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# Biologie # Biophysik

Der Tanz der DNA: Wie die Umwelt ihre Moves beeinflusst

Entdecke, wie verschiedene Substanzen das Verhalten von DNA in Zellen beeinflussen.

Parth Rakesh Desai, John F. Marko

― 6 min Lesedauer


Die komplexe Umgebung der Die komplexe Umgebung der DNA erklärt von DNA in Zellen beeinflussen. Lerne, wie Chemikalien das Verhalten
Inhaltsverzeichnis

DNA, das berühmte Molekül, das unseren genetischen Code trägt, hängt nicht einfach so allein rum. In lebenden Zellen wird es von vielen anderen Molekülen beeinflusst, die verändern können, wie sich DNA verhält. Stell dir DNA vor wie einen Spaghetti-Nudel, die verdreht und gewendet wird, aber wenn du ein paar extra Zutaten in den Topf wirfst, verändert sich ihre Form und wie sie auf dein Kochen reagiert. In diesem Fall sind diese Zutaten verschiedene chemische Verbindungen, die in Zellen vorkommen.

Was ist DNA-Supercoiling?

DNA-Supercoiling ist ein schicker Begriff dafür, dass DNA eng verdrillt ist. Denk an das Verdreh eines Gummibands. Wenn du es zu viel drehst, fängt es an, sich in sich selbst zu wickeln, was Schlaufen oder Knoten verursachen kann. Supercoiling ist wichtig für die Fähigkeit der DNA, in den winzigen Raum einer Zelle zu passen, und hilft bei Prozessen wie der DNA-Replikation und der Genexpression.

Jetzt kann DNA positiv supercoiled sein, wo sie in eine Richtung verdreht ist, oder negativ supercoiled, wo sie in die andere Richtung gedreht ist. So wie du entscheiden kannst, ob du dein Gummiband im Uhrzeigersinn oder gegen den Uhrzeigersinn drehst, haben diese beiden Formen unterschiedliche Auswirkungen darauf, wie DNA funktioniert.

Die geschäftige Umgebung der Zellen

Innerhalb einer Zelle schwebt DNA nicht einfach allein rum; sie hat eine ganze Reihe von Begleitern. Es gibt Proteine, Salze und andere organische Moleküle, die sich um sie drängeln und die Umgebung von DNA ziemlich geschäftig machen. Diese Überfüllung kann beeinflussen, wie sich DNA verhält, so wie zu viele Köche in der Küche die Brühe verderben können.

Ein wichtiger Typ von Molekül, das DNA beeinflusst, sind die Lösungen. Diese kann man sich wie Zutaten vorstellen, die DNA entweder helfen oder behindern können. Wenn wir zum Beispiel Glycerin oder Ethylenglykol zu einer Lösung mit DNA hinzufügen, kann es die Art und Weise verändern, wie sich die DNA dreht und wendet.

Glycerin: Der heimliche Performer

Glycerin ist eine gängige Substanz, die oft in Laboren verwendet wird, um DNA stabil zu halten. Es kann die DNA jedoch tatsächlich weniger stabil machen, wenn es um Temperaturänderungen geht. Einfach gesagt, Glycerin kann dazu führen, dass DNA eher dazu neigt, sich zu öffnen und ihre Stränge zu trennen, wenn es heiss hergeht. Aber wenn es um mechanischen Stress geht - wie Verdrehung - hat Glycerin auch die Fähigkeit, die Strangtrennung in DNA zu erhöhen, was bedeutet, dass die DNA leichter entfaltet werden kann.

Stell dir vor, du versuchst, ein Gummiband zu verdrehen, aber dein Freund (Glycerin) löst es immer wieder. Während du versuchst, dein Gummiband zu supercoilen, wird es nicht so gut mitspielen wie vorher.

Ethylenglykol: Der stille Beobachter

Dann haben wir Ethylenglykol, einen nahen Verwandten von Glycerin. Das Interessante an Ethylenglykol ist, dass es zwar auch die Schmelztemperatur von DNA ändern kann, aber nicht die gleichen Auswirkungen auf die Strangtrennung hat. Unter mechanischem Stress hat Ethylenglykol keinen signifikanten Einfluss auf das DNA-Supercoiling. Es ist wie ein Freund, der zusieht, wie du das Gummiband drehst, ohne zu versuchen, dir zu helfen oder im Weg zu stehen.

Polyethylenglykol (PEG): Der Transformator

Jetzt sprechen wir über Polyethylenglykol, oder kurz PEG. PEG kann manchmal dazu führen, dass DNA kompakter wird, genau wie wenn man zu viele Klamotten in einen Koffer packt, was es schwieriger macht, ihn zu schliessen. Wenn wir PEG mit höherem Molekulargewicht verwenden, erzeugt es eine einzigartige Reaktion in der DNA. Anstatt die DNA zu trennen, kann PEG tatsächlich die lokale Strangtrennung in negativ supercoiled DNA unterdrücken.

Das bedeutet, dass DNA, wenn PEG in der Nähe ist, weniger wahrscheinlich ihre Stränge öffnet und stabiler bleibt. Es ist so, als wäre PEG der Türsteher am Eingang eines Clubs, der alles im Zaum hält und unerwünschte Strangtrennung verhindert.

Wie untersuchen Wissenschaftler das?

Um all das herauszufinden, verwenden Wissenschaftler eine Technik namens Ein-Molekül-Magnetzangen. Das klingt vielleicht nach etwas aus einem Sci-Fi-Film, aber es ist eine clevere Methode, um DNA zu untersuchen. Die Zangen können ein einzelnes DNA-Molekül dehnen und drehen, während sie messen, wie es reagiert.

Mit dieser Technik können Wissenschaftler messen, wie DNA auf Veränderungen in ihrer Umgebung reagiert, wie die Anwesenheit von überfüllenden oder dehydrierenden Stoffen wie Glycerin, Ethylenglykol oder PEG. Sie können sehen, ob die DNA länger oder kürzer wird, wie viel sie sich dreht oder wann sie Schlaufen bildet.

Die Ergebnisse: Überraschende Entdeckungen

Der Spass an dieser ganzen Erkundung sind die Ergebnisse, die die Wissenschaftler gefunden haben. Glycerin, von dem wir bereits wissen, dass es die thermische Stabilität unterstützt, lockert auch die Dinge bei mechanischem Stress auf. Wenn Glycerin vorhanden ist, erhöht es die lokale Strangtrennung sowohl für positiv als auch negativ supercoiled DNA. Das zeigt, wie viel Einfluss diese Verbindung auf unsere geliebte DNA hat.

Auf der anderen Seite war Ethylenglykol ein bisschen langweilig. Es hatte keinen signifikanten Einfluss auf das DNA-Supercoiling unter Stress. Es verhielt sich wie dieser eine Freund, der nicht wirklich zur Stimmung eines Gruppenausflugs beiträgt.

Im Gegensatz dazu war PEG der Star der Show. Es unterdrückte die lokale Strangtrennung in negativ supercoiled DNA und erleichterte der DNA, ihre Struktur zu bewahren. Das zeigt, dass verschiedene Substanzen einzigartige Rollen in der Umgebung von DNA spielen.

Anwendungen im echten Leben

Zu verstehen, wie Co-Solventen DNA beeinflussen, ist aus mehreren Gründen wichtig. Zum einen kann es Wissenschaftlern helfen, besser zu verstehen, wie sich DNA in lebenden Organismen verhält. Da lebende Zellen mit vielen verschiedenen Molekültypen überfüllt sind, gilt nicht alles, was wir in Labortests mit DNA sehen, unbedingt für das, was im echten Leben passiert.

Für Forscher können die Erkenntnisse helfen, Experimente mit DNA und Proteinen zu verbessern. Wenn DNA unter unterschiedlichen Überfüllungsbedingungen anders handelt, müssen die Wissenschaftler das berücksichtigen, wenn sie In-vitro-Tests (in Test-Röhrchen) durchführen, um Vorhersagen über das zu treffen, was in vivo (in lebenden Organismen) passiert.

Das grosse Ganze

Am Ende hebt die Studie darüber, wie verschiedene Substanzen das DNA-Supercoiling beeinflussen, die Komplexität der Molekularbiologie hervor. DNA wird nicht nur von sich selbst beeinflusst, sondern auch von ihrer gesamten Umgebung. Diese Interaktionen und Dynamiken sind wichtig für ein richtiges Verständnis davon, wie DNA funktioniert und wie sie mit anderen Molekülen interagiert.

Also, das nächste Mal, wenn du an DNA denkst, stell dir nicht nur die einfache Doppelhelix vor. Denk an sie wie an einen Tänzer in einem überfüllten Raum, der auf die Melodien reagiert, die von ihren verschiedenen Begleitern gespielt werden. Mit der richtigen Menge an Glycerin oder PEG kann die Aufführung entweder geschmeidig oder unbeholfen sein, je nach Stimmung des Moments. Und das macht das Studium von DNA so spannend!

Originalquelle

Titel: Molecular Crowding Suppresses Mechanical Stress-Driven DNA Strand Separation

Zusammenfassung: Molecular crowding influences DNA mechanics and DNA - protein interactions and is ubiquitous in living cells. Quantifying the effects of molecular crowding on DNA supercoiling is essential to relating in-vitro experiments to in-vivo DNA supercoiling. We use single molecule magnetic tweezers to study DNA supercoiling in the presence of dehydrating or crowding co-solutes. To study DNA supercoiling, we apply a stretching force of 0.8 pN to the DNA and then rotate one end of the DNA to induce supercoiling. In a 200 mM NaCl buffer without co-solutes, negatively supercoiled DNA absorbs some of the tortional stress by forming locally melted DNA regions. The base-pairs in these locally melted regions are believed to adopt a configuration where nucleotide base pairing is disrupted. We find that the presence of dehydrating co-solutes like glycerol and ethylene glycol results in further destabilization of base-pairs in negatively supercoiled DNA. The presence of polyethylene glycol, commonly used as crowding agents, suppresses local strand separation and results in plectoneme formation even when DNA is negatively supercoiled. The results presented in this letter suggest many further directions for studies of DNA supercoiling and supercoiled DNA - protein interactions in molecular conditions that approximate in-vivo molecular composition. SIGNIFICANCEAccurate modelling of DNA mechanics is central to interpreting results of single molecule studies of DNA mechanics and DNA-protein interactions. While the effect of molecular conditions on short and relaxed DNA has been studied, the influence of molecular conditions on DNA supercoiling has not been explored. We present the first single molecule study of DNA supercoiling in presence of crowding and dehydrating co-solutes. We observe that co-solutes can increase or completely suppress stress-driven local strand separation in negatively supercoiled DNA. This change of DNA supercoiling is likely to significantly affect the function of DNA-binding proteins. Our results motivate the need for systematic exploration of DNA supercoiling in presence of co-solutes to accurately relate in-vitro DNA-protein interactions to in-vivo DNA-protein interactions.

Autoren: Parth Rakesh Desai, John F. Marko

Letzte Aktualisierung: 2024-12-12 00:00:00

Sprache: English

Quell-URL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.12.11.628023

Quell-PDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.12.11.628023.full.pdf

Lizenz: https://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0/

Änderungen: Diese Zusammenfassung wurde mit Unterstützung von AI erstellt und kann Ungenauigkeiten enthalten. Genaue Informationen entnehmen Sie bitte den hier verlinkten Originaldokumenten.

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