遺伝子編集で羊の筋肉とウールが強化される
研究は、家畜の特性を改善するためにMSTNとFGF5の変異を組み合わせている。
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目次
ミオスタチン(MSTN)は動物の筋肉成長をコントロールするのに役立つタンパク質だよ。MSTNが変わったり突変したりすると、「ダブルマッスル」っていう筋肉が通常よりも多い状態になることがある。この特性は農業ではとても貴重で、肉の生産が良くなるからさ。科学者たちは、これが人間の消費用の高品質なタンパク質を提供するのにも役立つから興味を持ってるんだ。
さらに、MSTNは筋肉萎縮(筋肉の減少)にも大きな役割を果たしているから、様々な病気に苦しむ患者の筋肉損失を防ぐ治療法のターゲットとして研究されているんだ。
異なる種におけるミオスタチンの役割
MSTNは多くの哺乳類に見られ、筋肉の発達に重要なんだ。MSTN遺伝子の突変は自然に起こることもあれば、人工的に導入されることもあって、様々な種で筋肉量が増えることがある。牛、羊、豚、さらには一部の人間でもこれが観察されてるんだ。
でも、MSTNの突変の具体的な影響は、遺伝子のどこで起こるかによって異なるんだ。これらの突変が筋肉成長にどう影響するかは、まだ研究が進んでいる分野だよ。
フィブロブラスト成長因子5(FGF5)と毛髪成長への影響
もう一つ重要なタンパク質がフィブロブラスト成長因子5(FGF5)で、毛の成長に関与してるんだ。研究によれば、FGF5は毛の成長を遅らせることができるんだ。これが突変すると、アンゴラマウスみたいな動物で毛の成長が増えるんだ。この効果からFGF5は毛の発達に関する研究で注目されているんだ。
羊におけるMSTNとFGF5の突変の組み合わせ
最近の研究では、研究者たちはMSTNとFGF5の両方の突変を持つ羊を作り出そうとしたんだ。CRISPRっていう方法を使ってこれらの遺伝子を編集して、動物の肉と羊毛の生産を高めることを目指したんだ。Cas9 mRNA(編集を実行するのを助ける)とガイドRNA(編集プロセスを指示する)を増やすことで、特定の突変を持つ羊を成功裏に作成したんだ。
特に注目した突変がMSTNDel273Cで、この突変は筋肉繊維のサイズを小さくして、特定のエリア内の繊維の数を増加させた。研究者たちは、この突変を持つ羊が「ダブルマッスル」の表現型に関連する特性を示し、FGF5の突変による毛の成長の変化も見られたんだ。
遺伝子編集羊を生産する方法
これらの編集された羊を作成する過程にはいくつかのステップがある:
Cas9 mRNAとsgRNAの生成
科学者たちは、CRISPRっていうツールを使ってMSTNとFGF5遺伝子をターゲットにする特定のRNA配列を設計したんだ。これらの配列はベクター(運搬体)に挿入されて、羊の細胞に届けられるんだ。
マイクロ注射
次のステップは、これらのRNA配列を胚に注射することだったんだ。特殊な注射器を使ってこれを行って、その後、胚を雌の羊に移植して成長させたんだ。
組織サンプルの収集
羊が一定の年齢に達したら、研究者たちは筋肉の特性を分析したり、突変が成功に行われたか確認するために組織サンプルを収集したんだ。
分析技術
収集したサンプルの筋肉繊維を分析するために、いろんな実験室技術が使われた。これは、筋肉繊維を顕微鏡で可視化するために組織に染色したり、筋肉細胞を分離したり、遺伝子発現の変化をチェックしたりすることを含んだんだ。
MSTNとFGF5の突変が筋肉と毛に与える影響
MSTNDel273Cの突変とFGF5ノックアウトを持つ羊は、いくつかの興味深い特性を示したよ:
筋肉繊維の変化
これらの羊は単位面積あたりの筋肉繊維が多くて、個々の繊維のサイズは小さくなってた。これが組み合わさって、より密な筋肉構造になり、これは「ダブルマッスル」の表現型の期待に合致してたよ。科学者たちは、この変化が肉の質に悪影響を与えなかったことを指摘して、この特性は家畜にとって望ましいものになったんだ。
羊毛の成長
FGF5の突変も毛の成長パターンに変化をもたらしたんだ。研究者たちは、影響を受けた羊で毛の密度と長さが増加したのを観察した。これは農業産業における羊毛生産に影響を与えるかもしれないんだ。
筋肉成長と発達の背後にある細胞メカニズム
これらの突変が筋肉成長に細胞レベルでどう影響するかを理解するために、研究者たちは筋肉細胞の増殖と分化を制御するプロセスを調べたんだ。
筋肉細胞の増殖
筋肉細胞は分裂して新しい細胞を追加することで成長するんだ。編集された羊は筋肉細胞の成長速度が増加していて、これは筋肉を作るのに必要不可欠なんだ。
分化プロセス
でも、細胞の増殖を増加させた同じ突変が、細胞が機能的な筋肉繊維に成熟する分化プロセスを抑制しているようだった。この意味は、筋肉細胞の数は増えたけど、適切な筋肉構造を形成する能力が影響を受けたってことなんだ。
細胞の挙動に影響を与える重要な要因
筋肉細胞の挙動に重要な役割を果たすいくつかの主要なタンパク質と経路が特定されたんだ:
FOSL1とその役割
FOSL1は筋肉細胞の成長と発達に影響を与えるタンパク質だよ。研究では、編集された羊のFOSL1レベルが変わっていて、これは変異体の筋肉繊維の発達の変化と関連していることが示されたんだ。
MEK-ERK経路
もう一つ重要なシグナル経路はMEK-ERK経路で、これは細胞が成長シグナルにどう応答するかを調整するために必要なんだ。MSTNとFGF5の突変の文脈では、この経路は細胞の増殖を促進しながら、分化プロセスを抑制しているようだった。
今後の研究への影響
これらの研究の結果は、今後の研究のためにいくつかの重要なポイントを示しているんだ:
改良された遺伝子編集技術
研究者たちはダブル遺伝子突変を作成する効率を成功裏に増加させた。これは、遺伝子編集材料の供給を最適化することで、遺伝子工学における結果が向上することを示唆しているんだ。
筋肉発達についての理解の向上
これらの編集された羊を研究することで、科学者たちは筋肉の成長と発達の具体的な詳細を深く理解しようとしているんだ。さまざまなタンパク質や経路がどう相互作用するかを理解することで、将来の治療法や農業プラクティスを開発するのに役立つんだ。
医療と農業における可能な応用
これらの突変から得られた洞察は、家畜の改善だけでなく、人間の筋肉関連の健康問題の治療開発にも応用できるかもしれないんだ。この研究は農業革新と医学の進歩の交差点を反映しているんだ。
結論
ミオスタチンやフィブロブラスト成長因子に関する研究は、まだまだ大きな可能性を秘めているんだ。慎重な遺伝子編集を通じて、科学者たちは筋肉の成長と発達の複雑な生物学を明らかにしている。今回の研究での進展は、農業や医療の分野での今後の研究への道を開くもので、家畜生産の改善や人間の筋肉萎縮の治療法の開発の可能性を提供しているんだ。これらの生物学的プロセスの探求は、さらなる応用や利益を解き明かすのに重要になるだろうね。
タイトル: A MSTNDel273C mutation with FGF5 knockout sheep by CRISPR/Cas9 promotes skeletal muscle myofiber hyperplasia
概要: Mutations in the well-known Myostatin (MSTN) produce a "double-muscle" phenotype, which makes it commercially invaluable for improving livestock meat production and providing high-quality protein for humans. However, mutations at different loci of the MSTN often produce a variety of different phenotypes. In the current study, we increased the delivery ratio of Cas9 mRNA to sgRNA from the traditional 1:2 to 1:10, which improves the efficiency of the homozygous mutation of biallelic gene. Here, a MSTNDel273C mutation with FGF5 knockout sheep, in which the MSTN and FGF5 dual-gene biallelic homozygous mutations were produced via the deletion of 3-base pairs of AGC in the third exon of MSTN, resulting in cysteine-depleted at amino acid position 273, and the FGF5 double allele mutation led to inactivation of FGF5 gene. The MSTNDel273C mutation with FGF5 knockout sheep highlights a dominant "double-muscle" phenotype, which can be stably inherited. Both F0 and F1 generation mutants highlight the excellent trait of high-yield meat with a smaller cross-sectional area and higher number of muscle fibers per unit area. Mechanistically, the MSTNDel273C mutation with FGF5 knockout mediated the activation of FOSL1 via the MEK-ERK-FOSL1 axis. The activated FOSL1 promotes skeletal muscle satellite cell proliferation and inhibits myogenic differentiation by inhibiting the expression of MyoD1, and resulting in smaller myotubes. In addition, activated ERK1/2 may inhibit the secondary fusion of myotubes by Ca2+-dependent CaMKII activation pathway, leading to myoblasts fusion to form smaller myotubes.
著者: Zhengxing Lian, M. Chen, Y. Zhao, X. Xu, X. Zhang, J. Zhang, S. Wu, Z. Liu, Y. Yuan, X. Guo, S. Qi, G. Yi, S. Wang, H. Li, A. Wu, G. Liu, K. Yu, S. Deng, H. Han, F. Lv, Y. Li
最終更新: 2024-04-17 00:00:00
言語: English
ソースURL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2023.03.09.531872
ソースPDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2023.03.09.531872.full.pdf
ライセンス: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
変更点: この要約はAIの助けを借りて作成されており、不正確な場合があります。正確な情報については、ここにリンクされている元のソース文書を参照してください。
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