Recherche sur le choléra : Aperçus à partir d'échantillons de patients
Une étude révèle la diversité génétique des bactéries cholériques chez les patients.
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Table des matières
Le choléra est une maladie intestinale grave causée par une bactérie appelée Vibrio cholerae O1. Cette maladie entraîne des symptômes comme la diarrhée aqueuse, les vomissements et une déshydratation sévère. Récemment, les épidémies de choléra ont augmenté en taille et en durée. Les scientifiques étudient la génétique de cette bactérie pour en savoir plus sur sa propagation et sa résistance aux traitements.
Comment le choléra infecte
Quand les gens consomment de la nourriture ou de l'eau contaminée par V. cholerae, les bactéries pénètrent dans le corps. Elles font face à des défis, comme l'acidité de l'estomac, qui peut en tuer beaucoup. Cependant, certaines bactéries survivent à cet environnement hostile et atteignent l'intestin grêle. Là, elles peuvent se multiplier et former des microcolonies. Cela est rendu possible grâce à des structures appelées facteurs de colonisation, dont l'un est le pilus co-régulé par la toxine (TCP).
Une fois dans l'intestin grêle, V. cholerae produit une toxine appelée Toxine cholérique (CT). Cette toxine se fixe aux cellules qui tapissent l'intestin et provoque la sécrétion d'ions chlorure. En conséquence, le sodium et l'eau entrent également dans l'intestin, entraînant les symptômes du choléra, tels que la diarrhée et les vomissements. Beaucoup de patients ressentent des vomissements, ce qui est différent d'autres maladies où seuls les contenus de l'estomac sont expulsés.
Importance des échantillons de vomi et de selles
Les populations de V. cholerae peuvent être étudiées à partir d'échantillons de selles. Cependant, les échantillons de vomi pourraient offrir une meilleure vue des bactéries qui provoquent activement l'infection dans l'intestin grêle. La composition génétique des bactéries dans les selles peut refléter ce qui est expulsé du corps, tandis que les bactéries dans le vomi peuvent indiquer ce qui infecte activement l'intestin grêle.
La Diversité génétique de V. cholerae peut changer tout au long du tractus gastro-intestinal. Il y a plusieurs raisons à cela. Tout d'abord, un grand nombre de bactéries peuvent faire face à des défis pour survivre, ce qui conduit à moins de bactéries atteignant l'intestin grêle. Des recherches sur des animaux indiquent une baisse significative du nombre de V. cholerae du moment où elles sont ingérées jusqu'à leur installation dans l'intestin grêle. Ensuite, certaines souches peuvent être favorisées alors que les bactéries se battent dans un environnement mixte. Enfin, des mutations ou des changements génétiques peuvent se produire à mesure que les bactéries s'adaptent à différents endroits dans le tractus gastro-intestinal.
Étudier le choléra au Bangladesh
Pour évaluer la diversité génétique de V. cholerae, les chercheurs ont collecté des échantillons de vomi et de selles de dix patients atteints de choléra à Dhaka, au Bangladesh, une région connue pour ses taux élevés de choléra. Les chercheurs ont séquencé les génomes de ces échantillons pour analyser les variations dans le matériel génétique et la présence de différents gènes.
En comparant les informations génétiques des vomis et des selles, les chercheurs ont trouvé une réduction modeste des variations génétiques et du contenu génétique entre les deux types d'échantillons. Cela indique que le passage dans l'intestin n'affecte pas de manière significative la diversité génétique globale ou les variations de souches au sein des bactéries.
Collecte et analyse des échantillons
L'étude a impliqué la collecte d'échantillons de patients qui avaient une diarrhée sévère et qui ont testé positif pour V. cholerae O1. Les chercheurs ont recueilli les échantillons rapidement après l'admission pour fournir des informations précises sur la composition génétique des bactéries. Les échantillons de vomi et de selles ont été congelés et traités plus tard pour isoler V. cholerae en vue d'une analyse approfondie.
L'isolement a consisté à placer les échantillons dans des milieux de culture spécifiques qui favorisent la croissance de V. cholerae. Après incubation, les chercheurs ont identifié des colonies de V. cholerae et ont confirmé leur identité par des tests génétiques.
Les chercheurs ont effectué un séquençage du génome entier sur les colonies isolées pour recueillir des informations sur la composition génétique de V. cholerae. L'analyse s'est concentrée sur les variants de nucléotides uniques (SNVs), qui indiquent des différences génétiques, et la présence ou l'absence de gènes.
Résultats de l'étude
Dans l'ensemble, l'étude a montré que la diversité génétique de V. cholerae O1 dans les vomis et les selles était relativement faible. Cela suggère que le passage à travers le tractus gastro-intestinal n'a pas d'effet dramatique sur la diversité génétique des bactéries. Cependant, des variations ont été notées, certains patients montrant des réductions des différences génétiques entre les vomis et les selles.
L'étude visait également à identifier s'il y avait des gènes associés à la présence de V. cholerae dans le vomi par rapport aux selles. Aucune association significative pour des gènes individuels n'a été trouvée. Cependant, les gènes au sein de l'opéron TCP, important pour la colonisation, étaient plus souvent présents dans les selles que dans le vomi. Cela suggère que les gènes essentiels à l'infection pourraient être moins susceptibles d'être perdus dans les échantillons de selles.
Considérations sur les changements génétiques
Des changements génétiques comme des mutations ou des suppressions peuvent survenir à mesure que V. cholerae traverse le corps. Dans cette étude, les chercheurs s'intéressaient particulièrement à l'opéron TCP. Bien que le séquençage par lecture courte ait initialement indiqué des suppressions possibles dans cette région génique, une validation plus approfondie a montré que ces gènes étaient présents dans les résultats de séquençage par lecture longue.
Ces résultats soulignent la complexité de l'interprétation des données génétiques. Certains changements détectés dans les lectures courtes peuvent avoir été dus à des erreurs de séquençage, plutôt qu'à de véritables suppressions. Cela souligne que les conclusions tirées des données de lecture courte doivent être validées par d'autres méthodes comme le séquençage par lecture longue.
Implications de la recherche
Cette recherche a des implications importantes pour comprendre le choléra. Elle indique que les études génétiques basées sur des échantillons de selles peuvent représenter de manière précise les bactéries dans l'intestin grêle pendant une infection active. Les résultats suggèrent également que, bien que certaines diversités génétiques puissent être réduites à mesure que les bactéries traversent l'intestin, cela n'a pas d'impact significatif sur la composition génétique globale.
De plus, l'étude soulève la nécessité de faire preuve de prudence lors de l'analyse des données génétiques pour éviter des interprétations erronées dues à des erreurs de séquençage. À l'avenir, l'utilisation de différentes technologies de séquençage ensemble pourrait fournir des informations plus claires sur la structure génétique de bactéries comme V. cholerae.
Conclusion
Le choléra reste un problème de santé publique majeur, surtout dans les régions à forte incidence d'infection. Comprendre comment V. cholerae fonctionne dans le corps humain peut conduire à de meilleures options de traitement et des stratégies de prévention. Alors que les chercheurs continuent d'étudier la composition génétique de cette bactérie, les connaissances acquises seront cruciales pour lutter contre les épidémies de choléra et sauver des vies.
Titre: Diversity of Vibrio cholerae O1 through the human gastrointestinal tract during cholera
Résumé: Vibrio cholerae O1 causes the diarrheal disease cholera, and the small intestine is the site of active infection. During cholera, cholera toxin is secreted from V. cholerae and induces a massive fluid influx into the small intestine, which causes vomiting and diarrhea. Typically, V. cholerae genomes are sequenced from bacteria passed in stool, but rarely from vomit, a fluid that may more closely represents the site of active infection. We hypothesized that the V. cholerae O1 population bottlenecks along the gastrointestinal tract would result in reduced genetic variation in stool compared to vomit. To test this, we sequenced V. cholerae genomes from ten cholera patients with paired vomit and stool samples. Genetic diversity was low in both vomit and stool, consistent with a single infecting population rather than co-infection with divergent V. cholerae O1 lineages. The number of single nucleotide variants decreased between vomit and stool in four patients, increased in two, and remained unchanged in four. The number of genes encoded in the V. cholerae genome decreased between vomit and stool in eight patients and increased in two. Pangenome analysis of assembled short-read sequencing demonstrated that the toxin-coregulated pilus operon more frequently contained deletions in genomes from vomit compared to stool. However, these deletions were not detected by PCR or long-read sequencing, indicating that interpreting gene presence or absence patterns from short-read data alone may be incomplete. Overall, we found that V. cholerae O1 isolated from stool is genetically similar to V. cholerae recovered from the upper intestinal tract. IMPORTANCEVibrio cholerae O1, the bacterium that causes cholera, is ingested in contaminated food or water and then colonizes the upper small intestine and is excreted in stool. Shed V. cholerae genomes are usually studied, but V. cholerae isolated from vomit may be more representative of where V. cholerae colonizes in the upper intestinal epithelium. V. cholerae may experience bottlenecks, or large reductions in bacterial population sizes or genetic diversity, as it passes through the gut. Passage through the gut may select for distinct V. cholerae mutants that are adapted for survival and gut colonization. We did not find strong evidence for such adaptive mutations, and instead observed that passage through the gut results in modest reductions in V. cholerae genetic diversity, and only in some patients. These results fill a gap in our understanding of the V. cholerae life cycle, transmission, and evolution.
Auteurs: B. Jesse Shapiro, P. Lypaczewski, D. Chac, C. N. Dunmire, K. M. Tandoc, F. Chowdhury, A. I. Khan, T. Bhuiyan, J. B. Harris, R. C. LaRocque, S. B. Calderwood, E. T. Ryan, F. Qadri, A. A. Weil
Dernière mise à jour: 2024-02-08 00:00:00
Langue: English
Source URL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.02.08.579476
Source PDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.02.08.579476.full.pdf
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