Spostare l'anidrasi carbonica nel riso per una fotosintesi migliore
I ricercatori hanno spostato l'anidrasi carbonica nel riso, migliorando la fotosintesi e la crescita.
― 7 leggere min
Indice
- Adattamenti nelle Piante
- Ricerca sulla Relocazione dell'Anidrasi Carbonica
- L'Esperimento
- Analisi delle Varianti dell'Anidrasi Carbonica
- Conferma della Localizzazione della Proteina
- Misurazione dell'Attività dell'Anidrasi Carbonica
- L'Impatto sulla Fotosintesi e sulla Crescita
- Dinamiche del Bicarbonato e Funzione del Fotosistema II
- Conclusione: Risultati Chiave e Implicazioni Future
- Fonte originale
La Fotosintesi è un processo fondamentale che permette alle piante di trasformare l'anidride carbonica dell'aria in energia. Questo processo è essenziale per quasi tutto il carbonio che entra nel nostro ambiente. La maggior parte delle piante terrestri utilizza un metodo chiamato fotosintesi C3. In questo processo, una proteina conosciuta come rubisco aiuta a catturare l'anidride carbonica e trasformarla in un composto chiamato 3-fosfoglicerato (3-PGA). Tuttavia, il rubisco può anche interagire con l'ossigeno, il che porta a un problema noto come fotorespirazione. Quando ciò accade, si produce una sostanza chiamata 2-fosfoglicolato, che può interferire con il metabolismo della pianta. Questo significa che le piante possono perdere fino al 50% della loro energia a causa di questa reazione indesiderata, specialmente nelle attuali condizioni atmosferiche. Perciò, le piante hanno buone ragioni per sviluppare modi per limitare la fotorespirazione.
Adattamenti nelle Piante
Oltre 120 diversi tipi di piante terrestri hanno sviluppato adattamenti speciali per aumentare i livelli di anidride carbonica attorno al rubisco. Questo aiuta a ridurre l'impatto della fotorespirazione. Questi adattamenti possono essere raggruppati in due principali tipi di fotosintesi: il metabolismo acido crassulaceo (CAM) e la fotosintesi C4. Invece di trasformare direttamente l'anidride carbonica in 3-PGA, queste piante utilizzano un metodo diverso che coinvolge un enzima chiamato Anidrasi carbonica (CA). Questo enzima aiuta a produrre Bicarbonato dall'anidride carbonica, che viene poi elaborato attraverso varie reazioni per aumentare i livelli di anidride carbonica in un modo che limita le interazioni con l'ossigeno. Questo metodo riduce la perdita di energia dalla fotorespirazione e migliora l'efficienza nell'uso di acqua e azoto nelle piante.
Il successo di questi meccanismi di concentrazione del CO2 in diversi tipi di piante ha portato a sforzi globali per introdurre adattamenti simili nelle piante C3 come il riso. Anche se i modi specifici in cui diversi tipi di piante attuano questi adattamenti possono variare, condividono tutte una caratteristica comune: il trasferimento dell'anidrasi carbonica dai cloroplasti (la parte della cellula in cui avviene la fotosintesi) al citosol (la parte fluida della cellula).
Ricerca sulla Relocazione dell'Anidrasi Carbonica
Finora, gli scienziati hanno investigato come avviene questa relocazione dell'anidrasi carbonica in appena due specie di piante C4. In questi casi, la relocazione è causata da mutazioni nelle sequenze di targeting dei cloroplasti del gene dell'anidrasi carbonica che si trova principalmente nei cloroplasti.
Nelle piante C3, l'anidrasi carbonica esiste in tre tipi: alfa-CA, beta-CA e gamma-CA. Il tipo beta-CA è il più comune nelle foglie di queste piante. Anche se gli scienziati hanno suggerito molte funzioni per questi vari tipi di anidrasi carbonica nella fotosintesi, il ruolo principale sembra essere quello di mantenere stabili i livelli di anidride carbonica per il rubisco. Alcuni studi hanno mostrato che ridurre l'attività dell'anidrasi carbonica non influisce significativamente sulla fotosintesi, probabilmente grazie alla sua capacità di funzionare in modo molto efficiente.
Ci sono ulteriori funzioni che l'anidrasi carbonica potrebbe avere, come influenzare lo stato redox del Fotosistema II, una parte cruciale del processo fotosintetico. Questo ha portato alla domanda: cosa succede alla funzione del fotosistema II e alla crescita complessiva delle piante quando l'anidrasi carbonica viene trasferita dai cloroplasti al citosol?
L'Esperimento
Per rispondere a questa domanda, i ricercatori hanno mirato a trasferire l'attività dell'anidrasi carbonica dai cloroplasti al citosol nelle piante di riso attraverso editing genetico. Nello specifico, hanno preso di mira i geni responsabili della localizzazione cloroplastica dell'anidrasi carbonica per creare mutazioni che spostassero la sua attività nel citosol.
Lo studio ha rilevato che le piante di riso geneticamente modificate non presentavano effetti dannosi sulla loro capacità di catturare anidride carbonica o sulla loro crescita. Interessante, la ricerca ha rivelato un nuovo ruolo per l'anidrasi carbonica nel supportare il passaggio rapido di elettroni all'interno del fotosistema II.
Analisi delle Varianti dell'Anidrasi Carbonica
Per valutare l'abbondanza e il funzionamento delle diverse varianti dell'anidrasi carbonica nelle foglie mature di riso, i ricercatori hanno esaminato un dataset specifico. Questa analisi ha identificato un gene come il più espresso nelle foglie di riso. I ricercatori hanno anche scoperto molteplici varianti di trascritti da questo gene, evidenziando la complessità della sua espressione.
Gli scienziati hanno poi progettato RNA guida per mirare a parti specifiche del gene responsabili della localizzazione cloroplastica dell'anidrasi carbonica. Questo ha portato alla creazione di molteplici linee di riso geneticamente modificate che si prevedeva avessero perso l'attività dell'anidrasi carbonica nei cloroplasti, mantenendola però nel citosol.
Conferma della Localizzazione della Proteina
Successivamente, i ricercatori volevano confermare se le attività delle proteine dell'anidrasi carbonica modificate fossero correttamente localizzate nel citosol. Hanno utilizzato varie tecniche, tra cui modelli computazionali e esperimenti di laboratorio per analizzare se le proteine si spostassero nei giusti punti della cellula.
Nonostante le previsioni iniziali suggerissero che alcune varianti potessero ancora mirare ai cloroplasti, i test hanno mostrato che tutte le linee modificate si localizzavano effettivamente nel citosol. Questo ha confermato che l'editing aveva spostato con successo l'attività dell'anidrasi carbonica dai cloroplasti.
Misurazione dell'Attività dell'Anidrasi Carbonica
Gli scienziati hanno poi esaminato l'attività dell'anidrasi carbonica all'interno di queste piante modificate. Analizzando i trascritti del gene dell'anidrasi carbonica, hanno confermato che l'attività precedentemente trovata nei cloroplasti era ora esclusivamente nel citosol. Questo spostamento dell'attività ha portato anche a una sostanziale riduzione della quantità di anidrasi carbonica associata ai cloroplasti, suggerendo una relocazione riuscita.
L'Impatto sulla Fotosintesi e sulla Crescita
Dopo aver confermato la relocazione dell'anidrasi carbonica, i ricercatori hanno esplorato se questo cambiamento avrebbe influenzato la crescita e la fotosintesi della pianta. Hanno confrontato le linee geneticamente modificate con le piante selvatiche, osservando attentamente le loro caratteristiche fisiche, i tassi di crescita e la salute generale. Remarkabilmente, non hanno trovato impatti negativi sulla crescita o sui tassi fotosintetici, indicando che la relocazione dell'attività dell'anidrasi carbonica non ostacolava la capacità delle piante di fotosintetizzare efficacemente.
Dinamiche del Bicarbonato e Funzione del Fotosistema II
Tuttavia, i ricercatori hanno ipotizzato che la ridotta attività dell'anidrasi carbonica nei cloroplasti potrebbe influenzare la concentrazione di bicarbonato all'interno dei cloroplasti. Il bicarbonato gioca un ruolo significativo nel funzionamento del fotosistema II, fondamentale per il trasferimento di energia durante la fotosintesi.
Per testare questa idea, hanno analizzato i tassi di induzione della fluorescenza nei cloroplasti delle piante geneticamente modificate rispetto alle piante selvatiche. I risultati hanno mostrato che le piante modificate impiegavano più tempo per raggiungere la massima fluorescenza, suggerendo che la mancanza di bicarbonato influenzava il funzionamento del fotosistema II.
Conclusione: Risultati Chiave e Implicazioni Future
Il lavoro svolto in questo studio rappresenta un notevole progresso nella nostra comprensione della fotosintesi e della crescita delle piante. Spostando con successo l'anidrasi carbonica dai cloroplasti al citosol nelle piante di riso, i ricercatori hanno dimostrato che è possibile imitare un passaggio chiave nell'evoluzione dei meccanismi di concentrazione del carbonio nelle piante.
Nonostante la relocazione dell'enzima, le piante hanno mantenuto tassi di crescita e fotosintesi stabili, confermando che l'attività dell'anidrasi carbonica non è solo fondamentale per catturare l'anidride carbonica, ma gioca anche un ruolo nella capacità della pianta di rispondere rapidamente ai cambiamenti di luce.
Questa ricerca getta le basi per future esplorazioni nella genetica delle piante. I progressi fatti potrebbero aiutare a migliorare la produttività e la resilienza delle colture integrando tratti benefici da piante che hanno già evoluto questi adattamenti.
Con le sfide globali legate ai cambiamenti climatici e alla sicurezza alimentare, ricerche del genere diventano sempre più importanti. Con i continui progressi nelle tecnologie di editing genetico, c'è potenziale per creare colture con migliorata efficienza nella cattura del carbonio e nella fotosintesi, il che beneficerà le pratiche agricole e la gestione ambientale.
Titolo: Realisation of a key step in the evolution of C4 photosynthesis in rice by genome editing.
Estratto: C4 photosynthesis is a repeatedly evolved adaptation to photosynthesis that functions to reduce energy loss from photorespiration. The recurrent evolution of this adaptation is achieved through changes in the expression and localisation of several enzymes and transporters that are conventionally used in non-photosynthetic metabolism. These alterations result in the establishment of a biochemical CO2 pump that increases the concentration of CO2 around rubisco in a cellular environment where rubisco is protected from oxygen thus preventing the occurrence of photorespiration. A key step in the evolution of C4 photosynthesis is the change in subcellular localisation of carbonic anhydrase (CA) activity from the mesophyll cell chloroplast to the cytosol, where it catalyzes the first biochemical step of the C4 pathway. Here, we achieve this key step in C4 evolution in the C3 plant Oryza sativa (rice) using genome editing. We show that editing the chloroplast transit peptide of the primary CA isoform in the leaf results in relocalisation of leaf CA activity from the chloroplast to the cytosol. Through analysis of fluorescence induction kinetics in these CA relocalisation lines we uncover a role a new role for chloroplast CA in photosynthetic induction. We also reveal that relocalisation of CA activity to the cytosol causes no detectable perturbation to plant growth or leaf-level CO2 assimilation. Collectively, this work uncovers a novel role for chloroplast CA in C3 plants, and demonstrates that it is possible to achieve a key step in the evolution of C4 photosynthesis by genome editing. Significance statementC4 photosynthesis is a highly efficient adaptation to photosynthesis that fuels the worlds most productive crop plants. It evolved from conventional C3 photosynthesis through a series of changes in leaf biochemistry and anatomy. Here we achieve a key evolutionary step on the path to C4 photosynthesis in rice using genome editing. Specifically, we alter the primary location of carbonic anhydrase activity in the rice leaf from the chloroplast to the cytosol. In doing so, we uncover a novel role for carbonic anhydrase in facilitating the rapid induction kinetics of photosystem II, and initiate a new era of C4 engineering using precision breeding techniques.
Autori: Steven Kelly, J. Jethva, F. Hahn, R. Giuliani, N. Peeters, A. Cousins
Ultimo aggiornamento: 2024-05-21 00:00:00
Lingua: English
URL di origine: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.05.21.595093
Fonte PDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.05.21.595093.full.pdf
Licenza: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
Modifiche: Questa sintesi è stata creata con l'assistenza di AI e potrebbe presentare delle imprecisioni. Per informazioni accurate, consultare i documenti originali collegati qui.
Si ringrazia biorxiv per l'utilizzo della sua interoperabilità ad accesso aperto.