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Composto Natural Mostra Potencial Contra Bactérias Resistentes a Medicamentos

Pesquisas mostram que o ácido protocatecuico pode ajudar a combater infecções resistentes de Klebsiella pneumoniae.

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Klebsiella Pneumoniae é um tipo de bactéria que pode ser encontrada em várias partes do corpo, como a pele, os pulmões e o sistema digestivo. Ela também tá presente no meio ambiente. Essa bactéria pode causar sérios problemas de saúde, especialmente em pessoas com o sistema imunológico fraco. Algumas das doenças que ela pode causar incluem pneumonia, infecções no sangue, infecções do trato urinário e meningite.

Essa bactéria pode ser passada de animais pra humanos por meio da comida ou pelo contato direto, o que é uma preocupação tanto para a saúde pública quanto para a agricultura. Infelizmente, a Klebsiella pneumoniae se tornou resistente a muitos Antibióticos por causa do uso excessivo deles. Essa resistência, especialmente a um grupo de antibióticos poderosos chamados carbapenems, torna o tratamento das infecções bem desafiador.

Recentemente, um tipo novo e perigoso de Klebsiella pneumoniae foi identificado. Esse tipo não só resiste aos carbapenems, mas também é muito virulento, ou seja, pode causar doenças mais graves. Esse tipo de bactéria agora é visto como uma ameaça séria à saúde pública.

A Necessidade de Novos Tratamentos

Devido ao problema crescente da resistência a antibióticos, há uma necessidade urgente de encontrar novos tratamentos pra lidar com infecções causadas por essa bactéria resistente. Uma área promissora envolve o uso de substâncias naturais encontradas em plantas como agentes antibacterianos.

Os compostos naturais das plantas podem ser seguros e eficazes, além de geralmente terem menos efeitos colaterais em comparação com os antibióticos tradicionais. Alguns desses compostos naturais incluem flavonoides, ácidos fenólicos, taninos e antocianinas. Essas substâncias podem impactar as bactérias de várias maneiras, como danificando suas membranas celulares e interrompendo a produção de energia.

Apresentando o Ácido Protocatecuico

Um desses compostos é o ácido protocatecuico (PCA). Esse é um ácido fenólico que pode ser encontrado em várias frutas e vegetais, como amoras, morangos e chá. O PCA é conhecido por seus muitos benefícios à saúde, incluindo redução da inflamação e combate ao câncer. Ele também mostra algumas características antibacterianas e pode inibir o crescimento de vários tipos de bactérias.

O PCA demonstrou parar a formação de biofilme na Klebsiella pneumoniae, o que significa que pode impedir que as bactérias grudem umas nas outras e formem camadas protetoras que as tornam mais difíceis de matar. No entanto, a eficácia do PCA contra os tipos mais resistentes de Klebsiella pneumoniae e como ele funciona ainda não é completamente compreendida.

O Foco do Estudo

Esse estudo analisou como o PCA afeta o crescimento e o comportamento da Klebsiella pneumoniae. O objetivo era ver se o PCA poderia interromper as funções normais dessa bactéria e trabalhar em conjunto com antibióticos para eliminar essas infecções resistentes.

Os pesquisadores usaram duas cepas de Klebsiella pneumoniae resistentes a carbapenemos. Eles verificaram como o PCA afetou a capacidade das bactérias de crescer e sobreviver em diferentes condições. Eles também analisaram como o PCA interage com funções-chave das bactérias, como formação de biofilme e estabilidade da membrana celular.

Testando as Propriedades Antibacterianas do PCA

Os pesquisadores testaram diferentes concentrações de PCA pra descobrir como ele impacta o crescimento das bactérias. Eles mediram a menor quantidade de PCA necessária pra parar o crescimento das bactérias, chamada de concentração inibitória mínima (CIM). Eles descobriram que o PCA poderia inibir significativamente o crescimento das bactérias em concentrações mais baixas.

Pra ver como o PCA funcionava ao longo do tempo, eles mediram o crescimento bacteriano em vários momentos depois do tratamento. Os resultados mostraram que concentrações mais altas de PCA levaram a uma maior redução no crescimento bacteriano.

Eles também usaram um método de coloração especial pra observar a estrutura das bactérias. Os resultados indicaram que o PCA causou danos ao DNA das bactérias, já que a fluorescência (ou brilho) indicou irregularidades que mostraram a integridade do DNA comprometida.

Avaliando a Segurança

Pra avaliar a segurança do PCA em tecidos humanos, os cientistas realizaram um teste de hemólise. Esse teste determina como o PCA afeta as células vermelhas do sangue. Eles descobriram que o PCA parece ser seguro nas concentrações eficazes contra as bactérias, já que não prejudicou as células vermelhas.

Avaliando o Desenvolvimento de Resistência

O estudo testou ainda se a Klebsiella pneumoniae desenvolveria resistência ao PCA com o tempo. Eles descobriram que, ao contrário dos antibióticos tradicionais que muitas vezes levam à resistência, o PCA não parecia induzir resistência significativa nas bactérias após várias gerações de exposição.

Efeitos Sinérgicos com Antibióticos

Como o PCA mostrou potencial como agente antibacteriano, os pesquisadores também investigaram se o PCA poderia aumentar a eficácia dos antibióticos existentes, especialmente o meropenem. Os resultados indicaram que o PCA poderia diminuir significativamente a CIM para o meropenem, sugerindo um forte efeito sinérgico quando as duas substâncias eram usadas juntas.

Inibição da Formação de Biofilme

Os Biofilmes bacterianos são camadas espessas de bactérias que grudam em superfícies, tornando difícil o tratamento. O estudo avaliou como o PCA impactou a formação de biofilmes na Klebsiella pneumoniae. Usando testes específicos, eles determinaram que o PCA reduziu significativamente a capacidade das bactérias de formar biofilmes.

Por meio de uma série de testes adicionais, os pesquisadores descobriram que o PCA causou níveis mais baixos de substâncias poliméricas extracelulares (as substâncias açucaradas que compõem os biofilmes). Essa redução indica que o PCA pode interferir em como as bactérias grudam.

Efeitos na Membrana Bacteriana

A membrana celular bacteriana é crucial pra sua sobrevivência e funcionamento. O PCA foi encontrado alterando a estrutura da membrana celular das bactérias, tornando-a áspera e irregular. Essa mudança estrutural pode aumentar a permeabilidade da membrana, permitindo que mais substâncias entrem ou saiam das bactérias.

Os pesquisadores testaram o impacto do PCA nas membranas interna e externa. Eles descobriram que o PCA aumentou a permeabilidade de ambas as membranas, indicando que a barreira protetora da bactéria estava comprometida. Essa mudança pode afetar como as bactérias funcionam e como elas respondem aos tratamentos.

Impacto no Metabolismo

O PCA não só afeta a estrutura, mas também o metabolismo da Klebsiella pneumoniae. Os processos metabólicos são importantes pra produção de energia e função geral das bactérias. Após tratar as bactérias com PCA, os pesquisadores encontraram mudanças em caminhos metabólicos importantes.

O estudo destacou mudanças significativas em dois caminhos metabólicos principais: a via das pentoses fosfato (PPP) e a glicólise. Ambas as vias são críticas pra gerar energia e outras substâncias necessárias.

O tratamento com PCA reduziu a atividade de enzimas críticas nessas vias. Essa redução leva a um desequilíbrio no estado redox das bactérias, que é essencial pra uma função celular adequada. Quando o equilíbrio é perturbado, as bactérias podem se tornar mais suscetíveis ao estresse oxidativo, ou seja, ficam mais vulneráveis a danos de espécies reativas de oxigênio (ROS).

Induzindo Estresse Oxidativo

A via das pentoses fosfato é vital pra produzir NADPH, uma molécula que ajuda a combater o estresse oxidativo. O estudo descobriu que o tratamento com PCA reduziu os níveis de NADPH na Klebsiella pneumoniae, tornando as bactérias mais propensas a danos por ROS.

Como resultado, os pesquisadores observaram um aumento nos níveis de ROS e um aumento no malondialdeído (MDA), que indica dano oxidativo dentro das células bacterianas. Quanto mais danos as bactérias sofrerem, menos provável será que elas sobrevivam e se reproduzam.

Além disso, o tratamento com PCA causou uma diminuição nos níveis de ATP intracelular. O ATP é a moeda de energia da célula, e níveis mais baixos indicam que as bactérias estão tendo dificuldades pra manter suas funções essenciais.

Conclusão

Esse estudo sugere que o ácido protocatecuico (PCA) é um candidato promissor na luta contra a Klebsiella pneumoniae resistente a medicamentos. O PCA não só inibe o crescimento dessa bactéria persistente, mas também mostra potencial pra aumentar os efeitos dos antibióticos existentes.

A capacidade do PCA de interromper a formação de biofilmes e alterar a membrana celular e os processos metabólicos das bactérias pode oferecer novas estratégias pra tratar infecções que se tornaram desafiadoras devido à resistência a antibióticos.

Com as crescentes preocupações sobre bactérias resistentes a medicamentos, o uso de compostos naturais como o PCA pode abrir caminho para tratamentos mais seguros e eficazes. A pesquisa contínua em agentes antibacterianos naturais continua sendo crítica pra enfrentar os desafios em evolução na gestão de doenças infecciosas.

À medida que os cientistas aprendem mais sobre o PCA e seus mecanismos de ação, há esperança no desenvolvimento de novas terapias que possam combater com sucesso as bactérias resistentes a antibióticos e melhorar os resultados dos pacientes.

Fonte original

Título: Protocatechuic acid induces endogenous oxidative stress in CR-hvKP by regulating the EMP-PPP pathway

Resumo: BackgroundKlebsiella pneumoniae is an important opportunistic pathogen and zoonotic pathogen. The widespread use of antibiotics has led to the emergence of a large number of multidrug-resistant Klebsiella pneumoniae in clinical animal husbandry, posing a serious threat to global health security. Protocatechuic acid (PCA) is a phenolic acid substance naturally present in many vegetables and fruits. It is a safe and highly developed new type of antibacterial synergist. PurposeThis study explored the antibacterial and synergistic mechanisms of PCA against Carbapenem-resistant hypervirulent Klebsiella pneumoniae. Study designMetabolomic analysis using PCA to investigate the metabolic effects of CR-hvKP and further explore the antibacterial mechanisms resulting from this metabolic regulation. MethodsThe MIC of PCA was measured by microdilution, and its bactericidal effect was observed by DAPI staining. Resistance and hemolysis tests were performed to ensure safety. The synergy of PCA and meropenem was tested by checkerboard assay. The biofilm inhibition was assessed by crystal violet and EPS assays. The membrane morphology, permeability, and potential were examined by SEM, PI, NPN, and DiSC3(5). The metabolic changes were evaluated by AlamarBlue, metabolomics, enzyme activity, ELISA, molecular docking, and qRT-PCR. The oxidative stress and metabolic disorders were verified by NADP(H), ROS, MDA, and ATP assays. ResultsThe results showed that PCA can synergize with antibiotics and inhibit the biofilm and membrane functions of CR-hvKP at low concentrations. Metabolomics revealed that PCA affects the EMP and PPP pathways of CR-hvKP, causing oxidative stress. This involves the binding of PGAM and the downregulation of BPGM, leading to the accumulation of glycerate-3P. This results in the inhibition of G6PDH and the imbalance of NADPH/NADP+, disrupting the energy metabolism and increasing the oxidative stress, which impair the biofilm and membrane functions and enhance the antibiotic efficacy. ConclusionThe results demonstrate that PCA regulates the EMP-linked PPP pathway of CR-hvKP, inhibits biofilm and membrane functions, and synergizes with antibiotics to kill bacteria, providing new insights and candidates for natural antibacterial enhancers. Author SummaryKlebsiella pneumoniae is a common pathogenic bacterium that can infect both humans and animals, causing serious diseases such as pneumonia, meningitis, and sepsis. Due to the overuse of antibiotics, this bacterium has developed resistance to many drugs, posing a significant threat to global health security. Through our research, we have discovered a natural substance called protocatechuic acid (PCA) that can enhance the effectiveness of antibiotics against this bacterium. PCA is found in many vegetables and fruits and is a safe and non-toxic antibacterial adjuvant. Our analysis of the metabolomics of PCA on Klebsiella pneumoniae has revealed its antibacterial and synergistic mechanisms. The study found that PCA can affect the bacteriums sugar metabolism pathway, leading to the generation of endogenous oxidative stress. This disrupts their energy metabolism, damages their cell membranes and biofilms, making them more susceptible to being killed by antibiotics. Through this mechanism, PCA can synergize with common antibiotics such as meropenem, enhancing their bactericidal ability. Our research has demonstrated that PCA is an effective antibacterial adjuvant, providing new candidates and insights for the development of natural antibacterial agents. Graphical abstract O_FIG O_LINKSMALLFIG WIDTH=200 HEIGHT=104 SRC="FIGDIR/small/583678v1_ufig1.gif" ALT="Figure 1"> View larger version (27K): [email protected]@9f3c51org.highwire.dtl.DTLVardef@3125a8org.highwire.dtl.DTLVardef@9f39b7_HPS_FORMAT_FIGEXP M_FIG C_FIG

Autores: Hong-Bin Si, Y. Zhong, Y. Cheng, S. Xing, X. Zhang, S. Luo, X. Shi, Y. He, H. Liu, M. Yang

Última atualização: 2024-03-07 00:00:00

Idioma: English

Fonte URL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.03.06.583678

Fonte PDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.03.06.583678.full.pdf

Licença: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/

Alterações: Este resumo foi elaborado com a assistência da AI e pode conter imprecisões. Para obter informações exactas, consulte os documentos originais ligados aqui.

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