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# 生物学# 神経科学

神経活動の電圧インジケーターの進展

新しい電圧インジケーターが神経信号の測定精度を向上させてるよ。

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次世代電圧インジケーターが次世代電圧インジケーターが登場!るよ。新しいツールが神経信号の研究を進化させて
目次

電圧インジケーターは、科学者がニューロンの電気信号の変化を測定するのに役立つツールだよ。これらの測定は、ニューロンがどう機能してコミュニケートするかを理解するために超重要。科学者たちは、細胞を傷つけずにこれらの変化を検出できる電圧インジケーターを作ろうとしているんだ。理想的な電圧インジケーターは、素早く反応して、はっきりした画像をキャッチできるくらい明るく、長期間使っても安全であるべき。

従来のインジケーターの課題

歴史的に、科学者たちはニューロンの電圧を測定するために、タンパク質ベースのインジケーターを使ってきたんだ。遺伝子でエンコードされた電圧インジケーター(GEVIs)は特定の細胞にターゲットを絞ってるけど、明るさや安定性に苦労することが多い。これは蛍光タンパク質の特性のせいで、合成染料ほど明るくなかったり、長持ちしなかったりするから。

電圧インジケーターの新しい開発

最近の進展で、ハイブリッドインジケーターが登場したよ。これは合成染料と遺伝子エンコードインジケーターのいいとこ取りをしているんだ。たとえば、微生物ロドプシンという光感受性タンパク質を使った新しいインジケーターがある。これらのインジケーターは電圧の変化に素早く反応できる。けど、時々明るさが足りないこともあるんだ。

明るさと安定性の向上

従来のインジケーターの制約を克服するために、科学者たちは電気クロミック蛍光共鳴エネルギー転送(eFRET)を開発した。これはニューロンの電気状態に基づいて光の放出を変える明るい染料を使ってるんだ。ロドプシンと組み合わせることで、これらのインジケーターは素晴らしい電圧測定を提供できる。

「Voltron」と呼ばれるインジケーターは、染料と融合したロドプシンを利用している。この融合のおかげで、マウスや魚などさまざまな生物で敏感な電圧記録ができるんだ。

ハイブリッド電圧インジケーターの可能性

もう一つのアプローチは、小さな染料をロドプシンタンパク質に直接結びつけてハイブリッド電圧インジケーター(HVI)を作ることだ。これらの新しいインジケーターは、感度が向上し、長時間リアルタイムで電圧変化を画像化できる。ただし、酵素を使ったラベリングが必要なため、ライブイメージングには限界があるんだ。

Solarisの紹介

「Solaris」と呼ばれる新しいインジケーターが、電圧感度を向上させるために開発された。Solarisはロドプシン構造に更新されたHaloTagタンパク質を挿入している。これにより、Solarisはさまざまな種類の染料と接続できるので、画像化の柔軟性が増すんだ。

Solarisは、ニューロンの電気活動のスパイクであるアクションポテンシャルを特に効果的に検出できる。以前のインジケーターよりも電圧変化に対してより効果的に反応できることが示されている。科学者たちは、Solarisが培養細胞で電圧変化を測定できることを示していて、今はライブニューロンでのテストも始まっている。

以前のインジケーターとの比較

科学者たちがSolarisとVoltronのような以前のインジケーターを比較すると、Solarisははるかに大きな電圧反応を示すことがわかる。これにより、ニューロンの活動について意味のあるデータをキャッチしやすくなる。Solarisの改善により、よりクリアな画像とニューロンの電気的ダイナミクスへの理解が深まるよ。

マルチプレックスイメージング機能

Solarisの大きな利点の一つは、他のインジケーターと一緒に使えることだ。これにより、科学者たちはニューロン内の電圧やカルシウムレベルのような複数の細胞信号を同時に監視できるんだ。これはニューロンの活動中に異なる信号がどう相互作用するかを理解するために重要。

たとえば、科学者たちはSolarisを使って、アクションポテンシャルを観察しながらニューロン内のカルシウムスパイクも追跡している。この情報は、研究者がニューロンがどうコミュニケーションを取り、情報を処理するかを学ぶのに役立つ。

蛍光寿命イメージングの役割

もう一つの革新は、Solarisに蛍光寿命イメージング(FLIM)を使うことだ。従来のイメージングが明るさの変化を測定するのに対して、FLIMは蛍光信号がどれくらい続くかの変化を測定する。これにより、ニューロンの状態についてより正確な情報を提供できる。

FLIMは他の電圧インジケーターでも成功裏に使われてきたけど、Solarisはより高い感度を持っている。これにより、科学者は小さな電圧変化をよりよくキャッチでき、ニューロン機能の詳細な像を提供することができる。

結論

Solarisや他の先進的な電圧インジケーターの開発は、神経科学において大きな前進を意味してる。このツールは、研究者がニューロンの電気的活動について貴重な洞察を得るのを可能にするんだ。科学者たちがこれらのインジケーターをさらに洗練させ続けることで、脳の複雑な働きについてもっと多くを学べることが期待される。

ニューロンのシグナリングについての理解を深めることで、これらの革新は神経疾患の治療や脳研究の進展につながるかもしれない。研究者たちは、さらなる改善がこれらのインジケーターをさまざまなアプリケーションでさらに効果的にするだろうと楽観的に考えている。特にライブシステムでの使用に関連する改善は、リアルタイムでの脳活動の研究の可能性を広げるかもしれない。

オリジナルソース

タイトル: Solaris: a panel of bright and sensitive hybrid voltage indicators for imaging membrane potential in cultured neurons

概要: Dynamic changes in the membrane potential underlie neuronal activities. Fluorescent voltage indicators allow optical recording of electrical signaling across a neuronal population with cellular precision and at millisecond-level temporal resolution. Here we report the design and characterization of a chemigenetic hybrid voltage indicator, Solaris, in which a circularly permuted HaloTag is inserted into the first extracellular loop of Acetabularia rhodopsin. Solaris is compatible with fluorogenic HaloTag ligands JF525, JF549, JF552, JF585, and JF635. The most sensitive conjugate, Solaris585, has more than 2-fold higher voltage sensitivity than the spectrally similar Voltron2585 ({Delta}F/F0 = -28.1 {+/-} 1.3% versus -12.3 {+/-} 0.7% per action potential in cultured neurons). Solaris585 supports the measurement of optogenetically evoked spike activity or dual-color imaging in conjunction with green-emitting calcium or glutamate indicators. Solaris indicators are also applicable to fluorescence lifetime imaging, which probes the absolute membrane potential. This new hybrid voltage indicator is a valuable tool for imaging neuronal electrophysiological activities in cultured cells with substantially improved dynamic range compared to previous hybrid indicators.

著者: Peng Zou, J. Yang, S. Zhu, L. Yang, L. Peng, Y. Han, R. F. Hayward, P. Park, D. Hu, A. E. Cohen

最終更新: 2024-02-04 00:00:00

言語: English

ソースURL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.02.02.578569

ソースPDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.02.02.578569.full.pdf

ライセンス: https://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0/

変更点: この要約はAIの助けを借りて作成されており、不正確な場合があります。正確な情報については、ここにリンクされている元のソース文書を参照してください。

オープンアクセスの相互運用性を利用させていただいた biorxiv に感謝します。

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