シャーレイア・オドントリティカの生態に関する新たな知見
研究者たちが、ラボ条件でSchaalia odontolyticaを維持するのに必要な遺伝子を明らかにした。
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目次
パテスキバクテリアは、他のバクテリアに依存して生きる小さなバクテリアのグループだよ。だから、自分だけでは実験室でうまく育たないから研究が難しい。最近、科学者たちは、これらのバクテリアとそのホストのペアをいくつか育てることに成功したんだ。その中でも、ナノシンバクター・リティカス(TM7x)とシャーリア・オドントリティカの組み合わせが特に注目されているけど、TM7xを単独で育てるのが難しくて、両方のバクテリアに遺伝子ツールが不足しているため、その相互作用を理解するのが大変だったんだ。
遺伝子ツールの進展
課題があったにもかかわらず、研究者たちはこれらのバクテリアを研究するための新しいツールを開発したよ。例えば、関連するバクテリアの遺伝子を変える方法がいくつか作られたんだ。それに、シャーリア・オドントリティカの遺伝子を変える新しい方法も作り出した。これらのツールを使って、バクテリアのコミュニケーションの仕方、特にTM7xがホストに感染するときの様子を観察できるんだ。
バクテリアの遺伝子を変更できるツールは重要で、どの遺伝子が生存に不可欠かを特定できるんだ。最近の進展は、シャーリアに関連する他のバクテリアの研究にも役立ったけど、シャーリアを研究するためのツールは、ストレプトコッカス・ミュータンスのような一般的なバクテリアに比べてまだ限られているんだ。
トランスポゾン突然変異誘発の利用
必須遺伝子を研究するために科学者たちが使う方法の一つが、トランスポゾン突然変異誘発って呼ばれる技術だ。この技術は、バクテリアにDNAの一部を挿入することで機能するんだ。これが起こると、研究者たちはどの遺伝子が妨害されているかを確認できて、その遺伝子が重要かどうかを判断できるんだ。遺伝子に多くの妨害があれば、その遺伝子は必須でない可能性があるし、少ししか妨害がなければ、必須の可能性が高いんだ。
シャーリア・オドントリティカの必須遺伝子に関する情報を集めるために、科学者たちは多くの異なる突然変異で満たされた特別なタイプのライブラリーを用意したよ。彼らは突変のバリエーションを最大化するために複数のライブラリーを作成し、その後、ディープシーケンシング技術を使ってこれらの突然変異を分析したんだ。
突然変異誘発と収集のステップ
プロセスは、新しいDNAを取り込むためのバクテリアの準備から始まった。バクテリアは、トランスポゾンという特別なDNAの一部を吸収するのを助ける方法で処理されたんだ。バクテリアがトランスポゾンを取り込んだ後、特別な成長媒体に置かれる前に回復する時間が与えられた。そのプロセスを生き延びたバクテリアは、さらなる研究のために収集されたよ。
ミュータントが収集されたら、次のステップはこれらのバクテリアからDNAを抽出することだった。このDNAは清掃され、シーケンシングの準備がされたんだ。この準備の間に、科学者たちは後で異なるDNAの部分を特定するのを助ける特別なマーカーを追加したよ。
ディープシーケンシングとデータ分析
準備が終わった後、DNAは非常に長いDNAを迅速に読み取ることができる強力な機械でシーケンシングされたんだ。その結果は、そのトランスポゾンがどこに挿入されたのかを見るために分析された。科学者たちは、トランスポゾンが挿入されていない領域を探していて、そこにある遺伝子が生存に不可欠であることを示唆しているからね。
分析の結果、シャーリア・オドントリティカの全遺伝子の中で、203の遺伝子が必須である可能性が高いことがわかったんだ。これは、これらの遺伝子が実験室の条件でバクテリアが成長して繁栄するために重要だってことを意味しているよ。
遺伝子機能の理解
研究の次のステップは、これらの必須遺伝子が何をしているのかを理解することだった。必須遺伝子を見て、科学者たちはそれらを代謝や細胞構造などの機能に基づいて分類できるんだ。彼らは、多くの必須遺伝子がエネルギーを生産したり、細胞の構造を形成したりするために必要な基本的な機能に関連していることを発見したよ。
面白いことに、いくつかの必須遺伝子には明確な役割や他のバクテリアに類似した遺伝子がなかったことにも注目したんだ。これは、シャーリア・オドントリティカのようなバクテリアがどのように機能しているのかを理解する上でまだ多くの謎が残っていることを示しているね。
必須遺伝子のパターン
研究者たちは、必須遺伝子がバクテリアのDNA上にどこに位置しているかを示す特別な視覚ツールを使って彼らの発見を示したよ。この情報は、どの遺伝子が一緒に働くのか、そしてそれがバクテリア全体の健康にどのように寄与するのかを特定するのに役立つんだ。
特定のタイプのタンパク質、いわゆるシャペロンが必須であることがわかったよ。これらのタンパク質は、他のタンパク質が正しく折りたたまれて適切に機能するのを助けるんだ。研究者たちは、何の突然変異も見られない特定の遺伝子の領域があることにも気づいたんだ。これはそれらの重要性を強調しているよ。
バクテリア研究の未来
シャーリア・オドントリティカのようなバクテリアの必須遺伝子を研究することは、バクテリアが互いに、そして環境とどのように相互作用するかを理解するために重要だね。どの遺伝子が必要かを見つけることで、健康から農業に至るまで多くの分野で役立つんだ。
研究中に浮上した重要な問題の一つは、遺伝子に突然変異が見えないからといって、それが必須であるとは限らないということだね。時には、突然変異がないことが近くの必須遺伝子に対する影響によることもある。そのため、研究者たちは遺伝子が生存に重要かどうかを確認するために様々な技術を使用する必要があるんだ。
結論
この研究は、シャーリア・オドントリティカにおける必須遺伝子の役割について貴重な洞察を提供しているよ。これらの遺伝子を特定することで、科学者たちはこのバクテリアがどのように生き、繁栄するのかを理解する手助けができるんだ。新しい遺伝子ツールや技術の発展は、これらの相互依存するバクテリアの研究を進め、バクテリアの生物学に関する知識を深め、今後の研究の基盤を築いているね。
これらのバクテリアがどのように機能するかを理解することで、研究者たちは生命に必要な必須機能についてさらに発見し、医療やバイオテクノロジーでの応用の可能性を探ることができるんだ。基礎科学から実用化への道のりは長いけど、微生物レベルでの生命の謎を解明する上で重要だよ。
こういった研究は、ある一つの種を理解するだけでなく、微生物の生活の広いダイナミクスを明らかにするためにも重要なんだ。科学者たちが探索を続け、実験を行うことで、生命の本質的な要素についてもっと明らかになるだろうね。
タイトル: Identifying essential genes in Schaalia odontolytica using a highly-saturated transposon library
概要: The unique epibiotic-parasitic relationship between Nanosynbacter lyticus type strain TM7x, a member of the newly identified Candidate Phyla Radiation, now referred to as Patescibacteria, and its basibiont, Schaalia odontolytica strain XH001 (formerly Actinomyces odontolyticus), require more powerful genetic tools for deeper understanding of the genetic underpinnings that mediate their obligate relationship. Previous studies have mainly characterized the genomic landscape of XH001 during or post TM7x infection through comparative genomic or transcriptomic analyses followed by phenotypic analysis. Comprehensive genetic dissection of the pair is currently cumbersome due to the lack of robust genetic tools in TM7x. However, basic genetic tools are available for XH001 and this study expands the current genetic toolset by developing high-throughput transposon insertion sequencing (Tn-seq). Tn-seq was employed to screen for essential genes in XH001 under laboratory conditions. A highly saturated Tn-seq library was generated with nearly 660,000 unique insertion mutations, averaging one insertion every 2-3 nucleotides. 203 genes, 10.5% of the XH001 genome, were identified as putatively essential.
著者: Joseph K Bedree, J. Bourgeois, P. Balani, L. Cen, E. Hendrickson, K. Kerns, A. Camilli, J. S. McLean, X. He
最終更新: 2024-07-18 00:00:00
言語: English
ソースURL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.07.17.604004
ソースPDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.07.17.604004.full.pdf
ライセンス: https://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0/
変更点: この要約はAIの助けを借りて作成されており、不正確な場合があります。正確な情報については、ここにリンクされている元のソース文書を参照してください。
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