社会行動に関連する脳の領域を調査中
研究が記憶や社会的なやりとりに影響を与える脳の領域を調べてるよ。
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アルギニンバソプレッシン1b受容体、またはAvpr1bは、他の人から学んだり、個体を覚えたり、攻撃性を示したりするなどの社会的行動に重要なんだ。主に海馬のコルヌアモニス領域2(CA2)っていう特定の脳のエリアに見られる。研究によると、このエリアの特定の神経細胞が抑制されると、動物は他の動物を認識するのが難しくなるんだ。逆に、バソプレッシンの活動を増やすと社会的記憶が改善されることがわかってる。
もう一つ注目すべき脳の領域はファシオラシネレウム(FC)で、ここにはAvpr1bを発現するニューロンが多い。ただ、FCの正確な機能はまだ不明なんだ。FCは海馬を形成する元々の脳構造の名残みたい。面白いことに、FCはBTBRっていう特定のマウス系統にはないんだ。これらのBTBRマウスは自閉症関連の行動を研究するために使われていて、過度のグルーミングや社会的相互作用の難しさ、独特の声の種類など、自閉症の特徴を示すんだ。
この研究は、FCとCA2を詳しく見て、これらのエリアの細胞や遺伝子のタイプを比較することを目的にしてる。高度な技術を使って、これらの領域で異なる遺伝子がどのように働いているのか、そしてそれが社会的行動や記憶に何を意味するのかを調べたんだ。
マウスの飼育条件
研究に使ったマウスは、安全で清潔な環境で育てられた。温度、湿度、清潔さに気を配って、特別なケージに寝床を用意し、自由に食べ物と水が与えられた。環境はマウスを健康に育てるために調整されてた。
特殊なマウス系統の作成
Avpr1bニューロンをもっと詳しく研究するために、研究者たちは特殊なタイプのマウスを作った。このマウスは、研究者がAvpr1bニューロンをもっとはっきり見ることができる遺伝子を持ってた。二つの異なるマウス系統を交配させて、新しい系統を生成し、ここに緑色蛍光タンパク質(GFP)が組み込まれた。このGFPを使って、脳内のAvpr1bニューロンを識別できるようになった。
研究の準備
Avpr1bニューロンの遺伝子を研究するために、研究者たちは特殊に育てたマウスのFCとCA2領域から細胞核を取り出した。まず、マウスに麻酔をかけて、その後脳を取り除いた。次に、脳の特定の部分を慎重に抽出して、後の分析のために冷凍保存した。研究者たちは特定の溶液を使って細胞を分解し、核を分離してさらに研究した。
分離した核は、RNAシーケンシングと呼ばれる技術のために準備され、この方法で研究者はその細胞にどの遺伝子が発現しているのかを確認するんだ。核からのRNAを分析して、FCとCA2の領域の違いを理解しようとしたんだ。
データ分析
RNAシーケンシングが完了したら、研究者たちは特定のソフトウェアツールを使ってデータを分析した。この分析には、異なる細胞のタイプを分類し、各細胞でどのくらいの遺伝子が発現しているかを理解することが含まれた。遺伝子発現に基づいてFCとCA2の領域がどれだけ異なるのかを比較したんだ。
Hiplexアッセイ
特定の遺伝子が脳内のどこにあるかを確認するために、研究者たちはHiplex RNAscopeシステムという方法を使った。この技術で、脳の切片で興味のある遺伝子を可視化でき、FCとCA2領域での位置を確認するのに役立った。
脳の接続のマッピング
研究者たちはFCのAvpr1bニューロンが脳の他のエリアとどのように接続しているかも調べた。FCにウイルスを注入して、これらのニューロンの接続を追跡した。このマッピングで、FCが中間外側隔てエリアや背側CA2など、いくつかの脳のエリアに投射していることが示された。
行動テスト
Avpr1bニューロンが行動にどう影響するかを理解するために、研究者たちは特定の物質(CNO)を使って一時的にそのニューロンを沈黙させた。その後、マウス同士が互いに相互作用する行動テストを行い、ほんの短い休憩の後にどれだけの程度まで他のマウスを認識できるかを見ることにした。馴染みのある動物と馴染みのない動物を嗅ぐ量を測ることで、彼らの記憶を評価したんだ。
面白いことに、FCのAvpr1bニューロンを沈黙させても、マウスが馴染みのある動物を覚えてる能力には影響がなかった。これはFCがCA2領域のように社会的記憶にとって重要ではないかもしれないことを示唆してる。
BTBRマウスの調査
BTBRマウス系統はFCが欠けてるから、この欠如が記憶や行動にどう影響するのか疑問が生まれる。研究者たちはBTBRマウスと野生型(WT)マウスのCA2ニューロンの遺伝子発現プロファイルを比較した。プロファイルは似ているけど、いくつかの遺伝子が系統間で異なって発現していることがわかった。この比較は、FCの欠如がBTBRマウスの社会的行動にどう影響するのかについての洞察を提供できるかもしれない。
結論
全体的に、この研究は社会的行動や記憶に関連する異なる脳領域を明確に示してる。この結果は、Avpr1b受容体の重要性と、FCおよびCA2領域のさまざまな役割を浮き彫りにしてる。将来の研究では、これらのつながりや、自閉症のような状態との関連についてさらに探求するかもしれない、BTBRマウスモデルで見られるようにね。
タイトル: Investigation of the Fasciola Cinereum, Absent in BTBR mice, and Comparison with the Hippocampal Area CA2
概要: The arginine vasopressin 1b receptor (Avpr1b) plays an important role in social behaviors including social learning, memory, and aggression, and is known to be a specific marker for the cornu ammonis area 2 (CA2) regions of the hippocampus. The fasciola cinereum (FC) is an anatomical region in which Avpr1b expressing neurons are prominent, but the functional roles of the FC have yet to be investigated. Surprisingly, the FC is absent in the inbred BTBR T+tf/J (BTBR) mouse strain used to study core behavioral deficits of autism. Here, we characterized and compared transcriptomic expression profiles using single nucleus RNA sequencing and identified 7 different subpopulations and heterogeneity within the dorsal CA2 (dCA2) and FC. Mef2c, involved in autism spectrum disorder, is more highly expressed in the FC. Using Hiplex in situ hybridization, we examined the neuroanatomical locations of these subpopulations in the proximal and distal regions of the hippocampus. Anterograde tracing of Avpr1b neurons specific for the FC showed projections to the IG, dCA2, lacunosum molecular layer of CA1, dorsal fornix, septofibrial nuclei, and intermediate lateral septum (iLS). In contrast to the dCA2, inhibition of Avpr1b neurons in the FC by the inhibitory DREADD system during behavioral testing did not impair social memory. We performed single nucleus RNA sequencing in the dCA2 region and compared between wildtype (WT) and BTBR mice. We found that transcriptomic profiles of dCA2 neurons between BTBR and WT mice are very similar as they did not form any unique clusters; yet, we found there were differentially expressed genes between the dCA2s of BTBR and WT mice. Overall, this is a comprehensive study of the comparison of Avpr1b neuronal subpopulations between the FC and dCA2. The fact that FC is absent in BTBR mice, a mouse model for autism spectrum disorder, suggests that the FC may play a role in understanding neuropsychiatric disease.
著者: W Scott Young, S. H. Lee, M. E. Cooke, K. Z. Duan, S. Williams Avram, J. Song, A. G. Elkahloun, G. McGrady, NISC Comparative Sequencing Program, A. Howley, B. Samal
最終更新: 2024-03-26 00:00:00
言語: English
ソースURL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.03.21.586108
ソースPDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.03.21.586108.full.pdf
ライセンス: https://creativecommons.org/publicdomain/zero/1.0/
変更点: この要約はAIの助けを借りて作成されており、不正確な場合があります。正確な情報については、ここにリンクされている元のソース文書を参照してください。
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