3D Mikroelektroden-Arrays: Eine neue Grenze in der Neurowissenschaft
Die Revolutionierung der Neuronenforschung mit 3D-Technologie für bessere Einblicke.
João Serra, José C. Mateus, Susana Cardoso, João Ventura, Paulo Aguiar, Diana C. Leitao
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Inhaltsverzeichnis
Mikroelektrodenarrays (MEAs) sind spezielle Werkzeuge, die in der Wissenschaft verwendet werden, um die elektrischen Signale von Gruppen von Nervenzellen, auch bekannt als Neuronen, zu messen und zu studieren. Denk an sie wie an winzige Lauscher, die all das Geplapper in einer Gruppe von Neuronen auffangen können, ähnlich wie ein belebtes Café, in dem viele Gespräche gleichzeitig stattfinden. Diese Geräte sind echt gut darin, zu überwachen, wie Neuronen miteinander kommunizieren, und können auch Signale zurück an sie senden. Diese Fähigkeit macht MEAs wertvoll für die Forschung über Gehirnerkrankungen wie Parkinson und Epilepsie.
Was sind Mikroelektrodenarrays?
MEAs sind winzige Plattformen, die mit mehreren Elektroden bedeckt sind. Diese Elektroden sind wie Mikrofone, aber speziell dafür gemacht, die elektrischen Signale aufzufangen, die von Neuronen produziert werden. Das Aufregende? MEAs können diese Signale von lebenden Neuronen aufzeichnen, während sie in einer Schale sind, so können Wissenschaftler beobachten, wie sich diese Zellen in Echtzeit verhalten.
Traditionell waren diese MEAs zweidimensional, was ähnlich ist wie ein Buch flach auf einem Tisch zu lesen. Das Problem? Neuronen in echten Gehirnen interagieren in drei Dimensionen, also ist es nicht immer einfach zu verstehen, wie sie sich verhalten, wenn sie auf einer flachen Oberfläche feststecken. Diese Einschränkung brachte Forscher zum Nachdenken und auf der Suche nach Möglichkeiten, MEAs zu schaffen, die in drei Dimensionen arbeiten können.
Der Wechsel zu 3D MEAs
Kürzliche Entwicklungen haben den Fokus von 2D MEAs auf 3D-Versionen verschoben. Genau wie man einen Lego-Turm baut, anstatt mit flachen Teilen zu bleiben, erlaubt dieser neue Ansatz Wissenschaftlern, zu studieren, wie Neuronen sich in einem Raum verhalten, der näher am lebenden Gehirn ist. Forscher haben coole Designs entwickelt, um 3D MEAs mit Techniken zu erstellen, die von Origami inspiriert sind. Ja, genau! Sie verwenden Falttechniken, die ähnlich sind wie die, die man beim Falten von Papierkränen verwendet.
Diese neuen 3D MEAs können aus speziellen Materialien hergestellt werden, die ihre Form verändern können, wenn sie erhitzt werden. Diese Veränderungen erlauben es den Elektroden, aufrecht zu stehen, anstatt flach zu liegen, was es einfacher macht, die Neuronen aus verschiedenen Winkeln zu erreichen. Dieses Design gibt Wissenschaftlern Zugang zu einer ganz neuen Ebene von Daten darüber, wie Neuronen Informationen teilen und auf unterschiedliche Bedingungen reagieren.
Die Herstellung der MEA
Der Prozess, diese MEAs herzustellen, ist ein bisschen wie Kuchen backen – wenn das Backen aus Schichten sehr dünner Filme bestehen würde! Die Basis der MEA besteht aus Glas, was eine stabile Grundlage bietet. Darauf erstellen die Forscher mehrere Schichten, einschliesslich einer opfernden Schicht, die schliesslich entfernt wird, sodass nur die Teile zurückbleiben, die sie behalten wollen.
Die Elektroden werden dann aus einer Kombination von Metall und speziellen Polymeren hergestellt, die sich bei Bedarf biegen können. Dieses Biegen ist es, was eine flache MEA in eine 3D-Version verwandelt und somit bessere Interaktionen mit Neuronen ermöglicht.
Um das zu erreichen, verwenden Wissenschaftler einige Heiztricks. Durch sorgfältige Kontrolle der Temperatur und Anwendung von Stress auf bestimmte Schichten können sie die Elektroden in die gewünschten 3D-Positionen formen. Stell dir einen Magier vor, der einen Hasen aus einem Hut zieht, nur dass der Magier ein Wissenschaftler ist und anstelle eines Hasen zieht er eine 3D-Elektrode heraus!
Die Vorteile von 3D MEAs
Der Hauptvorteil des Umstiegs auf 3D MEAs ist ihre Fähigkeit, Neuronen in einer Umgebung zu studieren, die ihrer natürlichen Heimat näher kommt. Genau wie ein Fisch ausserhalb des Wassers Schwierigkeiten hat zu atmen, haben Neuronen auch Schwierigkeiten, normal zu agieren, wenn sie auf einer flachen Oberfläche gefangen sind. Mit 3D MEAs können Forscher beobachten, wie Neuronen kommunizieren, wie sie Informationen verarbeiten und wie sie auf verschiedene Medikamente oder Therapien reagieren, und das auf eine Weise, die viel ähnlicher ist, wie sie es im Gehirn tun würden.
Ausserdem helfen flexible Materialien, die mechanischen Eigenschaften der MEAs an lebende Zellen anzupassen, wodurch sie komfortabler und geeigneter für den langfristigen Einsatz werden. Niemand mag es, mit einem Stock gestossen zu werden, und Neuronen auch nicht, deswegen ist es wichtig, sanft zu sein.
Wie testen Wissenschaftler die MEAs?
Sobald die MEAs hergestellt sind, ist es wichtig, sie zu testen, um sicherzustellen, dass sie richtig funktionieren, bevor sie Neuronen ins Spiel bringen. Ingenieure verwenden verschiedene Techniken, um zu messen, wie gut die Elektroden Signale aufnehmen und wie viel Rauschen in den Aufzeichnungen vorhanden ist.
Stell dir vor, du versuchst, dein Lieblingslied im Radio zu hören, aber es gibt viel Rauschen – frustrierend, oder? Wissenschaftler versuchen, dieses Rauschen zu reduzieren, um die schöne Musik der Neuronalen Aktivität zu hören. Sie messen die Signalstärken und sorgen dafür, dass alles reibungslos funktioniert, bevor sie die Neuronen einführen.
Neuronen auf MEAs züchten
Nach dem Testen ist es Zeit, die Stars der Show zu bringen: die Neuronen! Wissenschaftler züchten diese Neuronen normalerweise in einer gelartigen Substanz, um ihnen zu helfen, die notwendigen Verbindungen zu bilden. Sie mischen das Gel sorgfältig mit den Neuronen und sorgen für eine gute Verteilung über die MEA. Denk daran, als würdest du einen Neuronen-Smoothie machen, bei dem die MEA der Mischbecher ist.
Die Neuronen brauchen etwas Zeit, um sich einzuleben und zu wachsen, also inkubieren die Wissenschaftler die MEAs. Die warme Umgebung eignet sich perfekt für Neuronen, um zu gedeihen, ähnlich wie bestimmte Pflanzen spezifische Temperaturen brauchen, um zu blühen. Während die Neuronen anfangen, sich zu etablieren, beginnen sie, miteinander und mit den MEAs zu kommunizieren.
Neuronal-Aktivität aufzeichnen
Nachdem die Neuronen etwas Zeit zum Einleben bekommen haben, sind die Wissenschaftler bereit, ihre Aktivität aufzuzeichnen. Mit den 3D MEAs können sie den Neuronen zuhören, wie sie elektrische Signale abfeuern. Hier passiert die Magie, denn die Forscher können beobachten, wie Neuronen auf verschiedene Stimuli reagieren, wie sie miteinander kommunizieren und wie sie in Gruppen agieren.
Während dieser Aufzeichnungen bemerken Wissenschaftler oft Aktivitätsausbrüche – wie eine plötzliche Welle von Energie in einer Klasse, wenn alle auf ein Thema begeistert reagieren! Jede Elektrode kann diese Ereignisse erfassen und den Forschern zeigen, wie die Signale der Neuronen durch den 3D-Raum reisen.
Impedanz- und Rauschpegel
Um sicherzustellen, dass die Aufzeichnungen klar sind, wird die Impedanz der Elektroden sorgfältig überwacht. Impedanz ist wie der Widerstand gegen elektrischen Strom. Wenn sie zu hoch ist, kann die Qualität der Aufzeichnungen leiden. Wissenschaftler streben bestimmte Impedanzbereiche an, um sicherzustellen, dass sie die neuronale Aktivität ohne zu viel Rauschen erfassen, ähnlich wie man eine Gitarre vor einem Konzert stimmt.
Sie beobachten auch die Rauschpegel, um sicherzustellen, dass sie die Neuronen gut hören können. Wenn es zu viel Hintergrundgeräusch gibt, ist es wie zu versuchen, jemanden zu hören, während in der Nähe gebaut wird. Das Ziel ist es, das Rauschen niedrig zu halten, damit die aufgezeichneten Signale das wahre Verhalten der Neuronen widerspiegeln.
Herausforderungen mit 3D MEAs
Obwohl die 3D MEAs aufregende Möglichkeiten bieten, bringen sie auch eigene Herausforderungen mit sich. Ein grosses Hindernis ist sicherzustellen, dass alle Elektroden funktionsfähig sind. Manchmal funktionieren aufgrund kleiner Fehler im Herstellungsprozess nicht alle Elektroden wie beabsichtigt. Wissenschaftler bemühen sich, die Herstellungstechniken zu verbessern, ähnlich wie Köche ein Rezept für den perfekten Keks verfeinern.
Eine weitere Herausforderung ist die langfristige Stabilität der MEAs, sobald sie in die lebende Umgebung eingeführt werden. Nach einer gewissen Zeit in Gebrauch ist es wichtig zu überprüfen, ob die Elektroden weiterhin gut funktionieren und frei von Schäden bleiben.
Zukunft der 3D MEAs
Wenn man in die Zukunft schaut, sind die Möglichkeiten für 3D MEAs riesig. Forscher können neue elektroaktive Systeme wie Herzmuskelzellen oder Muskelgewebe mit diesen Geräten erkunden. Die Flexibilität und Anpassungsfähigkeit der 3D MEAs öffnen auch Türen für zukünftige Technologien, einschliesslich der Integration in mikrofluidische Plattformen, die die Gesamtergebnisse verbessern können.
Darüber hinaus könnten Wissenschaftler, während sie die Herstellungstechniken verbessern, in der Lage sein, MEAs mit massgeschneiderten Formen und Designs zu erstellen. So könnten die Elektroden besser auf spezifische Anwendungen zugeschnitten werden. Stell dir vor, du könntest dein eigenes benutzerdefiniertes Smartphone-Cover oder Gadget erstellen – genau daran arbeiten Wissenschaftler für ihre MEAs.
Fazit
Mikroelektrodenarrays ebnen den Weg für aufregende Entdeckungen in der Neurowissenschaft. Durch den Übergang von 2D zu komplexen 3D-Designs können Forscher jetzt die elektrische Aktivität von Neuronen mit grösserer Genauigkeit und Relevanz für das reale Leben beobachten. Wenn die Technologie voranschreitet, werden diese Werkzeuge weiterhin eine Schlüsselrolle im Verständnis der Gehirnfunktion und in der Entwicklung von Behandlungen für neurologische Erkrankungen spielen.
Also, das nächste Mal, wenn du von MEAs hörst, stell dir winzige Geräte vor, die nicht nur elektrische Signale aufzeichnen, sondern auch Wissenschaftlern helfen, die Geheimnisse des Gehirns zu entschlüsseln – ein Neuron nach dem anderen – ohne dass ein Zauberstab nötig ist!
Originalquelle
Titel: Stress-actuated Flexible Microelectrode Arrays for Activity Recording in 3D Neuronal Cultures
Zusammenfassung: Microelectrode arrays (MEAs) are instrumental in monitoring electrogenic cell populations, such as neuronal cultures, allowing high precision measurements of electrical activity. Although three-dimensional neuronal cultures replicate the behavior of in vivo systems better than two-dimensional models, conventional planar MEAs are not well suited to capture activity within such networks. Novel MEA geometries can overcome this difficulty, but often at the cost of increased fabrication complexity. Here, we used the stress mismatch between thin film layers to fabricate MEAs with vertical electrodes, using methods compatible with established microfabrication protocols. A micrometric SiO2 hinge enables control over the bending angle of flexible polyimide structures with embedded electrodes. The performance of the patterned electrodes was assessed before and after stress actuation, through impedance measurements, voltage noise mapping, and neuronal activity recordings. 3D MEAs with 30x30 {micro}m2 electrodes showed an impedance of 0.96 {+/-} 0.07 M{Omega} per electrode and detected neuronal activity spikes with amplitudes as high as 400 {micro}V. These results demonstrate the potential of the developed methods to provide a scalable approach to fabricate 3D MEAs, enabling enhanced recording capabilities for in vitro neuronal cultures.
Autoren: João Serra, José C. Mateus, Susana Cardoso, João Ventura, Paulo Aguiar, Diana C. Leitao
Letzte Aktualisierung: 2024-12-17 00:00:00
Sprache: English
Quell-URL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.12.12.628189
Quell-PDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.12.12.628189.full.pdf
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