呼吸チューブにおけるバイオフィルムの課題
研究によると、バイオフィルムの抵抗性が人工呼吸器を使っている患者の肺感染症の治療を複雑にしてるんだって。
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バイオフィルムは小さな生き物の集まりで、くっついて通常は表面に付着してるんだ。自分たちの材料で作られた保護層に囲まれてる。バイオフィルムは色んな場所にできて、医療機器、特に呼吸チューブなんかにもできるんだ。このチューブにバイオフィルムが形成されると、抗生物質みたいな治療で中のバイ菌を殺すのがめっちゃ難しくなる。保護層が薬がバイ菌に届くのを妨げるし、薬なしでも生き残れる強いバイ菌もいるし、バイ菌同士が治療に抵抗する情報を交換することもあるんだ。
医療機器に関連した感染症は病院での感染症の中でかなりの数を占めてる。機械を使って呼吸する必要がある患者にとって、呼吸チューブを使うのは肺の感染症のリスクを高めることになる。これらのチューブは口や他の場所からのバイ菌を集めてバイオフィルムを形成させるから、重症な肺の感染症、いわゆる人工呼吸器関連肺炎(VAP)につながることがある。
色んな種類のバイ菌が呼吸チューブに付着することができる。研究によると、患者の肺感染症を引き起こすバイ菌は、これらのチューブのバイオフィルムの中にもよく見られる同じバイ菌だったりする。VAPにつながる一般的なバイ菌には、黄色ブドウ球菌、ケルブシエラ肺炎菌、アシネトバクター・バウマニイ、緑膿菌なんかがある。通常、カンジダ・アルビカンスは口の中に見られるけど、呼吸チューブにも定着できることがあるんだ。
呼吸チューブからバイオフィルムを取り除くのはめっちゃ難しい。患者が適切な治療を受けても、バイ菌が生き残ることがある。再発する感染が多いのは、最初の治療がうまくいかなかったからなんだ。特別に薬がコーティングされた呼吸チューブを使うと感染を予防できることがあるけど、これらのほとんどは患者の結果を良くするとは限らなくて、医者が高いコストを正当化するのが難しくなるんだ。
再発する感染の大きな理由は、治療の効果をテストするのが難しいことかもしれない。標準的なテストでは、身体の中での治療の効果がわかりにくいことがある、特にバイオフィルムの場合。これに対応するために、感染の実際の状況をよりよく模倣する新しいテスト方法が作られている。これらの方法のいくつかは、バイ菌が制御された方法でバイオフィルムを形成できる装置を使ってるけど、診断に大きな改善はないんだ。
最近のモデル、特に嚢胞性線維症患者の肺の条件を模倣するものは、実際の患者に近いバイオフィルムを作ることに期待が持てる。この研究では、特別に作られた成長条件とコーティングされた呼吸チューブを組み合わせた新しい実験室モデルを紹介する。このモデルは、バイ菌が呼吸チューブに付着したときに成長する環境をよりよく表現することを目指してる。
私たちの研究では、重要なバイ菌によって形成されたバイオフィルムは、古い方法に比べて新しいモデルでは標準治療で殺すのがずっと難しいことがわかった。先進的なイメージング技術を使って、バイオフィルムの構造と組成は成長した環境によって変わることもわかった。
モデルの作成
呼吸チューブを必要とする患者の環境を模倣するために、ユニークな成長媒体を開発した。この媒体は、人工呼吸された患者の肺の条件を反映する成分のミックスから成っている。さらに、実際の状況でバイ菌がチューブに付着する際に出会う初期条件を模擬する血清の層でコーティングされた呼吸チューブも使った。
私たちは、新しいモデルでP. aeruginosa、K. pneumoniae、C. albicansによって形成されたバイオフィルムが、従来の実験室設定に比べて標準的な治療方法に対してはるかに耐性があることがわかった。この違いは、感染を研究するための現実的な環境を作ることがどれほど重要かを示している。
バイオフィルム形成の理解
バイ菌がバイオフィルムの中で一緒に成長すると、治療に対する耐性が強くなる。私たちのモデルでは、形成されたバイオフィルムがずっと厚くて複雑で、治療がバイ菌の塊に浸透するのが難しくなってるのに気づいた。例えば、P. aeruginosaのバイオフィルムは粗い表面と様々な構造を示していて、強力な保護層があることを示唆してる。
さまざまな種類のバイ菌は、バイオフィルムを形成する能力や治療への抵抗度が異なる。K. pneumoniaeは私たちの実験室モデルで厚いバイオフィルムを形成し、環境が形成されたバイオフィルムの強さに大きな影響を与えることを示してる。
C. albicansの場合、私たちのモデルの条件が、より攻撃的な菌糸と呼ばれる構造よりも、酵母細胞を形成するような特定の成長特性を好んでいることを観察した。
治療のテスト
新しいモデルでのバイオフィルムに対する治療の効果を調べるために、さまざまな抗生物質と酵素の組み合わせをテストした。酵素はバイオフィルムの保護層の材料を分解できる物質で、抗生物質の効果を助けるかもしれない。
私たちは、DNAを分解する酵素であるDNaseと抗生物質のゲンタマイシンを組み合わせることで、P. aeruginosaのバイオフィルムを殺すのに効果的であることを発見した。似たように、バイオフィルムの糖を分解する糖水解酵素を抗生物質と組み合わせると、バイオフィルムに対する効果が向上することもわかった。
でも、全部の組み合わせがうまくいくわけじゃない。例えば、糖水解酵素はP. aeruginosaのバイオフィルムには効果的だったけど、C. albicansには効果を上げられなかった。これは、異なるバイ菌がその特性や成長環境によって治療に対する反応が異なることを示してるんだ。
研究の重要性
私たちの発見は、私たちが開発した新しいin vitroモデルが研究者が病原体が繁殖する実世界の条件を模擬することを可能にすることを示している。このモデルは、臨床の場で使う前に新しい治療法をテストするのに役立てられる。
この研究は、特に人工呼吸器を使っている患者のバイオフィルム形成に対抗する方法についてのさらなる研究が必要だということを強調している。バイオフィルムの複雑さは、効果的な治療法を見つけるためには、さまざまな抗生物質、酵素、その組み合わせを調査し続ける必要があることを意味してる。
実験室モデルを改善することで、医療提供者は感染のメカニズムをよりよく理解し、それに対処するためのより効果的な戦略を開発できるようになる。これは、VAPのような感染症が効果的に治療されないと深刻な健康問題や死亡につながる可能性があるため、非常に重要だ。
将来の方向性
私たちの研究の結果から、バイオフィルムを研究するための実験室モデルを改善する必要があることが明らかになった。これらのモデルは、医療機器上の頑固なバイオフィルムに対してより効果的な新しい治療法を開発するのに役立つ。
今後の研究は、抗微生物治療とマトリックス分解酵素の追加の組み合わせを探ることに焦点を当てるべきだ。各バイ菌は環境によって異なる振る舞いをするから、さまざまな条件をテストすることが重要になる。
さらに、異なる治療に対してバイオフィルムの構造がどのように変化し、どの組成が最も効果的かを探る必要がある。
最終的には、医療機器に関連する感染の発生率と重症度を減少させ、医療システム全体の患者の結果を改善することが目標だ。
結論
要するに、私たちの研究はバイオフィルムが治療の効果にどのように影響するかについて貴重な洞察を提供している。呼吸チューブ上のバイオフィルムを研究するための新しい成長媒体とモデルを作ることによって、新しいテスト方法への扉を開いた。
この分野での探求が続けば、医療関連の感染症、特に機械呼吸を必要とする脆弱な患者に対する治療が大きく進展する可能性がある。さらなる研究と革新によって、感染症管理の未来が大きく改善されることが望まれる。
謝辞
具体的な謝辞は含まれていないが、この重要な医療分野の研究を支援するさまざまな個人や組織の貢献を認識することが重要だ。
タイトル: A new model of endotracheal tube biofilm identifies combinations of matrix-degrading enzymes and antimicrobials able to eradicate biofilms of pathogens that cause ventilator-associated pneumonia
概要: Defined as a pneumonia occurring after more than 48 hours of mechanical ventilation via an endotracheal tube, ventilator-associated pneumonia results from biofilm formation on the indwelling tube, seeding the patients lower airways with pathogenic microbes such as Pseudomonas aeruginosa, Klebsiella pneumoniae, and Candida albicans. Currently there is a lack of accurate in vitro models of ventilator-associated pneumonia development. This greatly limits our understanding of how the in-host environment alters pathogen physiology and the efficacy of ventilator-associated pneumonia prevention or treatment strategies. Here, we showcase a reproducible model that simulates biofilm formation of these pathogens in a host-mimicking environment, and demonstrate that the biofilm matrix produced differs from that observed in standard laboratory growth medium. In our model, pathogens are grown on endotracheal tube segments in the presence of a novel synthetic ventilator airway mucus (SVAM) medium that simulates the in-host environment. Matrix-degrading enzymes and cryo-SEM were employed to characterise the system in terms of biofilm matrix composition and structure, as compared to standard laboratory growth medium. As seen in patients, the biofilms of ventilator-associated pneumonia pathogens in our model either required very high concentrations of antimicrobials for eradication, or could not be eradicated. However, combining matrix-degrading enzymes with antimicrobials greatly improved biofilm eradication of all pathogens. Our in vitro endotracheal tube (IVETT) model informs on fundamental microbiology in the ventilator-associated pneumonia context, and has broad applicability as a screening platform for antibiofilm measures including the use of matrix-degrading enzymes as antimicrobial adjuvants. ImportanceThe incidence of ventilator-associated pneumonia in mechanically ventilated patients is between 5-40%, increasing to 50-80% in patients suffering from coronavirus disease 2019 (COVID-19). The mortality rate of ventilator-associated pneumonia patients can reach 45%. Treatment of the endotracheal tube biofilms that cause ventilator-associated pneumonia is extremely challenging, with causative organisms able to persist in endotracheal tube biofilm despite appropriate antimicrobial treatment in 56% of ventilator-associated pneumonia patients. Flawed antimicrobial susceptibility testing often means that ventilator-associated pneumonia pathogens are insufficiently treated, resulting in patients experiencing ventilator-associated pneumonia recurrence. Here we present an in vitro endotracheal tube biofilm model that recapitulates key aspects of endotracheal tube biofilms, including dense biofilm growth and elevated antimicrobial tolerance. Thus our biofilm model can be used as a ventilated airway simulating environment, aiding the development of anti-ventilator-associated pneumonia therapies and antimicrobial endotracheal tubes that can one day improve the clinical outcomes of mechanically ventilated patients.
著者: Freya Harrison, D. Walsh, C. Parmenter, S. E. Bakker, T. Lithgow, A. Traven
最終更新: 2024-02-20 00:00:00
言語: English
ソースURL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.02.20.581163
ソースPDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.02.20.581163.full.pdf
ライセンス: https://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0/
変更点: この要約はAIの助けを借りて作成されており、不正確な場合があります。正確な情報については、ここにリンクされている元のソース文書を参照してください。
オープンアクセスの相互運用性を利用させていただいた biorxiv に感謝します。