神経学研究のための3D細胞培養の進展
神経科学の研究で新しい方法が登場して、神経障害の理解を深めようとしてるんだ。
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神経障害は世界中の何百万もの人々に影響を与えてるんだ。世界保健機関は、9000万人以上の人がこういった症状を抱えているって報告してて、年齢を重ねるにつれてその数は増えていく予想なんだ。薬にかなりのお金がかけられてるけど、多くの薬は開発段階で失敗しちゃう。特に神経系の問題を治療するための薬は、他の種類の薬よりも失敗する可能性が高いんだ。
この分野の研究は、実験室で細胞を研究することが多いよ。従来の方法では、2次元(2D)細胞培養を使って、細胞が平らに成長する表面で育てるんだ。2D培養はシンプルで詳しく研究できるけど、人間の脳にある複雑な環境を正確には再現できないんだ。2D培養の細胞は、神経細胞同士の複雑なつながりを再現できてない。
研究を進めるために、科学者たちはもっと進んだ方法に目を向けてる。オルガン・オン・チップ技術が有望な代替手段として登場したんだ。この技術は小さなチャンネルと3次元(3D)培養を使って、脳の状態をより良く模倣することができる。研究者たちは、人間の脳活動により近いモデルを作り出して、神経障害の治療に役立つかもしれないんだ。
2次元と3次元培養の違い
2D培養にはいくつかの利点があるよ。扱いやすくて、高スループットの研究ができるんだ。でも、脳細胞の完全な複雑さや相互作用は捉えられない。2D培養の神経細胞は、互いに接続するのが限られてて、実際の脳のような構造的サポートがないんだ。
逆に、3D培養は脳の実際の構造をより効果的に模倣できる。神経細胞がもっと自然に成長して接続する環境を作れるんだ。研究者は、3D空間でこれらの細胞の成長をガイドする技術を使える。でも、特に深い層の活動を測定するのが難しいっていう課題もある。
マイクロ電極アレイの可能性
3D培養で神経細胞の活動を研究するために、科学者たちはマイクロ電極アレイ(MEA)という特別なツールを開発したんだ。これらのデバイスは神経細胞からの電気信号を記録することを可能にする。マイクロ電極と3D培養を組み合わせることで、研究者は神経細胞がどのように相互作用し、さまざまな治療に反応するかを監視できる。
従来の電極の課題は、3D培養の深い層にアクセスできないことなんだ。新しい方法として、マイクロ電極を培養に直接統合する技術が開発された。これにより、より正確な測定が可能になるんだ。
研究のための高度なデバイス設計
最近、研究者たちはマイクロ電極とマイクロ流体を組み合わせたデバイスを作ったんだ。これにより、細胞の環境を制御して、その活動を同時に研究できるようになった。新しいデバイスは複数の実験を同時に扱えるから、データの収集と分析がより良くなるんだ。
デザインは複数の層を含んでいて、さまざまな細胞タイプをサポートするんだ。異なる細胞集団用のコンパートメントがあって、研究者はさまざまな種類の神経細胞や神経細胞以外の細胞の相互作用を研究することができるんだ。
3D神経モデルの作成
これらの高度なデバイスを作成する際には、細胞の準備と培養の仕方に多くの注意が向けられるんだ。特別なゲルを使うことで、細胞を3Dで成長させるために浮かせることができる。この設定は神経細胞が接続を伸ばし、脳に見られるようなネットワークを形成するのを促進する。
デバイス自体は、異なるタイプの細胞を別々に播種できるようになってるんだ。各コンパートメントは独自の環境を持っていて、さまざまな細胞条件が神経細胞の挙動にどのように影響するかを研究できるようにしてるんだ。
神経細胞の成長と活動の観察
細胞が培養されたら、研究者はその成長と活動を監視できるようになる。神経細胞は蛍光マーカーでラベル付けできるから、顕微鏡の下で簡単に視覚化できるんだ。これにより、科学者は時間とともに神経細胞が接続を形成する様子を画像や動画でキャッチできる。
デバイスに組み込まれたマイクロ電極は、神経活動の記録を可能にする。研究者は、神経細胞がさまざまな刺激や薬にどう反応するかを観察できる。この種の監視は、神経細胞がどのようにコミュニケーションをとり、病気の状態ではどうなるかを理解するために重要なんだ。
化合物の神経細胞への影響をテスト
神経細胞の反応を分析するために、研究者は培養環境にさまざまな化学物質を導入できるんだ。たとえば、神経伝達物質の活動に影響を与える薬を追加することがあるんだ。神経細胞の電気信号の変化を監視することで、これらの物質が神経コミュニケーションにどのように影響を与えるかを測ることができる。
この方法は、潜在的な治療が神経活動にどのように影響するかを素早く評価できるんだ。これらの影響を理解することで、神経障害のためのよりターゲットを絞った治療法の開発に役立つかもしれない。
デバイスの再利用性と清掃
新しいデバイスのもう一つの利点は、たいてい洗浄して再利用できることなんだ。実験が終わった後、培養は廃棄されるけど、デバイスは洗浄して今後の実験のために滅菌できる。これにより、廃棄物が減るだけでなく、継続的な研究のコストも節約できるんだ。
現在の研究の課題
3D細胞培養やマイクロ電極技術の進歩はワクワクするけど、まだ乗り越えるべき障害もあるんだ。たとえば、神経の深い層の反応を測定するのが難しいままなんだ。それには、技術や方法の継続的な改善が必要なんだ。
さらに、研究者が脳の状態を模倣することにもっと野心的になるにつれて、デバイスや培養の複雑さも進化していく必要がある。これには、異なる種類の細胞を組み合わせたり、より現実的な研究のために血液脳関門モデルを導入したりすることが含まれるかもしれない。
結論
神経科学の研究分野は、神経障害に対するより良い治療法につながるかもしれない、より正確なモデルに向かって進んでいるんだ。先進的な技術の助けを借りて、科学者たちは人間の脳の複雑さを再現する環境を作り出してる。これらの進展は、神経疾患の理解を深め、影響を受けた人々に効果的な治療法を見つける希望を提供しているんだ。
タイトル: A microphysiological system for parallelized morphological and electrophysiological read-out of 3D neuronal cell culture
概要: Three-dimensional in vitro models in microfluidic systems are promising tools for studying cell biology, with complex models using multiple cell types combined with high resolution imaging. Neuronal models demand electrical readout of the activity of networks of single neurons, yet classical planar microelectrode arrays struggle to capture extracellular action potentials when neural soma are suspended distant from the microelectrodes. This study introduces sophisticated microfluidic microelectrode arrays, specifically tailored for electrophysiology of 3D neuronal cultures. Using multilayer photolithography of permanent epoxy photoresists, we developed devices having 12 independent culture modules in a convenient format. Each module has two adjacent compartments for hydrogel-based 3D cell culture, with tunnels allowing projection of neurites between compartments. Microelectrodes integrated in the tunnels record action potentials as they pass between the compartments. Mesh ceilings separate the compartments from overlying wells, allowing for simple cell seeding and later nutrient, gas and waste exchange and application of test substances. Using these devices, we have demonstrated 3D neuronal culture, including electrophysiological recording and live imaging. This microphysiological platform will enable high-throughput investigation of neuronal networks for investigation of neurological disorders, neural pharmacology and basic neuroscience. Further models could include cocultures representing multiple brain regions or innervation models of other organs.
著者: Paolo Cesare, P. D. Jones, B. Molina-Martinez, A. Niedworok
最終更新: 2024-01-21 00:00:00
言語: English
ソースURL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2023.11.06.565744
ソースPDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2023.11.06.565744.full.pdf
ライセンス: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
変更点: この要約はAIの助けを借りて作成されており、不正確な場合があります。正確な情報については、ここにリンクされている元のソース文書を参照してください。
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