Die Rolle von Wolbachia in der Insektenentwicklung
Forschung zeigt, wie Wolbachia das Wachstum und den Stoffwechsel bei Drosophila beeinflusst.
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Inhaltsverzeichnis
- Fliegenpflege und Experimentaufbau
- Untersuchung der Genexpression in Larven
- Weitere Untersuchung der Genexpression von Wolbachia
- Ernährungsexperimente
- Untersuchung des Stoffwechsels unter Ernährungsstress
- Verständnis der Rolle bestimmter Nährstoffe
- Unterschiede in Grösse und Geschlechtseinflüsse
- Wie Wolbachia den Stoffwechsel und die Entwicklung beeinflusst
- Untersuchung von Änderungen in der Genexpression
- Metabolomik-Analyse
- Fazit
- Originalquelle
Einige winzige Mikroben werden von der Mutter auf die Nachkommen übertragen, und im Laufe der Zeit haben sie verschiedene Wege entwickelt, um die Biologie ihrer Wirte zu beeinflussen. Diese Mikroben, oft Bakterien, helfen sich selbst, indem sie die Ernährung ihres Wirts verändern, Schutz gegen Infektionen bieten und sogar die Fortpflanzung beeinflussen. Eine bekannte Gruppe ist Wolbachia, die viele Insekten und andere kleine Kreaturen infiziert. Diese Bakterien sind besonders bemerkenswert wegen ihrer Auswirkungen auf die Fortpflanzung der Wirte und das Geschlechterverhältnis.
Wolbachia kann sich sogar verbreiten, ohne direkt zu beeinflussen, wie Wirte sich fortpflanzen, und Forscher entdecken immer weitere Vorteile, die diese Bakterien ihren Insektenwirten bieten. Zum Beispiel können einige Wolbachia-Stämme Insekten dabei helfen, andere Infektionen, besonders virale, abzuwehren. Das hat zu einem grossen Interesse geführt, Wolbachia als Werkzeug zur Kontrolle von krankheitsübertragenden Insekten zu nutzen. In anderen Fällen liefert Wolbachia wichtige Nährstoffe für seine Wirte, wie B-Vitamine, die für bestimmte blutsaugende Insekten entscheidend sind.
Forschungen haben gezeigt, dass Wolbachia auch die Funktionsweise von Genwegen, die für den Aufbau von Nukleotiden zuständig sind, bei Fruchtfliegen (Drosophila melanogaster) verändert. Diese Wege sind entscheidend für die Herstellung der Bausteine, die Organismen für ihre Zellen benötigen. Der Einfluss von Wolbachia auf diese Gene deutet darauf hin, dass ihre Beziehung zu ihren Insektenwirten über die Fortpflanzung hinausgeht und eine wichtige Rolle in der Biologie des Wirts spielt.
Fliegenpflege und Experimentaufbau
Um diese Beziehung weiter zu studieren, hielten die Forscher verschiedene Stämme von Drosophila, einige infiziert mit Wolbachia und andere nicht. Die Fliegen wurden unter kontrollierten Bedingungen mit einer bestimmten Art von Futter gezüchtet. Um zu überprüfen, ob die Fliegen mit Wolbachia infiziert waren, verwendeten die Wissenschaftler eine Methode namens PCR.
Es wurden zwei Haupttypen von Fliegenstämmen untersucht: ein Wildtyp-Stamm, bekannt als DGRP-320, der Wolbachia trägt, und ein anderer Stamm namens w145, der ebenfalls mit Wolbachia infiziert ist. Um Fliegen ohne Wolbachia zu erzeugen, behandelten die Wissenschaftler sie über mehrere Generationen mit Antibiotika und führten dann Bakterien aus gesunden Fliegen wieder ein, um ihr Mikrobiom im Darm wiederherzustellen.
Genexpression in Larven
Untersuchung derDie Forscher schauten sich die zweiten Larvenstadien (L2) an, um zu verstehen, wie Wolbachia die Genexpression beeinflusst. Sie sammelten Gruppen von Larven, sowohl infizierte als auch uninfizierte mit Wolbachia, um ihre Gene zu analysieren. Dies umfasste das Paaren von erwachsenen Fliegen, das Sammeln der Larven und das Einfrieren zur weiteren Analyse.
Mit fortschrittlichen Techniken extrahierten die Forscher RNA aus den Larven und sequenzierten sie, um zu sehen, welche Gene in jeder Gruppe ein- oder ausgeschaltet waren. Sie entdeckten, dass über 1.400 Gene signifikante Unterschiede in der Expression zwischen Wolbachia-infizierten und uninfizierten Larven zeigten. Viele dieser Gene sind entscheidend für Entwicklung und Stoffwechsel.
Unter den unterschiedlich exprimierten Genen (DEGs) gab es wichtige Regulatoren der Entwicklung, wie Gene, die an der Insulin-Signalgebung und dem Wachstum beteiligt sind. Sie fanden heraus, dass einige Gene, die mit der Energieproduktion in Zellen zusammenhängen, insbesondere solche, die mit Mitochondrien verbunden sind, ebenfalls von Wolbachia beeinflusst wurden.
Interessanterweise zeigte die Forschung, dass auch die Gene des Immunsystems als Reaktion auf Wolbachia verändert wurden, was darauf hindeutet, dass die Bakterien mit der Immunantwort des Wirts interagieren. Insgesamt führte die Anwesenheit von Wolbachia zu signifikanten Veränderungen in der Expression einer Vielzahl von Genen, die an kritischen biologischen Prozessen beteiligt sind.
Weitere Untersuchung der Genexpression von Wolbachia
Die Forscher untersuchten auch die Genexpression von Wolbachia selbst während der Entwicklung der Fliegen. Sie verwendeten zuvor gesammelte Daten, um zu analysieren, wie die Gene von Wolbachia in verschiedenen Entwicklungsstadien der Fliegen exprimiert wurden. Sie stellten fest, dass die Expression der Wolbachia-Gene sich signifikant änderte, wenn die Fliegen Metamorphose durchliefen, insbesondere während sie sich darauf vorbereiteten, Puppen zu werden.
Die Ergebnisse deuteten darauf hin, dass bestimmte Cluster von Wolbachia-Genen in verschiedenen Entwicklungsstadien aktiver waren. Vor dem Eintritt in die Puppenphase waren tiefere Expressionen zu finden, während andere Gene danach aktiver waren. Das deutet darauf hin, dass die Bakterien an verschiedenen Entwicklungszeitpunkten im Lebenszyklus ihres Wirts spezifische Rollen spielen könnten.
Ernährungsexperimente
Um die Rolle der Ernährung zu verstehen, führten die Forscher Experimente durch, bei denen sie die Stärke des Futterangebots für die Fliegen varierten. Sie testeten, wie gut Fliegen auf reichhaltigem Futter im Vergleich zu verdünntem Futter gedeihen konnten. Sie beobachteten, dass Wolbachia-infizierte Fliegen einen Vorteil in ihrer Entwicklung hatten, wenn das Futter begrenzt war.
Unter diesen Bedingungen entwickelten sich die mit Wolbachia infizierten Fliegen nicht nur schneller, sondern hatten auch eine höhere Überlebensrate bis zum Erwachsenenalter als ihre uninfizierten Pendants. Es wurden signifikante Unterschiede sowohl bei den Puppenraten (der Transformation zu Puppen) als auch bei den Erwachsenenraten (dem Erscheinen der erwachsenen Fliegen) beobachtet.
Als das Futter sehr begrenzt war, war die Leistung der mit Wolbachia infizierten Fliegen noch auffälliger. Obwohl diese Fliegen in extremer Ernährungsschweiz langsamer entwickelten, hatten sie dennoch bessere Überlebensraten und erreichten grössere Grössen im Vergleich zu uninfizierten Fliegen.
Stoffwechsels unter Ernährungsstress
Untersuchung desUm die metabolischen Effekte von Wolbachia weiter zu erforschen, führten die Forscher weitere Tests an Larven durch, die unter unterschiedlichen Futterbedingungen aufgezogen wurden, einschliesslich steriler Umgebungen, in denen keine anderen Mikroben vorhanden waren. Sie massen, wie sich diese Bedingungen auf die Entwicklung und das Überleben der Fliegen auswirkten.
Selbst als andere Mikroben entfernt wurden, zeigten Wolbachia-infizierte Fliegen weiterhin einen Entwicklungsvorteil, was bestätigte, dass die Effekte hauptsächlich auf Wolbachia und nicht auf andere Bakterien zurückzuführen waren. Dieser Vorteil war auch sichtbar, als die Fliegen mit nährstoffarmen Diäten gefüttert wurden.
Neben der Messung des Überlebens schauten sie sich auch die Grössen der Puppen an. Fliegen, die mit Wolbachia infiziert waren, erreichten durchweg grössere Grössen. Die Ergebnisse deuteten darauf hin, dass Wolbachia positiv zu den Nährstoffen beiträgt, die den Larven zur Verfügung stehen, was letztendlich ihr Wachstum und ihre Entwicklung fördert.
Verständnis der Rolle bestimmter Nährstoffe
Um zu untersuchen, welche Nährstoffe zu den beobachteten Vorteilen beitrugen, ergänzten die Forscher das Futter mit verschiedenen Nährstoffen, wobei sie sich speziell auf Verbindungen konzentrierten, die für den Aufbau von Nukleotiden, die entscheidend für die DNA- und RNA-Synthese sind, wichtig sind.
Sie fanden heraus, dass die Zugabe bestimmter Nährstoffe die Entwicklungsprobleme bei wolbachia-freien Fliegen beheben konnte. Zum Beispiel brachte die Zugabe von Uridin (einem Nukleotidbestandteil) signifikante Vorteile für das Wachstum und das Überleben von uninfizierten Fliegen, sodass sie erfolgreicher das Erwachsenenalter erreichten.
Allerdings hatten nicht alle zusätzlichen Nährstoffe positive Effekte. Die Zugabe von Inosin, einem anderen Nukleotid, erwies sich als toxisch für alle Fliegenstämme, was die Komplexität der Auswirkungen dieser Verbindungen auf die Fliegen unterstreicht.
Die Ergebnisse deuteten darauf hin, dass Wolbachia möglicherweise einige der benötigten Nukleotide bereitstellt, wodurch die metabolische Belastung für die Fliegen in Zeiten ernährungsbedingter Herausforderungen verringert wird.
Unterschiede in Grösse und Geschlechtseinflüsse
Die Forscher erkundeten, ob die Grössenunterschiede zwischen Wolbachia-infizierten und uninfizierten Fliegen durch das Geschlecht der Fliegen beeinflusst wurden. Sie entdeckten, dass weibliche Fliegen mehr von der Anwesenheit von Wolbachia profitierten und grössere Grössen im Vergleich zu ihren uninfizierten Pendants erreichten.
Die Grösse der Puppen wurde gemessen, und es wurde festgestellt, dass weibliche Fliegen eine signifikante Grössenzunahme durch Wolbachia zeigten als die Männchen. Das deutet darauf hin, dass Wolbachia das Wachstum bei Weibchen effektiver steigert, was Implikationen für den Fortpflanzungserfolg haben könnte.
Wie Wolbachia den Stoffwechsel und die Entwicklung beeinflusst
Die Studie ergab, dass die Wolbachia-Infektion den Stoffwechsel von Drosophila direkt beeinflusst. Die Wechselwirkungen zwischen dem Wirt und den Bakterien weisen auf eine komplexe und vorteilhafte Beziehung hin, insbesondere unter nährstoffarmen Bedingungen.
Als die Forscher untersuchten, wie die Anwesenheit von Wolbachia den Stoffwechsel der Fliegen veränderte, fanden sie Verbindungen zu verschiedenen Stoffwechselwegen. Zum Beispiel zeigten der Stoffwechsel von Purinen und Pyrimidinen signifikante Veränderungen, die für die Zellproliferation und Energieprozesse entscheidend sind.
Die Forschung deutete auch darauf hin, dass Veränderungen im Stoffwechsel der Wirtsfliegen beeinflussen könnten, wie Wolbachia innerhalb von ihnen agiert und überlebt. Die Wechselwirkungen zwischen den beiden könnten zu gegenseitigen Vorteilen führen, bei denen sowohl die Bakterien als auch die Fliegen die Funktionen des jeweils anderen unterstützen.
Untersuchung von Änderungen in der Genexpression
Die Forscher führten weitere Analysen durch, um zu sehen, wie die Anwesenheit von Wolbachia die Expression bestimmter Gene, die mit der Nukleotidsynthese bei Fliegen zusammenhängen, verändert. Indem sie bestimmte Gene, die mit der Nukleotidsynthese verbunden sind, herunterregulierten, konnten sie beobachten, wie sich das auf die Wolbachia-Spiegel innerhalb der Wirte auswirkte.
Als wichtige Gene, die an der Purinsynthese beteiligt waren, unterdrückt wurden, gab es keine signifikanten Veränderungen in den Wolbachia-Spiegeln. Aber als Gene, die mit der Pyrimidinsynthese in Verbindung standen, angesprochen wurden, gab es einen bemerkenswerten Anstieg der Wolbachia-Dichte, was darauf hindeutet, dass diese Bakterien gedeihen, wenn die Fähigkeit des Wirts, Pyrimidine herzustellen, beeinträchtigt ist.
Diese Reaktionsfähigkeit deutet darauf hin, dass Wolbachia möglicherweise eine Rolle bei der Regulierung des Stoffwechsels des Wirts spielt und die Nährstoffe, die von der Fliege bereitgestellt werden, effizienter nutzt.
Metabolomik-Analyse
Um tiefer zu erforschen, wie Wolbachia den gesamten Stoffwechsel von Drosophila beeinflusst, führten die Forscher eine detaillierte Analyse der Metaboliten in den Larven durch. Die Ergebnisse zeigten signifikante Unterschiede in den Stoffwechselprofilen von Fliegen, die mit Wolbachia infiziert waren, im Vergleich zu ihren uninfizierten Pendants.
Die Studie deutete darauf hin, dass bestimmte Metaboliten, die mit dem Abbau von Purinen verbunden sind, in Fliegen, die mit Wolbachia infiziert waren, reduziert waren. Das deutet darauf hin, dass die Bakterien die oxidativen Stressreaktionen innerhalb des Wirts modulieren könnten, was potenziell der allgemeinen Gesundheit der Fliegen zugutekommt.
Darüber hinaus war die Anwesenheit von Wolbachia mit verringerten Spiegeln bestimmter Aminosäuren und Metaboliten verbunden, die an Redox-Reaktionen beteiligt sind. Das weist auf die Rolle der Bakterien hin, den Stoffwechsel des Wirts zu gestalten und möglicherweise dessen Stressresistenz zu verbessern.
Fazit
Die Ergebnisse dieser umfangreichen Forschung zeigen, dass Wolbachia-Infektionen einen erheblichen Einfluss auf die Entwicklung, Grösse und die Stoffwechselprozesse von Drosophila melanogaster haben. Die Beziehung ist komplex, wobei sowohl die Bakterien als auch die Fliegen von ihrer Interaktion profitieren, insbesondere unter ernährungsbedingten Einschränkungen.
Wolbachia scheint das Wachstum der Larven zu unterstützen, die Überlebensraten zu erhöhen und essentielle Nährstoffe, insbesondere Pyrimidine, bereitzustellen. Diese Beiträge helfen zu erklären, warum einige Mikroben sich entwickelt haben, um in Symbiose mit ihren Wirten zu leben, und bieten wertvolle Einblicke in die Wechselwirkungen zwischen Wirten und Mikroben, die möglicherweise auch auf andere Systeme übertragbar sind.
Während Wissenschaftler weiterhin diese Beziehungen untersuchen, werden die Auswirkungen mikrobieller Infektionen auf die Biologie und Entwicklung von Wirten zunehmend deutlich, mit potenziellen Anwendungen in der Schädlingsbekämpfung und im Verständnis von Krankheitsdynamiken in breiteren ökologischen Kontexten.
Titel: The intracellular symbiont Wolbachia alters Drosophila development and metabolism to buffer against nutritional stress
Zusammenfassung: The intracellular bacterium Wolbachia is a common symbiont of many arthropods and nematodes, well studied for its impacts on host reproductive biology. However, its broad success as a vertically transmitted infection cannot be attributed to manipulations of host reproduction alone. Using the Drosophila melanogaster model and their natively associated Wolbachia strain "wMel", we show that Wolbachia infection supports fly development and buffers against nutritional stress. Wolbachia infection across several fly genotypes and a range of nutrient conditions resulted in reduced pupal mortality, increased adult emergence, and larger size. We determined that the exogenous supplementation of pyrimidines partially rescued developmental phenotypes in the Wolbachia-free flies, and that Wolbachia titers were responsive to reduced gene expression of the flys de novo pyrimidine synthesis pathway. In parallel, transcriptomic and metabolomic analyses indicated that Wolbachia impacts larval biology far beyond pyrimidine metabolism. Wolbachia-infected larvae had strong signatures of shifts in glutathione and mitochondrial metabolism, plus significant changes in the expression of key developmental regulators including Notch, the insulin receptor (lnR), and the juvenile hormone receptor Methoprene-tolerant (Met). We propose that Wolbachia acts as a beneficial symbiont to support fly development and enhance host fitness, especially during periods of nutrient stress. SIGNIFICANCEWolbachia is a bacterial symbiont of arthropods and nematodes, well described for its manipulations of arthropod reproduction. However, many have theorized there must be more to this symbiosis, even in well-studied Wolbachia-host relationships such as with Drosophila. Reproductive impacts alone cannot explain the success and ubiquity of this bacterium. Here, we use Drosophila melanogaster and their native Wolbachia infections to show that Wolbachia supports fly development and significantly buffers flies against nutritional stress. These developmental advantages might help explain the ubiquity of Wolbachia infections.
Autoren: Amelia RI Lindsey, J. Tennessen, M. A. Gelaw, M. W. Jones, A. J. Parish, I. L. Newton, T. Nemkov, A. D'Alessandro, M. Rai, N. Stark
Letzte Aktualisierung: 2024-05-21 00:00:00
Sprache: English
Quell-URL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2023.01.20.524972
Quell-PDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2023.01.20.524972.full.pdf
Lizenz: https://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0/
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