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Il ruolo dei batteri nel ciclo dell'azoto a Oak Ridge

La ricerca mostra come i batteri si adattano a inquinamento estremo e aiutano il ciclo dell'azoto.

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Il ciclo dell'azoto è un processo naturale che aiuta a far circolare l'azoto nell'ambiente. Tuttavia, le attività umane come l'agricoltura e l'industria hanno cambiato molto questo ciclo. L'azoto in eccesso da queste attività finisce nei fiumi, causando problemi come inquinamento dell'acqua, fioriture algali e un aumento dei gas serra.

Un esempio estremo di contaminazione da azoto si trova nella Riserva di Oak Ridge (ORR) in Tennessee. Qui, i livelli di Nitrato nel terreno sono arrivati a quantità estremamente elevate, soprattutto a causa dei rifiuti provenienti dalla lavorazione di materiali nucleari avvenuta a metà del XX secolo. L'impianto Y-12 all'ORR ha prodotto molti rifiuti contenenti sostanze nocive come Acido nitrico e vari Metalli pesanti. Questi rifiuti sono stati sversati in stagni aperti per molti anni, causando una grave contaminazione del suolo circostante e delle falde acquifere.

Anche se ci sono stati tentativi di bonificare il sito, l'area intorno ai vecchi stagni di rifiuti rimane molto acida e piena di metalli tossici e nitrati. Interessante notare che, nonostante queste condizioni dure, gli scienziati hanno scoperto che alcuni batteri continuano a prosperare in questo ambiente. Questi batteri, identificati attraverso vari studi, includono specie in grado di ridurre i livelli di nitrato, che è un processo chiave nel ciclo dell'azoto.

Il Ruolo dei Batteri nella Riduzione del Nitrato

La ricerca ha dimostrato che iniettare certi composti nel terreno può stimolare la crescita di batteri che riducono i livelli di nitrato. In uno studio, i ricercatori hanno scoperto che aumentando la presenza di questi batteri si riduceva la diversità generale tra la vita microbica nella zona, ma si registrava un aumento in un gruppo specifico di batteri noti come Betaproteobacteria. Alcuni membri di questo gruppo, tra cui quelli del genere Castellaniella, sono particolarmente abili a ridurre il nitrato.

Questi batteri sono stati trovati in vari ambienti, comprese foreste, impianti di trattamento delle acque reflue e in aree contaminate come l'ORR. Dimostrano una notevole capacità di adattarsi a diverse condizioni, anche decomponendo composti complessi in assenza di ossigeno.

La resilienza di questi batteri potrebbe essere collegata alla loro capacità di condividere materiale genetico tra di loro. Questo processo, noto come trasferimento orizzontale di geni, consente loro di adattarsi rapidamente all'ambiente e sviluppare nuove caratteristiche che li aiutano a sopravvivere in condizioni difficili.

Obiettivi della Ricerca

Nello studio di questi batteri all'ORR, i ricercatori miravano a rispondere a diverse domande importanti:

  1. Qual è la distribuzione geografica dei batteri Castellaniella nell'area dell'ORR?
  2. In che modo la diversità genetica di questi batteri si relaziona a dove si trovano?
  3. Possono le differenze nel comportamento di questi batteri nei test di laboratorio spiegare dove sono più o meno comuni nell'area?
  4. Fino a che punto è importante il trasferimento orizzontale di geni per la diversità dei batteri Castellaniella?

I ricercatori hanno raccolto dati da studi sul campo, esperimenti di laboratorio e test genetici per comprendere meglio le caratteristiche dei batteri Castellaniella.

Metodi Utilizzati nella Ricerca

Isolamento di Strain Batterici

I ricercatori si sono concentrati su sei ceppi specifici di Castellaniella prelevati da campioni di falda acquifera all'ORR. Alcuni di questi ceppi sono stati raccolti da un pozzo contaminato vicino ai vecchi stagni di rifiuti, mentre altri provenivano da un pozzo vicino colpito dalla stessa contaminazione.

I ricercatori hanno coltivato questi ceppi batterici in condizioni controllate in laboratorio. Hanno utilizzato mezzi nutritivi specifici per incoraggiare la crescita e hanno testato come ogni ceppo potesse affrontare diversi livelli di acidità ed esposizione a metalli pesanti.

Esperimenti di Laboratorio

Per capire come funzionassero questi batteri, i ricercatori hanno condotto esperimenti di crescita aerobica e anaerobica. Hanno misurato quanto bene i batteri crescevano a diversi livelli di pH e in presenza di metalli pesanti.

Inoltre, hanno testato la capacità dei batteri di ridurre il nitrato in varie condizioni. Analizzando come i batteri si comportavano in questi setting, i ricercatori potevano fare collegamenti tra i risultati di laboratorio e ciò che osservavano sul campo.

Diversità Batterica all'ORR

Esaminando i dati di studi precedenti, i ricercatori hanno identificato dodici diversi tipi di batteri Castellaniella presenti nell'ambiente dell'ORR. Di questi, tre tipi erano notevolmente più comuni, con un tipo (ASV2) che risultava il più prevalente nei campioni di falda acquifera raccolti dalla zona.

Ulteriori mappature hanno mostrato che questi batteri erano raggruppati attorno a specifiche località, in particolare nelle falde acquifere vicine agli stagni contaminati. Alte concentrazioni di certi tipi di metalli nelle falde acquifere sembravano correlarsi con l'abbondanza di questi batteri.

È interessante notare che i precedenti sforzi di biostimolazione all'ORR avevano portato a popolazioni aumentate di Castellaniella, che hanno aiutato a ridurre i livelli di nitrato nell'ambiente. Questo suggeriva che promuovere la crescita di questi batteri potesse essere una strategia valida per gestire l'inquinamento.

Caratteristiche Chiave dei Batteri Castellaniella

Analisi del Genoma

I ricercatori hanno sequenziato i genomi dei sei ceppi di Castellaniella per saperne di più sulla loro diversità genetica. Le analisi hanno rivelato che questi batteri rientravano in diversi gruppi, con alcuni abbastanza distinti l'uno dall'altro nonostante la loro vicinanza fisica.

I ceppi dell'ORR mostrano somiglianze e differenze genetiche rispetto ad altri ceppi di Castellaniella provenienti da ambienti diversi. Questo suggerisce che anche all'interno dello stesso genere, diverse popolazioni potrebbero aver evoluto vari tratti che li aiutano a sopravvivere nei loro ambienti unici.

L'Importanza del Pangenoma

Per comprendere meglio le caratteristiche evolutive di Castellaniella, i ricercatori hanno utilizzato un concetto chiamato pangenoma, che si riferisce a tutti i geni presenti in un gruppo di organismi correlati. In questo caso, il pangenoma includeva geni dei batteri dell'ORR e di altri ceppi provenienti da varie località.

L'analisi ha mostrato che i ceppi dell'ORR avevano una maggiore proporzione di geni accessori (quelli non essenziali ma utili per l'adattamento) rispetto ai ceppi non-ORR. Questo suggerisce che le condizioni difficili in posti come l'ORR possono favorire l'acquisizione e la conservazione di tratti genetici diversi.

Elementi Genetici Integrati

I ricercatori hanno anche trovato che tutti i dodici genomi di Castellaniella contenevano elementi genetici integrati, che sono pezzi di DNA che possono essere trasferiti tra batteri o all'interno del loro stesso genoma. Questo trasferimento di geni è visto come un meccanismo chiave per permettere ai batteri di adattarsi rapidamente a nuove sfide nel loro ambiente.

I ceppi dell'ORR hanno mostrato di avere più di questi elementi integrati rispetto ai ceppi provenienti da altre aree, rafforzando l'idea che le complesse pressioni a cui sono sottoposti all'ORR abbiano plasmato il percorso evolutivo di questi batteri.

Tratti Funzionali per la Sopravvivenza

I ricercatori hanno esplorato tratti specifici che potrebbero aiutare i Castellaniella a sopravvivere nell'ambiente difficile dell'ORR.

Tolleranza all'Acido

Una grande sfida per i batteri all'ORR è il basso pH trovato nel suolo e nelle falde acquifere. I ricercatori hanno scoperto che il range di pH preferito dai principali tipi di Castellaniella era tra 4 e 7. Nonostante ciò, potevano prosperare anche a livelli di pH leggermente più elevati.

Lo studio ha rivelato che specifici geni associati alla tolleranza all'acido erano presenti in questi genomi batterici. Anche se questi batteri sembrano avere un set limitato di geni per la tolleranza all'acido, dimostrano comunque la capacità di sopravvivere in condizioni acide.

Capacità di Denitrificazione

I batteri Castellaniella svolgono un ruolo essenziale nel ciclo dell'azoto riducendo il nitrato. I ricercatori hanno confermato che l'ASV2 poteva convertire il nitrato in gas azoto innocuo in modo efficiente, una caratteristica vitale per ripulire ambienti contaminati. Non tutti i ceppi nello studio avevano le stesse capacità; alcuni non possedevano i geni necessari per il processo di denitrificazione completo.

Questa differenza nella funzionalità sembrava essere un fattore importante per comprendere come questi batteri competessero tra di loro nell'ambiente dell'ORR.

Resistenza ai Metalli Pesanti

A causa della presenza di metalli pesanti nel sito ORR, i ricercatori hanno anche indagato sulla capacità dei batteri di tollerare queste condizioni. Lo studio ha scoperto che l'ASV2 mostrava solo lievi problemi di crescita quando esposto a un mix di metalli riflettenti ciò che si trova nelle falde acquifere dell'ORR. Al contrario, i ceppi ASV1 erano significativamente colpiti, indicando che potrebbero essere meno adatti a sopravvivere in questo ambiente contaminato.

L'analisi dei geni per l'omeostasi dei metalli pesanti nei genomi di Castellaniella ha mostrato che gli isolati dell'ORR avevano più di questi geni rispetto ai loro omologhi non-ORR. Questo suggerisce che questi batteri siano ben equipaggiati per affrontare la contaminazione da metalli pesanti comune nel loro ambiente.

Implicazioni Globali della Ricerca su Castellaniella

Lo studio di Castellaniella e della sua capacità di adattarsi a ambienti contaminati ha implicazioni più ampie per la gestione ambientale. La presenza di questi batteri in vari ambienti inquinati suggerisce che possano essere unici nel sopravvivere e mitigare gli impatti di più fattori di stress sugli ecosistemi.

Comprendendo i tratti genetici e i meccanismi che consentono ai Castellaniella di prosperare in questi ambienti, i ricercatori possono sviluppare strategie migliori per bonificare e ripristinare siti contaminati. Questa conoscenza potrebbe anche aiutare a prevedere come altre comunità microbiche potrebbero rispondere a condizioni simili in futuro.

Conclusione

L'esplorazione dei batteri Castellaniella nella Riserva di Oak Ridge svela importanti intuizioni sulla resilienza microbica e sull'adattamento in risposta alle pressioni ambientali. Questi batteri sono cruciali non solo per il ciclo dell'azoto, ma servono anche come modello per studiare come la vita possa persistere e adattarsi in condizioni estreme. Man mano che gli scienziati continuano a indagare su questi microbi resilienti, le loro scoperte potrebbero portare a una migliore gestione degli ambienti inquinati e ad approfondire la nostra comprensione dell'ecologia microbica.

Fonte originale

Titolo: Genomic and environmental controls on Castellaniella biogeography in an anthropogenically disturbed subsurface

Estratto: Castellaniella species have been isolated from a variety of mixed-waste environments including the nitrate and multiple metal contaminated subsurface at the Oak Ridge Reservation (ORR). Previous studies examining microbial community composition and nitrate removal at ORR during biostimulation efforts reported increased abundances of members of the Castellaniella genus concurrent to increased denitrification rates. Thus, we asked how genomic and abiotic factors control the Castellaniella biogeography at the site to understand how these factors may influence nitrate transformation in an anthropogenically impacted setting. ORR Castellaniella strains showed a higher degree of genetic diversification than those originating from non-ORR sites, which we attribute to the multitude of extreme stressors faced in the ORR subsurface. We report the isolation and characterization of several Castellaniella strains from the ORR subsurface. Five of these isolates match at 100% identity (at the 16S rRNA gene V4 region) to two Castellaniella amplicon sequence variants (ASVs), ASV1 and ASV2, that have persisted in the ORR subsurface for at least two decades. However, ASV2 has consistently higher relative abundance in samples taken from the site and was also the dominant blooming denitrifier population during a prior biostimulation effort. We found that the ASV2 representative strain has greater resistance to mixed metal stress than the ASV1 representative strains. We attribute this resistance, in part, to the large number of unique heavy metal resistance genes identified on a genomic island in the ASV2 representative genome. Additionally, we suggest that the relatively lower fitness of ASV1 may be connected to the loss of the nitrous oxide reductase (nos) operon (and associated nitrous oxide reductase activity) due to the insertion at this genomic locus of a mobile genetic element carrying copper resistance genes. This study demonstrates the value of integrating genomic, environmental, and phenotypic data to characterize the biogeography of key microorganisms in contaminated sites.

Autori: Jennifer L Goff, E. G. Szink, K. L. Durrence, L. M. Lui, T. N. Nielsen, J. V. Kuehl, K. A. Hunt, J.-M. Chandonia, J. Huang, M. P. Thorgersen, F. L. Poole, D. A. Stahl, R. Chakraborty, A. M. Deutschbauer, A. P. Arkin, M. W. W. Adams

Ultimo aggiornamento: 2024-02-04 00:00:00

Lingua: English

URL di origine: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.02.03.578758

Fonte PDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.02.03.578758.full.pdf

Licenza: https://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0/

Modifiche: Questa sintesi è stata creata con l'assistenza di AI e potrebbe presentare delle imprecisioni. Per informazioni accurate, consultare i documenti originali collegati qui.

Si ringrazia biorxiv per l'utilizzo della sua interoperabilità ad accesso aperto.

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