植物における転移可能な要素と熱ストレス
研究が、A. thalianaにおける熱ストレス下でのTEが遺伝子発現にどう影響するかを明らかにした。
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転写可能要素(TEs)は、植物のDNAの構造において大きな役割を果たしてるんだ。トウモロコシ、小麦、オオムギみたいな一般的な作物では、TEsがDNAの大部分を占めていて、時には80%にもなることがあるんだよ。これらの要素は植物にとって問題を引き起こすこともあるから、通常はDNAメチル化っていうプロセスで抑えられるんだ。これはDNAに化学的なタグを追加して、これらの要素を非活性化する方法なんだ。植物がこれらのTEsを抑える主要な方法の一つは、RNA指向DNAメチル化(RdDM)っていう特定のメカニズムを通じて行われるよ。この方法では特定の植物専用RNAポリメラーゼが関与して、TEsにメチル基を加えることで発現を抑える手助けをするんだ。
抑制方法にもかかわらず、一部のTEsはまだ植物のDNAの中で動いたりして、種内の遺伝的な違いに寄与してるよ。例えば、ある研究では、アラビドプシス・タリナ(Arabidopsis thaliana)に約23,000のTE挿入部位が見つかって、TEsがその全DNAの約21%を占めていることがわかったんだ。
環境ストレス、例えば温度の変化や害虫との相互作用がTEsに影響を与え、一部は植物の抑制方法を逃れることができるんだ。熱に反応することで有名なTEはONSENって呼ばれるもので、アラビドプシスの苗が高温にさらされると活性化されることがあるんだ。このTEが活性化されると、自分自身を植物のDNAの新しい場所にコピーできるようになるんだよ。
ONSENの面白い特徴の一つは、近くの遺伝子に影響を与えることができるってこと。これはONSENが遺伝子発現を活性化するためのタンパク質を引き寄せる特別な配列を持っているからなんだ。このONSENが近くの遺伝子に影響を与えるってことがわかったことで、これらのTEsが植物の進化にどう寄与するかっていう重要な疑問が浮かび上がってきたんだ。
ONSENが発見されて以来、研究者たちはアラビドプシスの中で他の熱応答性TEsも特定したよ。例えば、Copia-35っていうのがあるんだけど、ONSENは詳しく研究されてるのに対して、Copia-35の具体的な影響についてはまだよくわかってない。特定のCopia-35のバージョンがAPUM9っていう遺伝子に影響を与えることがあるって研究もあるけど、この遺伝子の自然なバリエーションについてはあまり探求されてないんだ。
シーケンシングの技術の進歩が、科学者がTEsに関連する遺伝的多様性をより効果的に分析する手助けをしてる。ロングリードシーケンシング技術を使うことで、これらの要素の完全な配列が得られて、より深い洞察が得られるんだ。TEsからのRNAを分析するのにはまだ課題があるけど、新しい方法が出てきて、遺伝子発現や特定のTEsの役割を個別に調査するのが楽になってきてるよ。
この研究では、アラビドプシスの異なる自然な系統が熱にさらされたときにTEsがどう表現されるかに焦点を当てたんだ。TEの活性化が近くの遺伝子にどう影響するかを見るのが目的だったんだ。事前に高品質でシーケンシングされた異なる系統を選んで、この分析を行ったよ。高度なシーケンシング技術を使って、これらのTEsがどう振る舞い、近くの遺伝子に影響を与えるかを詳しく調べたんだ。
シーケンシング技術の比較
異なる系統(Col-0、Ler-1、Cvi-0)の植物を制御された条件下で育てて、熱ストレスにもさらしたよ。RNAシーケンシングを行って、従来のショートリードシーケンシングとOxford Nanopore Technologies(ONT)を使ったロングリードシーケンシングの2つの方法からのデータを比較したんだ。集めたデータの質を評価して、熱処理の成功も遺伝子発現パターンを評価することで確認したよ。結果は、各系統が熱ストレスに対する反応に明確な違いがあることを示していて、それぞれの植物型で特定の反応が誘発されたことがわかったんだ。
ONSENとCopia-35の発現
次に、ONSENとCopia-35のTEの発現レベルを見たんだ。RNAシーケンシングデータを分析することで、熱ストレス下でどのTEが活性化されたかを特定することを目指したよ。分析の結果、ONSENとCopia-35は熱ストレス中に特にCvi-0系統で有意に高い発現レベルを示してることがわかった。これから、Copia-35もONSENと一緒に熱に反応する重要な役割を果たす可能性があるってことが示唆されたんだ。
個々のTE挿入の発現の変動
TE発現の全体的な分析の後、研究は熱ストレス中のONSENとCopia-35の個々のコピーがどう振る舞うかを調べたよ。研究者たちは、異なる系統における両方のTEのいくつかのフルレングスコピーを特定したんだ。データは、個々のTEコピー間に発現レベルの有意な違いがあることを示したよ。例えば、ONSENとCopia-35は、熱ストレス下での活動レベルが異なっていて、いくつかのコピーは他のコピーよりもずっと高い発現を示してたんだ。
高解像度プロファイリング
TEの活性をより理解するために、研究者たちはONTデータを使ってONSENとCopia-35の精密なプロファイリングを行ったんだ。活性なONSENコピーには転写の始点が2つあって、フルレングスのmRNAを生産できることがわかったよ。このレベルの詳細は、従来のRNAシーケンシング方法では明らかにされてなかったんだ。Copia-35についても、研究は転写の始点と終点が複数あることを特定して、これらの要素が複雑な発現パターンを持っていることを強調したよ。
近くの遺伝子に対するTEの影響
近くの遺伝子に対するTEの影響も、この研究でさらに確認されたんだ。ONSENは熱ストレス下で近くの遺伝子をアップレギュレーションすることが示されたよ。このパターンはCopia-35でも観察されて、特にCvi-0系統では、Copia-35が活性化されたときに近くの遺伝子の発現が大きく増加してた。研究者たちは、これらの遺伝子のTEとの近接性が遺伝子発現のレベルと相関していることに気づいて、TEsが近くの遺伝子の調節に大きな影響を与える可能性があるって示唆したんだ。
APUM9の自然変異と開花時期への影響
研究では、Copia-35の存在と開花時期に重要な役割を果たすAPUM9という特定の遺伝子の関係も調べたよ。研究者たちは、Copia-35の挿入がある系統は、ない系統に比べて開花時期が変わっている傾向があることを発見したんだ。この発見は重要で、TEsが遺伝的多様性に寄与するだけでなく、植物の生存や適応に影響を与える重要な特性である開花時期にも関与している可能性があることを示唆してるよ。
結論
全体的に、この研究はONSENやCopia-35のようなTEsが植物のゲノムで果たす多様な役割を浮き彫りにしてるんだ、特に環境ストレスの下でね。研究の結果は、TEsが近くの遺伝子の発現にどう寄与し、適応や生存に重要な特性に影響を与えるかについての理解を深める手助けをしているよ。高度なシーケンシング技術の利用が、これらの複雑な相互作用を理解するための新しい道を開いて、今後の植物の進化に関する遺伝的メカニズムの調査が進むことが期待されるよ。より高品質なゲノムデータが増えるにつれて、植物におけるTEsの理解を深める可能性も広がっていくんだ。
タイトル: Natural diversity of heat-induced transcription of retrotransposons in Arabidopsis thaliana
概要: Transposable elements (TEs) are major components of plant genomes, profoundly impacting the fitness of their hosts. However, technical bottlenecks have long hindered our mechanistic understanding of TEs. Using RNA-Seq and long-read sequencing with Oxford Nanopore Technologies direct cDNA sequencing, we analyzed the heat-induced transcription of TEs in three natural accessions of Arabidopsis thaliana (Cvi-0, Col-0, and Ler-1). In addition to the well- studied ONSEN retrotransposon family, we identified Copia-35 as a second heat-responsive retrotransposon family with particularly high activity in the relict accession Cvi-0. Our analysis revealed distinct expression patterns of individual TE copies and suggest different mechanisms regulating the GAG protein production in the ONSEN versus Copia-35 families. In addition, analogously to ONSEN, Copia-35 activation led to the upregulation of flanking genes such as AMUP9 and potentially to the quantitative modulation of flowering time. Unexpectedly, our results indicate that for both families, the upregulation of flanking genes is not directly initiated by transcription from their 3 LTRs. These findings highlight the inter- and intraspecific expressional diversity linked to retrotransposon activation under stress, providing insights into their potential roles in plant adaptation and evolution at elevated temperatures.
著者: Anne Roulin, W. Xu, M. Thieme
最終更新: 2024-01-16 00:00:00
言語: English
ソースURL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.01.15.575637
ソースPDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.01.15.575637.full.pdf
ライセンス: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
変更点: この要約はAIの助けを借りて作成されており、不正確な場合があります。正確な情報については、ここにリンクされている元のソース文書を参照してください。
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