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Fortschritte bei der Genomassemblierung von Pflanzenorganellen

Neues Toolkit Oatk verbessert die Assemblierung von Genomen pflanzlicher Organellen.

Richard Durbin, C. Zhou, M. Brown, M. Blaxter, The Darwin Tree of Life Project Consortium, S. A. McCarthy

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Inhaltsverzeichnis

Pflanzenzellen haben spezielle Teile, die man Organellen nennt, die ihnen helfen, zu funktionieren. Zwei wichtige Organellen sind Plastiden und Mitochondrien. Plastiden sind bekannt für ihre Rolle bei der Photosynthese, also wie Pflanzen Sonnenlicht in Energie umwandeln. Mitochondrien helfen bei der Atmung, einem Prozess, der Energie aus Nahrung in eine Form umwandelt, die Pflanzen nutzen können. Sowohl Plastiden als auch Mitochondrien haben ihre eigene DNA, die sich über lange Zeit durch Evolution verändert hat.

Die DNA von Plastiden und Mitochondrien

Die DNA in Plastiden, Plastome genannt, hat normalerweise eine einheitliche Grösse, die normalerweise von 120 bis 160 Tausend Basenpaaren reicht. Diese DNA hat die Form eines Kreises und hat verschiedene Bereiche, die für ihre Funktion wichtig sind. Im Gegensatz dazu kann die mitochondriale DNA, bekannt als Mitogenome, in der Grösse stark variieren. Sie kann so klein wie ein paar Zehntausend Basenpaare oder über zehn Millionen Basenpaare sein. Mitochondriale DNA kann verschiedene Formen annehmen, wie z. B. kreisförmig oder linear, und hat verschiedene Strukturen, was sie vielfältiger macht als Plastid-DNA.

Bedeutung der Organellen-DNA

Die DNA dieser Organellen ist nicht nur wichtig für die Funktionen der Pflanzen; sie kann auch nützliche Informationen über die Vielfalt der Pflanzen und ihre evolutionäre Geschichte liefern. Wissenschaftler nutzen oft die DNA der Organellen, um Beziehungen zwischen verschiedenen Pflanzenarten zu untersuchen und um sie zu identifizieren.

Techniken zur Sequenzierung von Organellen-DNA

Um die Organellen-DNA zu studieren, verwenden Wissenschaftler verschiedene Methoden zur Sequenzierung. Zunächst wurden Sanger-Sequenzierungsmethoden eingesetzt, die arbeitsintensiv und teuer sind. Neuere Methoden beinhalten die Sequenzierung des gesamten Genoms aus der DNA von Zellen. Dieser neuere Ansatz ist schneller und kostengünstiger, bringt aber auch Herausforderungen mit sich, insbesondere wegen der wiederholten Sequenzen, die in den meisten Pflanzenorganellen-DNA vorkommen.

Der Bedarf an neuen Werkzeugen

Angesichts dieser Herausforderungen gibt es einen Bedarf an spezieller Software, die entwickelt wurde, um Organellengenome aus den gesammelten Daten zusammenzusetzen. Es stehen mittlerweile mehrere Werkzeuge zu diesem Zweck zur Verfügung, die hauptsächlich für die Arbeit mit Hochdurchsatz-Sequenzierungsdaten konzipiert sind. Diese Werkzeuge haben einige gemeinsame Schritte, wie zum Beispiel das Unterscheiden zwischen Organellen-DNA und nukleärer DNA und das Zusammenfügen von DNA-Fragmente zu vollständigen Genomen.

Die Entwicklung von Oatk

Um die Probleme mit bestehenden Werkzeugen anzugehen, wurde ein neues Toolkit namens Oatk erstellt. Oatk zielt darauf ab, Plastid- und mitochondrialen Genome effizient aus hochwertigen Langlesen-Sequenzierungsdaten zusammenzustellen. Es ist benutzerfreundlich und schnell gestaltet. Oatk verwendet einige wichtige Techniken: eine smarte Methode zur Zusammenstellung von Genomen, ein Modell zur genaueren Identifizierung von Genen und fortschrittliche Methoden zur Lösung komplexer Zusammenbau-Strukturen.

Verwendung von Oatk zur Genom-Zusammenstellung

Oatk wurde verwendet, um Organellen-Genome für 195 verschiedene Pflanzenarten zusammenzustellen. Die Zusammenstellungsergebnisse wurden mit anderen Werkzeugen verglichen, um die Leistung von Oatk zu bewerten. Die Ergebnisse zeigten, dass Oatk in vielen Fällen besser abschnitt als andere Werkzeuge und selbst in schwierigen Situationen erfolgreich Genome zusammenstellen konnte.

Zusammenfassung der Zusammenstellungsergebnisse

Von den 195 untersuchten Pflanzenarten konnte Oatk erfolgreich sowohl plastidale als auch mitochondriale Genome für alle zusammenstellen. Die meisten dieser Genome waren kreisförmig, obwohl einige linear waren. Die Ergebnisse zeigten eine breite Palette von Genomegrössen und -strukturen unter den verschiedenen Arten.

Verständnis von Plastidstrukturen

Die meisten zusammengebauten Plastid-Genome hatten eine gemeinsame Struktur, die verschiedene Regionen umfasst, die für ihre Funktion notwendig sind. Es gab jedoch auch Beispiele für Plastid-Genome mit Variationen, was zu unterschiedlichen Genomegrössen innerhalb desselben strukturellen Rahmens führte. Diese Vielfalt war besonders bei verschiedenen Pflanzengruppen wie Gräsern und Moosen zu sehen.

Einblicke in mitochondriale Strukturen

Die mitochondrialen Genome zeigten noch grössere Vielfalt in Grösse und Struktur als Plastid-Genome. Sie reichten von einfachen kreisförmigen Formen bis zu komplexen Anordnungen mit mehreren kreisförmigen Komponenten. Einige Arten hatten ungewöhnliche Strukturen, wie z. B. lineare Komponenten. Diese Komplexität unterstrich die dynamische Natur der Mitogenome bei verschiedenen Pflanzenarten.

Heteroplasmie in Organellen

Heteroplasmie, bei der es innerhalb derselben Zelle mehrere unterschiedliche Formen von Organellen-DNA gibt, wurde häufig beobachtet. Das deutet darauf hin, dass Pflanzen mehr als eine Version ihrer Organellen-Genome beibehalten können, was aus genetischen Veränderungen im Laufe der Zeit resultieren kann. Das Vorhandensein unterschiedlicher Formen von Plastid- und mitochondrialer DNA innerhalb einzelner Pflanzen deutet auf einen komplexen Evolutions- und Anpassungsprozess hin.

Genübertragungen zwischen Organellen

Eine weitere interessante Entdeckung war das Teilen von DNA-Sequenzen zwischen Plastid- und mitochondrialen Genomen. Das deutet darauf hin, dass es historische Austausche von genetischem Material zwischen diesen Organellen gegeben haben könnte, was deren Strukturen weiter kompliziert. Wissenschaftler fanden viele gemeinsame DNA-Sequenzen, was betont, wie miteinander verbunden diese beiden Organellen sein könnten.

Fazit

Zusammenfassend zeigen die Fortschritte von Oatk ein grosses Potenzial, um die Genome der Pflanzenorganellen effektiver zu studieren. Durch die effiziente Zusammenstellung von Organellen-DNA aus hochwertigen Langlesen kann Oatk helfen, die riesige Vielfalt und Komplexität der Pflanzen-Genome offenzulegen. Das Verständnis dieser Genome ist entscheidend, um zu begreifen, wie Pflanzen sich entwickelt haben und wie sie in ihren Umgebungen funktionieren. Das Studium der Organellen-Genome öffnet Türen zu einem besseren Verständnis der Pflanzenbiologie, Evolution und Biodiversität.

Originalquelle

Titel: Oatk: a de novo assembly tool for complex plant organelle genomes

Zusammenfassung: Plant organelle genomes, particularly the large mitochondrial genomes with intricate repetitive structures, present significant challenges for assembly. The advent of long-read sequencing technologies provides a transformative opportunity to generate complete genomes, but problems of resolving alternative structures remain. Here we introduce a novel tool for plant organelle genome assembly from high-accuracy long reads. Our method employs a k-mer based assembler for rapid assembly graph construction, integrates a profile HMM gene database for robust organelle sequence annotation, and leverages a new search method to find the best supported path through the assembly graph. We describe high-quality organelle assemblies for 195 plant species and demonstrate improvements over other methods. The assembled genomes provide multiple insights into structural complexity, heteroplasmy, and DNA exchange between organelles.

Autoren: Richard Durbin, C. Zhou, M. Brown, M. Blaxter, The Darwin Tree of Life Project Consortium, S. A. McCarthy

Letzte Aktualisierung: 2024-10-28 00:00:00

Sprache: English

Quell-URL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.10.23.619857

Quell-PDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.10.23.619857.full.pdf

Lizenz: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/

Änderungen: Diese Zusammenfassung wurde mit Unterstützung von AI erstellt und kann Ungenauigkeiten enthalten. Genaue Informationen entnehmen Sie bitte den hier verlinkten Originaldokumenten.

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