Kleine Kreaturen, grosse Wirkung: Die Rolle von Mikrobiomen
Mikrobiome in unserem Darm sind wichtig für die Gesundheit und den Erhalt.
Mitra Ghotbi, Jason E. Stajich, Jason Dallas, Alexander Rurik, Chloe Cummins, Lluvia Vargas-Gastélum, Marjan Ghotbi, Joseph W. Spatafora, Kian Kelly, N. Reed Alexander, Kylie C. Moe, Kimberly C. Syring, Leila Shadmani, Julissa Perez-Marron, Donald M. Walker
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Inhaltsverzeichnis
- Wie wir Mikrobiome studieren
- Warum es für den Naturschutz wichtig ist
- Neue Werkzeuge für bessere Daten
- Die Details der Labortechniken
- Vergleich von relativer und absoluter Häufigkeit
- Die Rolle von Basidiobolus in mikrobiellen Netzwerken
- Ein besseres Verständnis mikrobieller Interaktionen aufbauen
- Originalquelle
Die winzigen Kreaturen, die in unseren Därmen leben und Mikrobiome genannt werden, sind ein grosses Thema in der Wissenschaft. Die sind nicht nur Daheimgeher; sie spielen eine entscheidende Rolle, wie unsere Körper funktionieren. Sie helfen beim Stoffwechsel, unterstützen unser Immunsystem und helfen uns sogar, uns zu erholen, wenn's mal schiefgeht.
Im Mittelpunkt dieser Studien steht etwas, das wir das Kernmikrobiom nennen. Stell dir das wie eine unterstützende Gruppe von Freunden vor, die immer für dich da sind. Das sind spezifische Arten von Mikroben, die in ähnlichen Umgebungen oder Arten immer wieder auftauchen. Wissenschaftler schauen sich diese Kern-Gemeinschaften an, um herauszufinden, wie ein "gesundes" Mikrobiom aussieht.
Eine Wendung in dieser Geschichte kommt von der Idee der Schlüsselsteuermikroben. Denk daran wie die Stars der mikrobiellen Welt. Auch wenn es nicht viele sind, haben sie einen riesigen Einfluss auf die Umgebung um sie herum. Wenn wir eine Schlüsselart verlieren, kann das eine Kettenreaktion von Veränderungen auslösen, die das Gleichgewicht des gesamten Ökosystems stören könnte.
Eine dieser bemerkenswerten Mikroben ist Basidiobolus, eine Art von Pilz. Man findet ihn in den Därmen von Reptilien und Amphibien, die wir Wissenschaftler gerne Herpetofauna nennen. Basidiobolus hat ein einzigartiges Talent, Gene von benachbarten Bakterien zu stehlen, was es ihm erlaubt, sich anzupassen und in seiner Umgebung zu gedeihen. Das macht ihn zu einem perfekten Kandidaten, um die Beziehungen zwischen Bakterien und Pilzen in den Därmen dieser Tiere zu studieren.
Wie wir Mikrobiome studieren
Um diese Mikrobiome zu untersuchen, nutzen Forscher oft hochentwickelte Techniken. Sie verwenden möglicherweise Hochdurchsatz-Sequenzierung und Multi-Omics-Ansätze, die kompliziert klingen, aber im Grunde Wege sind, alle winzigen Mikroben und ihre Interaktionen mit ihrem Wirt zu analysieren. Das hilft Wissenschaftlern zu verstehen, wie Veränderungen im Mikrobiom die Gesundheit des Wirts beeinflussen können.
Aber es gibt einen Haken. Die Daten, die wir sammeln, können schwer zu interpretieren sein, da sie normalerweise die relative Häufigkeit (RA) zeigen, was bedeutet, dass wir nur betrachten, wie viel von jeder Mikrobenart im Vergleich zur Gesamtzahl vorhanden ist. Das Problem ist, dass, wenn eine Art von Mikroben zunimmt, die anderen anscheinend in ihrer Bedeutung schwächer werden, was zu einigen irreführenden Schlussfolgerungen führen kann.
Um dem entgegenzuwirken, haben Wissenschaftler verschiedene analytische Werkzeuge entwickelt, um die Daten besser zu erfassen. Diese Werkzeuge können Verzerrungen anpassen, die entstehen, wenn man nur die relative Häufigkeit betrachtet. Das Ziel ist es, ein klareres Bild der mikrobiellen Gemeinschaft und ihrer Interaktionen mit ihrem Wirt zu bekommen.
Im Labor verwenden Forscher auch Techniken wie Durchflusszytometrie und digitale Tropfen-PCR, um die tatsächlichen Mengen an Mikroben zu zählen, die vorhanden sind, was ihnen hilft, ein besseres Verständnis darüber zu bekommen, was im Mikrobiom vor sich geht. Allerdings können diese Methoden arbeitsintensiv und für grossangelegte Studien nicht so praktikabel sein.
Ein bemerkenswerter Trick ist die Verwendung von "Spike-ins". Das sind externe, bekannte Mengen von Mikroben, die zu den Proben hinzugefügt werden, was den Forschern hilft, ein besseres Verständnis über die absolute Häufigkeit (AA) der Mikroben zu bekommen. Durch das Messen der Spike-ins im Vergleich zur gesamten mikrobiellen Gemeinschaft können Wissenschaftler relative Zahlen in absolute umwandeln, was zu zuverlässigeren Ergebnissen führt.
Warum es für den Naturschutz wichtig ist
Leider sind viele Arten von Amphibien und Reptilien vom Aussterben bedroht. Alarmierenderweise sind derzeit etwa 40,7% der Amphibien und 21,1% der Reptilien bedroht. Hier kommen Mikrobiom-Studien ins Spiel und können einen Unterschied machen. Das Studium der Darmmikrobiome dieser Tiere kann uns helfen, ihre Gesundheit und Widerstandsfähigkeit zu verstehen, was wichtig für Naturschutzbemühungen ist.
Indem sie Muster in diesen Mikrobiomen aufdecken, können Wissenschaftler herausfinden, was schiefgeht, wenn Kreaturen Dysbiose erleben – eine schicke Art zu sagen, dass ihre mikrobiellen Gemeinschaften aus dem Gleichgewicht geraten sind. Dieses Wissen kann uns helfen, gezielte Strategien zu entwickeln, um die Biodiversität unseres Planeten zu erhalten.
Neue Werkzeuge für bessere Daten
Während absolute Häufigkeitsmessungen entscheidend sind, haben Forscher oft Schwierigkeiten, die Daten zur relativen Häufigkeit in sinnvolle Einblicke umzuwandeln. Um dieses Problem zu lösen, wurde ein neues Werkzeug namens DspikeIn entwickelt. Dieses Tool bringt ein Protokoll für das Labor und ein begleitendes R-Paket mit, um eine einfache Möglichkeit zu bieten, die absolute Häufigkeit aus mikrobiellen Proben zu quantifizieren.
Mit DspikeIn können Wissenschaftler Kerngruppen und Schlüsselsteuermikroben in Mikrobiomen identifizieren, was die Genauigkeit der Interpretationen über diese mikrobiellen Gemeinschaften verbessert. Das Tool untersucht auch, wie Basidiobolus als Kernelement in den Darmmikrobiomen von Reptilien und Amphibien wirkt.
Um sicherzustellen, dass der DspikeIn-Ansatz effektiv funktioniert, haben die Forscher drei Hauptideen getestet:
- Die Erfolgsquote beim Abrufen der gespickten Arten sollte je nach dem spezifischen System, das untersucht wird, variieren.
- Biologische Interpretationen, die aus Daten zur relativen Häufigkeit abgeleitet werden, könnten irreführend sein aufgrund der Einschränkungen der Daten selbst.
- Basidiobolus spielt als Kernmitglied des Darmmikrobioms eine bedeutende Rolle bei der Aufrechterhaltung der Stabilität des Mikrobioms durch seine Interaktionen mit anderen Mikroben.
Die Details der Labortechniken
Um ihren Ansatz zu validieren, verbrachten die Forscher Zeit mit der Entwicklung eines Spike-in-Protokolls, das zwei spezifische Mikroben verwendete: Tetragenococcus halophilus (ein Bakterium) und Dekkera bruxellensis (ein Pilz). Zuerst züchteten sie diese Mikroben im Labor, um Stammlösungen zu erstellen. Dann verdünnten sie diese Kulturen auf verschiedene Konzentrationen und extrahierten DNA zur Prüfung.
Das Ziel war es, die geeigneten Mengen zu finden, die zu den Proben des Darmmikrobioms hinzugefügt werden sollten. Proben von Laubfröschen wurden mit und ohne die Spike-in-Mikroben verarbeitet, was es den Wissenschaftlern ermöglichte, den Anstieg spezifischer Mikroben basierend auf der hinzugefügten Menge zu quantifizieren.
Nach der Sequenzierung der Proben nutzte das Team bioinformatische Werkzeuge, um die Daten zu analysieren und ihre Spike-in-Methode zu validieren. Das Hauptziel war sicherzustellen, dass sie die Mikroben, die vorhanden sind, genau identifizieren und quantifizieren konnten, um letztlich die Genauigkeit ihrer Ergebnisse zu verbessern.
Vergleich von relativer und absoluter Häufigkeit
Ein grosses Bemühen bestand darin, die relative Häufigkeit mit der absoluten Häufigkeit zu vergleichen. Die Forscher sammelten mikrobielle Proben von verschiedenen Arten von Salamandern, Fröschen und Eidechsen, um einen robusten Datensatz zu erstellen. Sie wollten sehen, wie das Kernmikrobiom-die wesentlichen Teile der mikrobiellen Gemeinschaft-aussah, wenn man es sowohl mit relativen als auch absoluten Methoden betrachtete.
Mit DspikeIn konnten die Forscher Variationen in der mikrobiellen Zusammensetzung über verschiedene Arten und Umgebungen hinweg effektiv erfassen. Sie fanden heraus, dass die Messung der absoluten Häufigkeit klarere Einblicke in die beteiligten mikrobiellen Gemeinschaften und ihre Beziehungen zur natürlichen Geschichte des Wirts lieferte.
Beispielsweise zeigte die Analyse, dass Lactococcus und Cetobacterium durchweg bei verschiedenen Herpetofaunaen vertreten waren. Wenn man sie jedoch nur durch die Brille der relativen Häufigkeit betrachtete, könnten diese wichtigen Taxa in den Hintergrund gedrängt oder falsch dargestellt worden sein.
Die Forscher verwendeten auch statistische Modelle, um tiefer in die unterschiedlichen Häufigkeiten einzutauchen, was ihnen half, signifikante Unterschiede in den mikrobiellen Gemeinschaften zwischen den Arten zu identifizieren. Die Ergebnisse deuteten darauf hin, dass absolute Häufigkeitsmessungen eine effektivere Möglichkeit sind, die Komplexität und Dynamik dieser Ökosysteme zu erfassen.
Die Rolle von Basidiobolus in mikrobiellen Netzwerken
Basidiobolus ist kein gewöhnlicher Pilz-er spielt eine bedeutende Rolle im Darmmikrobiom von Herpetofauna. Seine Fähigkeit, sich mit anderen Mikroben zu verbinden und zu interagieren, verbessert die Stabilität und Funktionalität der gesamten mikrobiellen Gemeinschaft.
Als die Forscher in das Netzwerk mikrobieller Verbindungen eintauchten, fanden sie heraus, dass Basidiobolus enge Beziehungen zu verschiedenen Bakterien hatte, was auf mögliche mutualistische Beziehungen hindeutet. Diese Interaktionen sind wahrscheinlich entscheidend für die Darmgesundheit und tragen zur Verdauung und zur Aufrechterhaltung einer ausgewogenen mikrobiellen Gemeinschaft bei.
Interessanterweise schien die Stabilität des mikrobiellen Netzwerks von der Anwesenheit von Basidiobolus abzuhängen. Als die Forscher ihn aus dem Netzwerk ausschlossen, bemerkten sie eine Zunahme negativer Interaktionen zwischen Mikroben, was seine Rolle als Verbindungsglied zwischen den Arten verdeutlicht.
Ein besseres Verständnis mikrobieller Interaktionen aufbauen
Die Arbeit mit DspikeIn und die daraus gewonnenen Erkenntnisse über das Kernmikrobiom und Schlüsselsteuermikroben ebnen den Weg für ein besseres Verständnis davon, wie diese winzigen Kreaturen ihre grösseren Wirte unterstützen. Es geht nicht nur darum, die Anzahl der Mikroben zu zählen, sondern ihre Rollen, Beziehungen und Beiträge zur allgemeinen Gesundheit ihrer Umgebung zu verstehen.
Durch die genaue Messung der absoluten Häufigkeit und der Interaktionen zwischen verschiedenen Mikroben können Wissenschaftler ein klareres Bild von den ökologischen Rollen, die diese Gemeinschaften spielen, zeichnen. Dieses Wissen ist entscheidend, nicht nur für Naturschutzbemühungen, sondern auch für das Verständnis, wie Darmmikrobiome zur Gesundheit und Widerstandsfähigkeit von Tieren beitragen.
Letztendlich zeigt der Ansatz, wie wichtig mikrobielle Gemeinschaften sowohl für ihre Wirte als auch für die Ökosysteme, die sie bewohnen, sind. Mit Werkzeugen wie DspikeIn können Wissenschaftler das Rätsel dieser winzigen Bewohner entwirren, was zu Entdeckungen führen könnte, die die Biodiversität und die Naturschutzstrategien über Jahre hinweg beeinflussen könnten.
Zusammenfassend lässt sich sagen, dass unser Darm mehr ist als nur ein Lebensmittelprozessor; es ist ein pulsierendes Ökosystem für sich. Das Verständnis dieser kleinen Akteure könnte uns zu grossen Antworten für Gesundheit und Naturschutz führen. Also, das nächste Mal, wenn du darüber nachdenkst, was in deinem Bauch vorgeht, denk dran: Es ist viel komplizierter als nur das Frühstück!
Titel: Absolute abundance unveils Basidiobolus as a cross-domain bridge indirectly bolstering gut microbiome homeostasis
Zusammenfassung: The host microbiome is integral to metabolism, immune function, and resilience against pathogens. However, reliance on relative abundance (RA) to estimate host-associated microbiomes introduces compositional biases, while limited tools for absolute abundance (AA) quantification hinder broader applications. To address these challenges, we developed DspikeIn (https://github.com/mghotbi/DspikeIn), an R package paired with a versatile wet-lab methodology for AA quantification. Using RA and AA to compare core microbiome distributions across herpetofauna orders and their natural histories revealed starkly distinct results, driven by aggregate effects, including inherited compositional biases in RA and additional multifactorial influences. Focusing on two closely related Desmognathus species demonstrated that AA quantification enhanced resolution in differential abundance analyses and minimized false discovery rates (FDR) when identifying enriched taxa in their gut microbiomes. Keystone taxa identified through network associations also differed between RA and AA data. For example, Lactococcus and Cetobacterium were core members in Anura and Caudata, while Basidiobolus and Mortierella were core to Chelonia and Squamata, facilitating host adaptation to diverse environments, insights undetectable with RA data. AA-based network analysis further revealed that removing the Basidiobolus subnetwork increased negative interactions, highlighting its role in promoting gut homeostasis through cross-domain connectivity. Despite low redundancy, the Basidiobolus node exhibited high betweenness, efficiency, and degree, serving as a critical bridge linking disconnected nodes or modules and indirectly supporting microbiome stability, consistent with Burts structural hole theory. DspikeIn represents a transformative tool for microbiome research, enabling the transition from RA to AA quantification and delivering more accurate, consistent, and comparable results across studies. Graphical abstract DspikeIn cheatsheet O_FIG O_LINKSMALLFIG WIDTH=200 HEIGHT=156 SRC="FIGDIR/small/630554v1_ufig1.gif" ALT="Figure 1"> View larger version (65K): org.highwire.dtl.DTLVardef@150900forg.highwire.dtl.DTLVardef@21cd90org.highwire.dtl.DTLVardef@13ead1borg.highwire.dtl.DTLVardef@1d6fa84_HPS_FORMAT_FIGEXP M_FIG C_FIG
Autoren: Mitra Ghotbi, Jason E. Stajich, Jason Dallas, Alexander Rurik, Chloe Cummins, Lluvia Vargas-Gastélum, Marjan Ghotbi, Joseph W. Spatafora, Kian Kelly, N. Reed Alexander, Kylie C. Moe, Kimberly C. Syring, Leila Shadmani, Julissa Perez-Marron, Donald M. Walker
Letzte Aktualisierung: Dec 28, 2024
Sprache: English
Quell-URL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.12.27.630554
Quell-PDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.12.27.630554.full.pdf
Lizenz: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
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