CFIコンプレックスのmRNA形成における役割
アラビドプシスのCFI複合体成分を調べてmRNA処理と植物の健康について研究中。
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目次
植物では、メッセンジャーRNA(mRNA)を作るプロセスがタンパク質の生産にとって重要なんだ。その中の一つの重要な部分が、mRNAの3'末端の形成で、これを切断とポリアデニル化(CPA)って呼ぶんだ。これは前駆体mRNA分子を切ってアデニンヌクレオチドの配列を追加することを含むんだ。最終的には成熟したmRNAができて、これはmRNAを壊れにくくしたり、核から出るのを助けたり、タンパク質合成を支援したりする重要な役割を果たしてる。
ポリアデニル尾の重要性
アデニンヌクレオチドでできたポリアデニル尾の追加は、mRNAの安定性にとってマジ重要なんだ。この尾はmRNAの分解を防ぎ、タンパク質が作られる細胞質に運ぶのを助ける。ポリアデニル尾は処理されてない前駆体mRNAが核を早く出ないようにするし、翻訳、つまりmRNAからタンパク質を作るプロセスをサポートしてるんだ。
前駆体mRNAとその構造
前駆体mRNA、つまりpre-mRNAには、タンパク質をコードしない領域、つまり非翻訳領域(UTR)があるんだ。アラビドプシス・タリアナでは、多くの遺伝子がポリアデニル尾を追加するためのサイトを複数持ってることが研究で示されてる。どのサイトを使うかは、特定の信号配列やそれらを認識するタンパク質複合体の影響を受けるんだ。前駆体mRNA内の異なる要素がCPAプロセスを導く手助けをしてる。
ポリアデニル化信号の要素
植物では、ポリアデニル化信号は3つの重要な部分で構成されてる:ファーアップストリームエレメント(FUE)、ニアアップストリームエレメント(NUE)、切断エレメント(CE)。FUEは切断プロセスの開始を助けてる。通常はCPAサイトの上流にあって、特定のヌクレオチドが豊富なんだ。NUEはCPAサイトに近くてアデニンが豊富だ。CEは実際の切断に必要で、特定のヌクレオチド配列が尿素に豊富な領域に囲まれてる。
CPAに関与するタンパク質複合体
これらの信号と相互作用するタンパク質は、4つの主要なグループに分けられる。最初のグループはCPSFで、切断がどこで起こるかを決定する役割を持ってる。2番目のグループ、CstFはCPSFと相互作用する。3番目のグループ、CFIIは、研究される植物や生物によって異なる成分を持ってる。4番目のグループ、CFIは切断サイトの選択を調整する手助けをするんだ。
高等植物は、これらのタンパク質複合体において他の生物と似た部分があって、これは異なる種間で機能が保存されてることを示唆してる。
CFIm複合体の機能
人間では、CFIm複合体はmRNAがどこで切られるかを選ぶのに重要なんだ。いくつかのタンパク質で構成されていて、協力して働くんだ。特定のサブユニットの追加は、複合体がmRNAに結合する能力を高めるんだ。これらのサブユニットの機能の変化は、mRNAの処理方法に大きな影響を与えることがあるんだ。
アラビドプシスにおけるCFIの研究
アラビドプシス・タリアナに関する研究でCFI複合体の特定のサブユニットが確認された。AtCFI25aタンパク質は、他の2つのサブユニットであるAtCFI59とAtCFI68と相互作用するんだ。これらのタンパク質間の相互作用を調べることで、mRNA形成プロセスにおける役割を理解することができたんだ。
特定の遺伝子に変異を起こしてAtCFI59やAtCFI68の機能を失わせると、結果としてできた植物には成長や発展に様々な変化が見られるんだ。
成長条件と方法
実験にはアラビドプシス植物を使って、CFI成分の影響を調べるために様々な変異体を作ったんだ。植物は制御された条件下で育てられ、遺伝子発現やタンパク質相互作用を分析するために違った技術が使われたんだ。
遺伝子発現の分析
研究者たちは、様々な植物器官でCFIサブユニットの発現を分析するために異なる方法を利用したんだ。これによって、これらのタンパク質が植物内でどこでいつ活性化するかを確認できた。結果として、AtCFI59とAtCFI68は試験したすべての植物部分に存在することがわかり、広く重要な役割を果たしてることが示されたんだ。
表現型の変化の観察
特定の遺伝子をノックアウトしたとき、研究者たちは植物がしばしば普通の植物に似ているけど、少し根の欠陥や花の構造の違いが見られたんだ。これは、個々のタンパク質が成長に役割を果たす一方で、その完全な欠如が全体的な植物の健康に影響を与える重大な問題を引き起こすことを示唆してるんだ。
花の発達におけるCFIの役割
CFI複合体の要素の欠如や変化は、花の形や大きさだけじゃなくて、生成される種の数にも影響を与えるんだ。変異体植物は小さな花と少ない viableな花粉粒を示し、CFI成分が生殖成功にとって重要だってわかるんだ。
タンパク質相互作用の理解
CFIの異なるタンパク質がどのように相互作用するかを理解するために、いろんな技術が使われた。一つの方法はタンパク質にタグをつけて、それが植物細胞内でどのように結合するかを観察することだったんだ。これによって、AtCFI25aがAtCFI59とAtCFI68の両方と相互作用することが確認されたんだ。この相互作用はCFI複合体の適切な機能にとって重要なんだ。
細胞内局在研究
研究者たちがこれらのタンパク質が細胞内でどこにあるかを調べたとき、AtCFI59とAtCFI68は主に核に存在していることがわかった。でも、AtCFI25aは核にも細胞質にも現れていて、核内で適切に局在するためには他の2つのサブユニットの助けが必要かもしれないんだ。
CFI機能が遺伝子発現に与える影響
CFI複合体の活性は、どのポリアデニル化サイトが使われるかに影響を与え、その結果、生成されるmRNAの長さにも影響を及ぼすんだ。CPAサイトの選択の変化は、生成される転写物の量に違いをもたらすことがあるんだ。場合によっては、CFI複合体の機能喪失が特定のmRNAのレベルを両方とも増加させたり減少させたりすることもあるんだ。
結論
アラビドプシスのCFI複合体は、mRNAの生産プロセスにおいて、mRNAがどのようにどこで切られるかを決定する重要な役割を果たしてるんだ。複合体内のさまざまなタンパク質サブユニット間の相互作用が、mRNAの適切な処理を確保するのを手助けしてる。この調整システムは、遺伝子発現の整合性と全体的な植物の健康を保つために重要なんだ。これらのタンパク質の機能を調べることで、研究者たちは植物生物学の基本的なプロセスについての洞察を得ることができ、これが農業実践や環境の変化に対する植物の反応を理解するための広い意味を持つかもしれないんだ。
タイトル: Plant Cleavage Factor I complex is essential for precise cleavage and polyadenylation site determination
概要: Cleavage factor I (CFI) is a four-subunit protein complex of the pre-mRNA 3 end processing machinery in eukaryotes. In Arabidopsis, AtCFI25a, AtCFI25b, AtCFI59, and AtCFI68 have been identified as potential components of AtCFI, in silico. Here, we show that the AtCFI25a, AtCFI59, and AtCFI68 proteins each pulled down all components of the CFI, confirming that these subunits form the plant CFI complex. Furthermore, either AtCFI59 or AtCFI68 was essential for nuclear localization of the smallest subunit, AtCFI25a. Mutants with single loss-of-function for AtCFI59 or AtCFI68 showed no obvious morphological defects compared to wild-type plants, while the double mutant displayed pleiotropic morphological defects, identical to those previously reported for AtCFI25a loss-of-function plants. Moreover, these morphological defects correlated with alterations in the usage of 3 UTR cleavage and polyadenylation sites. atcfi25a, atcfi25a atcfi25b and atcfi59 atcfi68 double mutants showed widespread changes in the choice of cleavage and polyadenylation sites. In most cases, more proximal cleavage and polyadenylation sites were used, leading to shorter 3 UTRs. In particular, genes involved in light intensity, light harvesting, photosynthesis and cold responses showed significant dependence on AtCFI function. Furthermore, transcripts coding for AtCFI subunits showed altered 3 end processing in these mutants, suggesting self-regulation function of AtCFI in plants.
著者: Artur Jarmolowski, L. Szewc, X. Zhang, M. Bajczyk, D. Bielewicz, M. Zimna, K. Yura, M. Mariko Kato, M. Nomoto, M. Garcia-Leon, V. Rubio, Y. Tada, T. Furumoto, T. Aoyama, Z. Szweykowska-Kulinska, D. Staiger, T. Tsuge
最終更新: 2024-03-28 00:00:00
言語: English
ソースURL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.03.28.587165
ソースPDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.03.28.587165.full.pdf
ライセンス: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
変更点: この要約はAIの助けを借りて作成されており、不正確な場合があります。正確な情報については、ここにリンクされている元のソース文書を参照してください。
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