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新しい方法が豚のアフリカ豚熱を検出するよ

新しいアプローチで豚のASFの検出が改善され、アウトブレイクの管理に役立つ。

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目次

グローバリゼーションが動物病の世界中への広がりを加速させてるよ。特に気になるのは、国境を越える動物病(TADs)で、これは家畜や肉産業に大きな経済的損害をもたらす可能性があるんだ。この問題を解決するには、これらの病気を正確かつ敏感に検出することがめっちゃ重要。でも今の検出方法は複雑であんまり効果的じゃないんだよね。

アフリカ豚熱の概要

アフリカ豚熱(ASF)は今、一番心配な病気の一つ。今はアフリカ、ユーラシア、カリブ海、オセアニアの一部で広がってる。ASFが日本やアメリカ、オーストラリアみたいなクリーンな地域に到達するんじゃないかっていう心配も高まってる。これは家畜と野生の豚に感染するウイルスが原因で、高熱や出血といった重い症状を引き起こし、残念ながら死に至ることが多い。

この病気はサハラ以南のアフリカではほぼ抑えられてたけど、2007年にジョージアでアウトブレイクが起きてから広がり始めて、最終的には豚の最大生産国である中国にも到達した。影響を受けた地域の家畜産業や食料安全保障への打撃はすごく深刻だよ。

病原体の排出

豚がASFウイルスに感染すると、血液や臓器だけでなく、口腔液、鼻の分泌物、糞便、尿からもウイルスを放出することができるんだ。口腔液は集めやすくて安価だから、豚の足り出し病や豚インフルエンザの検査にも使われてるけど、口腔液を使う大きな問題は、これらの液体のウイルス濃度が血液よりも通常低いから、偽陰性の結果が出ることがあるんだよね。

検出方法の改善

ウイルスの検出を改善するために特別なビーズを使う方法があるんだけど、この方法は感度が高いけど、各ウイルスごとに特定の抗体を作る必要があって、時間とお金がかかるんだ。そこで、新しい方法が開発されて人間の唾液中のSARS-CoV-2ウイルスを検出することができるようになった。この方法はもっと早くてシンプルで、より敏感な結果を出せるんだ。

この新しいアプローチは、口腔液の成分を分解して、特別な溶液と遠心分離を使ってウイルスを濃縮するんだ。この研究の目的は、同じ方法で豚の口腔液中のASFを効果的に検出できるかを試すこと。

口腔液のサンプリング

この研究のために、68個の豚の口腔液サンプルを集めたんだけど、大半は北ベトナムから。いくつかはコントロール用に日本からも集めたよ。豚には30分間コットンロープを噛ませて、その口腔液を集めて、サンプルを試験用のラボに持っていった。

テストが始まると、集めたサンプルを解凍して、テストする前にゴミを取り除くために洗浄したよ。そして新しい方法と標準的な方法の両方でテストした。

ASFの検査

新しい方法がどれだけ効果的かを確認するために、研究者たちは集めたサンプルのASF検出に関して従来の方法と比較したんだ。口腔液から遺伝子材料を抽出して、リアルタイムPCRとLAMPの2つの主要な方法でテストした。

テストの結果、新しい方法は従来の方法と比べてASFをより多くのサンプルで検出できたんだ。研究は、新しい方法がサンプル内のウイルスの少ない量をどれだけ敏感に検出できるかを判断するために進められたよ。

検出の限界

研究者たちは新しい方法が、従来の方法より約1000倍感度が高いことを発見した。いろんなテストを行ったけど、従来の方法はポジティブな結果を確認できないことが多かったのに、新しいアプローチではもっと明確な判定ができたから、多くのサンプルが新しい技術で陽性反応を示したんだ。

結果のまとめ

テストしたサンプルの中で、従来の方法は新しい方法に比べて陽性ケースが少なかった。これは重要で、新しい方法はウイルスのレベルが低い時でも信頼性のある結果を示せたから。結果は、ASFウイルスを早期に検出することが、アウトブレイク管理に役立つことを証明したんだ。

リアルタイムPCRテストに加えて、LAMP法も試されて、感度は低かったけど新しい方法は早い診断の可能性を示したよ。

早期検出の重要性

アウトブレイクが起こる前にASFウイルスを検出することがめっちゃ重要。あるケースでは、研究者たちは豚に明らかな症状が出る前にサンプルからウイルスを見つけることができたんだ。こういう早期検出は、農家が自分の群れを管理するのを助けたり、他の農場への病気の広がりを防ぐのに役立つよ。

制限と今後の方向性

新しい方法は有望だけど、いくつかの制限もある。プロセスは少し複雑で、ラボの手順で汚染のリスクがあるんだ。信頼性を確保するために、今後の研究が必要なんだよね。

また、研究者たちはこの方法を口蹄疫や狂犬病、家畜に影響を与える他の感染症を検出するために適応できるかどうかも調べてるみたい。

結論

豚の口腔液中のASFウイルスを濃縮するためのこの新しい方法の開発は、従来の検出方法に対する大きな改善を示してる。これにより、ウイルスの早期かつ正確な検出が可能になって、アウトブレイクの管理に大きく役立つ可能性がある。この進展は、世界中の動物健康管理にとってゲームチェンジャーになるかもしれないし、多くの地域で家畜と食料安全保障がかかってるから、特に重要なんだ。

オリジナルソース

タイトル: Development of a simple and highly sensitive method for the concentration and detection of African swine fever virus in oral fluids and its feasibility assessment on raised pigs in Northern Vietnam

概要: BackgroundEarly detection and early slaughter through quarantine are essential to prevent the spread of the African swine fever virus (ASFV). Highly accurate testing is effective for early detection, but it is still difficult to establish a system, especially in the Global South. Pooled oral fluids tests have been used for simple pathogen monitoring, but compared to blood tests, the virus concentration in oral fluids is low, resulting in false negative and missing true positive cases. We collected oral fluids from raised pigs in northern Vietnam and attempted a highly sensitive ASFV survey using a newly developed virus concentration and detection method. ResultsIn a spike test, the developed method showed up to 100 times greater sensitivity than a reference method. To compare and evaluate the performance of the developed method, a total of 68 pooled oral fluid samples were collected, 63 from northern Vietnam and 5 from southern Japan. Using real-time PCR, 9/68 (13.2%) were positive by the reference method, and 23/68 (33.8%) by the developed method. Using real-time LAMP, 1/68 (1.5%) were positive by the reference method and 6/68 (8.8%) by the developed method. ConclusionsThe developed method improved the sensitivity of ASFV detection from oral fluids and enabled early diagnosis of pigs before the onset of the disease. The developed method has the potential to enable simple and highly sensitive diagnosis of ASF, which is essential for its early diagnosis and effective surveillance. HighlightO_LIA method has been developed to detect ASFV in pig oral fluids with up to 100 times greater sensitivity than a reference method. C_LIO_LIThe developed method combines innovative pretreatment in less than 60 min with conventional nucleic acid extraction with a column kit followed by real-time PCR or LAMP. C_LIO_LIApplied to feasibility assessment for ASF diagnosis on raised pigs, the developed method showed higher diagnostic sensitivity than the reference method. C_LIO_LIThe developed method can be a useful tool that contributes to early detection and surveillance of ASFV. C_LI

著者: Wataru Yamazaki, N. Mai Thi, G. Tran Thi Huong, H. Dong Van, P. Le Van, L. Huynh Thi My, D. Bui Tran Anh, R. Uemura, L. Nguyen Thi

最終更新: 2024-01-14 00:00:00

言語: English

ソースURL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.01.13.575502

ソースPDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.01.13.575502.full.pdf

ライセンス: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/

変更点: この要約はAIの助けを借りて作成されており、不正確な場合があります。正確な情報については、ここにリンクされている元のソース文書を参照してください。

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