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Nouvelle méthode pour créer des gouttelettes compatibles avec les cellules

Une méthode simple pour générer des gouttes de Matrigel pour la culture cellulaire.

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La Microfluidique, c'est un domaine qui s'occupe de la manipulation de très petites quantités de fluides dans des canaux souvent plus fins qu'un cheveu humain. Cette technologie est super importante dans plein de domaines, comme la biologie et la médecine, car elle permet aux scientifiques de créer de minuscules Gouttes qui peuvent contenir des Cellules ou d'autres matériaux. Cet article parle d'une méthode pour créer des gouttes de la taille d'un millimètre en utilisant un gel spécifique appelé Matrigel, qui est utile pour faire pousser des cellules dans des environnements tridimensionnels.

C'est quoi le Matrigel ?

Le Matrigel, c'est un gel fait de protéines qui soutiennent la croissance des cellules. Il contient plusieurs protéines qu'on trouve dans la matrice extracellulaire, le réseau qui entoure les cellules dans le corps. Les chercheurs utilisent souvent le Matrigel parce qu'il fournit un environnement naturel pour les cellules. En faisant des gouttes de Matrigel, les scientifiques peuvent créer des petits espaces qui imitent le comportement des cellules dans les tissus réels.

Le besoin de nouvelles techniques

Avec l'intérêt grandissant pour l'utilisation des gouttes dans les expériences biologiques, il y avait un besoin de méthodes plus simples pour créer ces gouttes. Les méthodes traditionnelles peuvent être compliquées et nécessitent du matériel coûteux que tous les labos n'ont pas. Donc, trouver des moyens plus simples de produire ces gouttes est essentiel pour que plus de chercheurs explorent cette technologie.

Conception du système microfluidique

Dans ce travail, un nouveau système microfluidique a été conçu pour produire des gouttes uniformes de Matrigel. Le système utilise une technique appelée co-flow, où deux fluides coulent côte à côte dans un canal. Un fluide est la phase continue, qui aide à former les gouttes, et l'autre phase est celle qui est dispersée, dans ce cas, Matrigel et Eau.

Deux méthodes principales ont été développées pour créer ces systèmes de gouttes. La première méthode utilisait une découpeuse laser de bureau pour prototyper rapidement des canaux en plastique. Cette approche est rapide et peut être réalisée en environ une demi-heure. Cependant, il y avait quelques problèmes de fuites au niveau des connexions.

Pour résoudre ce problème, une deuxième méthode a été introduite, utilisant le plastique découpé au laser comme moules pour couler un matériau plus durable appelé PDMS. Cela a créé des canaux plus robustes qui pouvaient être utilisés plusieurs fois pour des expériences, et a aidé à minimiser les problèmes de fuites.

Mise en place expérimentale

Les chercheurs ont testé les systèmes nouvellement conçus en utilisant de l'eau et de l'huile pour comprendre comment les gouttes se formaient. Ils ont découvert qu'en changeant les débits des liquides, ils pouvaient contrôler la taille des gouttes générées. Quand le débit d'huile était constant, augmenter le débit d'eau entraînait des gouttes plus petites et plus cohérentes.

En plus d'étudier les gouttes d'eau, l'équipe s'est aussi concentrée sur la génération de gouttes de Matrigel. En ajustant encore les débits, ils pouvaient produire différentes tailles de gouttes de Matrigel, même si celles-ci étaient moins faciles à régler que les gouttes d'eau.

Expériences de culture cellulaire

Une partie importante de la recherche consistait à utiliser les gouttes de Matrigel pour faire pousser des cellules. Des cellules fibroblastes, qui sont importantes pour la cicatrisation des plaies et la réparation des tissus, ont été mélangées avec du Matrigel et ensuite placées dans les gouttes. Ces gouttes ont été collectées et cultivées dans une plaque de culture classique avec un milieu riche en nutriments pour garder les cellules en vie.

Sur plusieurs jours, les chercheurs ont observé comment allaient les cellules dans les gouttes. Ils ont découvert que les cellules restaient viables et montraient des signes de croissance pendant une semaine. Cependant, il y avait des défis pour garder la forme des gouttes intacte en les déplaçant vers les plaques de culture.

Avantages de la nouvelle approche

Le système de microfluidique co-flow présenté dans ce travail offre plusieurs avantages. D'abord, il permet aux chercheurs de créer et de modifier rapidement les designs des gouttes selon leurs besoins spécifiques. Ensuite, utiliser une découpeuse laser de bureau rend cette technologie plus accessible pour de nombreux laboratoires qui n'ont peut-être pas les ressources pour investir dans des systèmes de microfluidique haut de gamme.

En produisant des gouttes plus grandes, cette approche ouvre des opportunités pour l'ingénierie tissulaire et l'étude de structures cellulaires complexes comme les tumeurs. Les scientifiques peuvent explorer comment ces structures se forment et se comportent, ce qui est crucial pour comprendre les maladies et développer des thérapies.

Directions futures

Bien que la recherche ait montré des promesses, il y a des domaines à améliorer. Améliorer les matériaux utilisés pour la production des gouttes pourrait mener à de meilleures performances. Par exemple, utiliser des matériaux plus hydrophobes pourrait empêcher les interactions indésirables entre les gouttes et les parois du canal.

En plus, expérimenter avec les formes et les tailles des tubes utilisés pour délivrer les fluides pourrait aider à améliorer le processus de formation des gouttes. En faisant des ajustements dans ces designs, les chercheurs espèrent mieux contrôler la taille et l'uniformité des gouttes.

Conclusion

En résumé, le développement d'un nouveau système microfluidique pour générer des gouttes de Matrigel de la taille d'un millimètre représente un avancement significatif dans le domaine. Ça simplifie le processus et facilite l'engagement de plus de chercheurs dans des études basées sur les gouttes en culture cellulaire et en ingénierie tissulaire.

En utilisant des outils et matériaux facilement disponibles, cette approche démocratise l'accès à la microfluidique par gouttes, permettant une plus large gamme d'expériences et d'applications. À mesure que les chercheurs affinent ces techniques et s'attaquent aux défis observés, on peut s'attendre à d'autres innovations dans la façon dont les scientifiques étudient les cellules et les tissus, ouvrant la voie à de nouvelles découvertes dans la recherche biomédicale.

Source originale

Titre: Microfluidics Generation of Millimeter-sized Matrigel Droplets

Résumé: Significant progress has been made to increase access to droplet microfluidics for labs with limited microfluidics expertise or fabrication equipment. In particular, using off-the-shelf systems has been a valuable approach. However, the ability to modify a channel design and, thus, the functional characteristics of the system is of great value. In this work, we describe the development of co-flow microfluidics and their fabrication methods for generating uniform millimeter-sized (0.5 - 2 mm) hydrogel droplets. Two complementary approaches based on desktop CO2 laser cutting were developed to prototype and build durable co-flow droplet microfluidics. After demonstrating the co-flow systems, water-in-oil experiments and dimensionless number analysis were used to examine the operational characteristics of the system. Specifically, the Capillary number analysis indicated that millimeter-sized droplet generators operated in the desirable geometry-controlled regime despite their length scales being larger than traditional microfluidics systems. Next, the tunable generation of Matrigel droplets was demonstrated. By adjusting the relative flow rates, the droplet size could be tuned. Finally, we demonstrated fibroblast encapsulation and cell viability for up to 7 days as a proof-of-concept experiment. The systems presented are simple and effective tools to generate robust hydrogel droplets and increase the accessibility of this technology to teaching labs or research settings with limited resources or access to microfluidics.

Auteurs: Cory Arnold, Gabriela Pena Carmona, David A. Quiroz, Chung X. Thai, Brenda A. A. B. Ametepe, I-Hung Khoo, Melinda G. Simon, Perla Ayala, Siavash Ahrar

Dernière mise à jour: 2023-05-30 00:00:00

Langue: English

Source URL: https://arxiv.org/abs/2305.19261

Source PDF: https://arxiv.org/pdf/2305.19261

Licence: https://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0/

Changements: Ce résumé a été créé avec l'aide de l'IA et peut contenir des inexactitudes. Pour obtenir des informations précises, veuillez vous référer aux documents sources originaux dont les liens figurent ici.

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