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ボリューム筋肉損失の治療の進展

研究が筋肉損傷回復のための新しい足場アプローチを明らかにした。

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目次

筋肉の容積損失(VML)は、筋肉組織がかなり失われる深刻なタイプのケガで、通常は爆発や事故のような重度のトラウマが原因。これにより慢性的な炎症や不適切な筋肉再生といった問題が伴う複雑な治癒プロセスが生じ、最終的には筋力と機能が減少する。VMLの現在の標準治療は、体の別の部分から組織を取り出して傷に置くことだけど、この方法は時間がかかり、高額で、必ずしも良い結果が得られるわけじゃない。

さらに、ドナーサイトからの組織採取は他の合併症を引き起こす可能性があり、個人によって効果も異なる。だから、新しい治療法がこれらの課題にうまく対処できる必要がある。

VML治療の新しいアプローチ

VMLのケガの治療を改善するために、研究者たちは筋肉組織を治すのに役立つ特別な材料を使おうとしている。これらの材料は生体材料と呼ばれ、体の自然な治癒プロセスをサポートするように設計されている。自然または合成物質から作られ、成長因子や細胞、その他の治癒を促進する要素が含まれることがある。

これらの材料の設計方法は重要で、特性に小さな変化があっても治癒プロセスにプラスにもマイナスにも影響を与える。健康な筋肉組織は特定の構造を持ち、筋収縮と全体的な動きに重要な電気信号を送ることができる。VMLが発生すると、周囲の組織の構造が崩れ、電気信号の喪失がさらなる筋肉の消耗に寄与する。

筋肉修復のための生体材料の開発

以前の研究では、コラーゲンや他のサポート材料でできた三次元(3D)スキャフォールドが筋肉組織工学のために開発された。これらのスキャフォールドは皮膚治癒などの医療処置で成功裏に使われてきた。特別な冷凍法を用いることで、これらのスキャフォールドは健康な筋肉に見られる整列した構造を模倣することができる。

これらのスキャフォールドをさらに効果的にするために、電気的特性を回復するためにポリピロール(PPy)という導電性材料を含めている。この追加により、筋肉細胞を傷めることなくスキャフォールドの電気を伝導する能力が大幅に向上することが示されている。

主な目的は、非導電性のスキャフォールドと導電性材料を含むスキャフォールドがVMLの動物モデルに移植されたとき、筋肉の治癒にどのように影響するかを評価すること。

テストのための材料と方法

ポリピロールの合成

PPy粒子は、ピロールと塩化鉄という物質を混ぜることで作られる。このプロセスにより、フィルタリングして乾燥させることができる黒い粉が生成される。これらの粒子の化学構造は、正しく作られているかを確認するために分光法を用いて確認される。

スキャフォールドの作成

スキャフォールドを作るために、I型コラーゲンとコンドロイチン硫酸の混合物を特定の酸性溶液で安定させる。この混合物は、望ましい整列した構造を維持するために制御されたプロセスで冷凍される。導電性スキャフォールド用には、冷凍する前にPPy粒子をコラーゲン溶液に混ぜる。冷凍後、スキャフォールドは乾燥され、強度と安定性を向上させるために交差結合される。

動物ケアと外科的手順

動物を使ったすべての研究は、彼らの福祉を確保するために厳しいガイドラインの下で行われた。実験には雄のラットが使用され、適切に飼育され監視された。

VMLの外科モデルは、ラットの足から筋肉の一部を取り除くことで開発された。3つのグループが設けられた:修復なしのグループ、非導電性スキャフォールドのグループ、導電性スキャフォールドのグループ。外科手術は慎重に行われ、すべてのグループが同じレベルのケガを経験するようにした。手術後、すべての動物は回復を慎重に監視された。

手術後の機能テスト

筋肉の治癒状況を評価するために、研究者たちは手術後のいくつかの時点で筋肉の収縮能力と力の生産をテストした。筋肉に電気刺激を与えることで、どれぐらいの力が発生しているかを測定した。このテストは手術後4、8、12週間で繰り返され、時間経過とともに変化を追跡した。

テスト結果は、導電性と非導電性の両方のスキャフォールドが、まったく治療を受けていない筋肉に比べて筋機能を改善するのに役立ったことを示した。スキャフォールドによる治療は筋力の回復をより良くすることができた。

筋肉の構造と治癒の観察

機能テストが完了した後、筋肉組織がどれだけ治癒したかを理解するために詳細に検査された。検査では筋肉をスライスして分析のために染色した。健康な筋肉は整然とした構造を持ち、治療を受けていない筋肉は多くの瘢痕があり、新しい筋肉の成長の証拠はほとんどなかった。

治療を受けた両方の筋肉は再生の兆候が見られ、一部の筋肉修復をサポートしていることを示唆している。しかし、線維性組織が残っており、いくつかの治癒があったものの完全ではないことを示している。

筋線維のサイズと数の分析

筋肉の回復をより良く理解するために、研究者たちは筋線維のサイズと数を測定した。すべての傷ついた筋肉は健康な筋肉に比べて筋線維が少ないことが分かった。しかし、治療された筋肉はサイズと数が改善され、特に導電性スキャフォールドで顕著だった。

この分析は、両方のタイプのスキャフォールドが筋肉の状態を改善するのに役立ったものの、正常な筋機能を達成するためにはまだ多くの作業が必要であることを示している。

マクロファージの存在と炎症

筋肉のケガの後、マクロファージと呼ばれる免疫細胞が治癒に重要な役割を果たす。彼らは治癒を促進したり、回復を妨げる慢性炎症を引き起こしたりすることがある。スキャフォールドが炎症反応にどのように影響しているかを評価するために、これらの細胞の存在が調べられた。

治療を受けた筋肉では、両方のタイプのマクロファージが依然として高いレベルで存在しており、これは治癒反応または持続的な炎症を示唆している。興味深いことに、治療を受けていない筋肉は健康な組織により似たマクロファージの数を示しており、彼らが治癒反応を完了した可能性があることを示唆している。

血管形成の評価

血管の形成は筋肉の回復にとって重要で、筋肉が適切に治癒するためには良好な血液供給が必要。研究者たちは、治療された筋肉と治療されていない筋肉の血管のマーカーを調べた。導電性材料を含むスキャフォールドは、他のものと比べて血管の数が多いことが示され、より良い血管形成を示している。

修復された筋肉の神経支配

筋肉がケガの後に適切に機能するためには、神経系にもしっかりと再接続されていなければならない。治療された筋肉と治療されていない筋肉の神経細胞の存在が調べられた。その結果、非導電性スキャフォールドだけが健康な筋肉組織に匹敵する神経カウントを持っていることが示された。

この発見は、導電性スキャフォールドがいくつかの回復に寄与したものの、神経成長をサポートする点では非導電性のものほど良くなかったことを示唆している。

結果の要約

この研究の目的は、健康な筋肉の特性を模倣した特殊な3Dスキャフォールドを使用して、VMLのケガの結果を改善することだった。両方のタイプのスキャフォールドは、未治療の筋肉に比べて機能的回復を提供したが、依然として改善の余地が大きかった。

いくつかの筋肉再生や血管形成はどちらのスキャフォールドタイプでも確認されたが、健康な筋肉と比較すると、まだ多くの線維性組織や筋肉のボリュームの減少が見られた。これは、ただスキャフォールドを使用するだけでは完全な回復には不十分であることを示している。

今後の研究では、これらのスキャフォールドに筋細胞を追加することや、他の方法で治癒や筋肉再生を促進することを検討する必要がある。

結論

全体として、この研究は先進的な生体材料を使用してVMLのケガに対処する新しい治療法の可能性を示している。重要な進展があったものの、最適な筋肉の修復と機能を達成することは依然として課題である。これらの材料が体とどのように相互作用するか、おそらく筋細胞や他のサポート成分で強化する方法を探求することが、将来的に筋肉のケガを効果的に治療する成功の鍵となるだろう。

オリジナルソース

タイトル: Freeze-dried porous collagen scaffolds for the repair of volumetric muscle loss injuries

概要: Volumetric muscle loss (VML) injuries are characterized by the traumatic loss of skeletal muscle resulting in permanent damage to both tissue architecture and electrical excitability. To address this challenge, we previously developed a 3D aligned collagen-glycosaminoglycan (CG) scaffold platform that supported in vitro myotube alignment and maturation. In this work, we assessed the ability of CG scaffolds to facilitate functional muscle recovery in a rat tibialis anterior (TA) model of VML. Functional muscle recovery was assessed following implantation of either non-conductive CG or electrically conductive CG-polypyrrole (PPy) scaffolds at 4, 8, and 12 weeks post-injury by in vivo electrical stimulation of the peroneal nerve. After 12 weeks, scaffold-treated muscles produced maximum isometric torque that was significantly greater than non-treated tissues. Histological analysis further supported these reparative outcomes with evidence of regenerating muscle fibers at the material-tissue interface in scaffold-treated tissues that was not observed in non-repaired muscles. Scaffold-treated muscles possessed higher numbers of M1 and M2 macrophages at the injury while conductive CG-PPy scaffold-treated muscles showed significantly higher levels of neovascularization as indicated by the presence of pericytes and endothelial cells, suggesting a persistent wound repair response not observed in non-treated tissues. Finally, only tissues treated with non-conductive CG scaffolds displayed neurofilament staining similar to native muscle, further corroborating isometric contraction data. Together, these findings show that CG scaffolds can facilitate improved skeletal muscle function and endogenous cellular repair, highlighting their potential use as therapeutics for VML injuries.

著者: Steven R Caliari, I. M. Basurto, R. D. Boudreau, G. C. Bandara, S. A. Muhammad, G. J. Christ

最終更新: 2024-09-03 00:00:00

言語: English

ソースURL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.08.30.610194

ソースPDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.08.30.610194.full.pdf

ライセンス: https://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0/

変更点: この要約はAIの助けを借りて作成されており、不正確な場合があります。正確な情報については、ここにリンクされている元のソース文書を参照してください。

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