der Bakterien, was die Raman-Peaks stärker und klarer macht.

Testen der Effektivität der Methode

Forscher haben Tests durchgeführt, um zu sehen, ob diese SERS-Methode Bakterien im Abwasser effektiv nachweisen kann. Sie haben Wasserproben aus Kläranlagen genommen, sie sicher für Tests gemacht und dann spezifische Bakterien wie Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus aureus, Serratia marcescens und Escherichia coli hinzugefügt. Durch das Messen der Raman-Signale aus diesen Proben haben sie bestätigt, dass die SERS-Methode die Anwesenheit dieser Bakterien klar nachweisen kann.

Die Forschung zeigte, dass selbst im Abwasser die Methode immer noch starke Signale erzeugen konnte, was darauf hinweist, dass die Bakterien effektiv mit den AuNRs bindeten. Beim Vergleich der Ergebnisse in formalinbehandelten Proben mit Abwasser fanden sie heraus, dass die Abwasserumgebung die Detektion der bakteriellen Signale nicht signifikant erschwerte.

Maschinelles Lernen Klassifikation

Um die komplexen Daten aus den Raman-Signalen zu verstehen, werden Techniken des maschinellen Lernens (ML) angewendet. ML kann helfen, verschiedene Bakterienarten basierend auf ihren einzigartigen Raman-Spektren zu klassifizieren. Durch das Training eines Modells mit Raman-Daten können Forscher eine hohe Genauigkeit bei der Identifizierung verschiedener Bakterien erreichen.

Ein Convolutional Neural Network (CNN) wurde in diesen Studien verwendet, um die Raman-Spektren zu analysieren. Diese Art von Modell kann lernen, Muster in den Daten zu erkennen und zwischen verschiedenen Bakterien basierend auf den Raman-Peaks zu differenzieren. Die Ergebnisse der Analyse zeigten, dass das Modell die Bakterien mit guter Genauigkeit klassifizieren konnte, selbst mit einem kleineren Trainingsdatensatz.

Einschränkungen und künftige Richtungen

Obwohl die Forschung vielversprechend aussieht, gibt es noch einige Herausforderungen zu bewältigen. Ein grosses Problem ist, dass die Methode Bakterien in realen Abwasserszenarien genau identifizieren muss, was durch die Präsenz vieler verschiedener Mikroorganismen und Partikel kompliziert werden kann.

Zukünftige Studien werden darauf abzielen, die Arten und Stämme von Bakterien zu erweitern, die analysiert werden. Indem eine breitere Vielfalt von Daten einbezogen und in verschiedenen Umgebungen getestet wird, kann die Effektivität der Methode verbessert werden. Die Forscher hoffen auch, Möglichkeiten zu erkunden, um Daten von Einzelbakterien zu sammeln, was noch spezifischere Informationen liefern könnte.

Fazit

Zusammenfassend bietet die Kombination aus WBE, SERS und maschinellen Lerntechniken eine kraftvolle Möglichkeit, bakterielle Krankheitserreger im Abwasser zu überwachen. Durch die Verbesserung der Detektion von Bakterien und die Verwendung intelligenter Algorithmen zur Klassifizierung könnte dieser Ansatz ein wichtiges Werkzeug im Bereich der öffentlichen Gesundheit werden. Während die Forscher weiterhin diese Methoden verfeinern, hoffen sie, bakterielle Ausbrüche besser verfolgen und darauf reagieren zu können, um möglicherweise grössere Gesundheitskrisen in der Zukunft zu verhindern.

Originalquelle

Titel: Bacterial Wastewater-Based Epidemiology Using Surface-Enhanced Raman Spectroscopy and Machine Learning

Zusammenfassung: Wastewater-based epidemiology (WBE) is a powerful tool for monitoring community disease occurrence, but current methods for bacterial detection suffer from limited scalability, the need for a priori knowledge of the target organism, and the high degree of genetic similarity between different strains of the same species. Here, we show that surface-enhanced Raman spectroscopy (SERS) can be a scalable, label-free method for detection of bacteria in wastewater. We preferentially enhance Raman signal from bacteria in wastewater using positively-charged plasmonic gold nanorods (AuNRs) that electrostatically bind to the bacterial surface. Transmission cryoelectron microscopy (cryoEM) confirms that AuNRs bind selectively to bacteria in this wastewater matrix. We spike the bacterial species Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus aureus, Serratia marcescens, and Escerichia coli and AuNRs into filter-sterilized wastewater, varying the AuNR concentration to achieve maximum signal across all pathogens. We then collect 540 spectra from each species, and train a machine learning (ML) model to identify bacterial species in wastewater. For bacterial concentrations of 109 cells/mL, we achieve an accuracy exceeding 85%. We also demonstrate that this system is effective at environmentally-realistic bacterial concentrations, with a limit of bacterial detection of 104 cells/mL. These results are a key first step toward a label-free, high-throughput platform for bacterial WBE.

Autoren: Liam K Herndon, Y. Zhang, F. Safir, B. Ogunlade, H. B. Balch, A. Boehm, J. A. Dionne

Letzte Aktualisierung: 2024-07-23 00:00:00

Sprache: English

Quell-URL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.07.22.604506

Quell-PDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.07.22.604506.full.pdf

Lizenz: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/

Änderungen: Diese Zusammenfassung wurde mit Unterstützung von AI erstellt und kann Ungenauigkeiten enthalten. Genaue Informationen entnehmen Sie bitte den hier verlinkten Originaldokumenten.

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