革新的なパルス管理で二光子イメージングを進化させる
新しい方法が、映像の明るさをアップしながら生きた組織を守るんだ。
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目次
二光子イメージングって、めっちゃ細かいところまで生きてる組織を観察するための技術なんだ。レーザーを組織に当てて、内部の分子を興奮させて、画像をキャッチするってわけ。いい結果を得るには、強いレーザー光が必要。つまり、めっちゃ効率のいいレーザーを使うか、出力を少なくして組織にダメージを与えないようにする必要があるんだ。
高い励起効率の必要性
高い励起効率があれば、レーザー出力を上げなくても明るい画像が得られるんだ。パワーを低く保つことで、研究している生きた組織へのダメージを防げる。効率を上げる一つの方法は、パルスレートが低いフェムト秒レーザーを使うこと。これらのレーザーは、すごく短い時間に大量のエネルギーをぶち込めるから、イメージングの結果が大幅に改善されるんだ。
フェムト秒レーザーの役割
フェムト秒レーザーは、レーザーパルスをめちゃくちゃ早く連続で送信する高性能ツール。一般的なタイプは80メガヘルツ(MHz)の周波数で動いてて、毎秒8000万回パルスを出すんだ。でも、パルスレートを下げることで、平均パワーを同じに保ったまま、撮影した画像の強度を倍にできるんだ。この減少は、タイミングに依存する応用にも役立つよ。
従来の方法の課題
パルスレートを下げる方法はいくつかあるけど、光学的パラメトリックアンプみたいな複雑なデバイスを使うと、管理が難しくてめっちゃ高くつくことがあるんだ。もっと簡単で安価な方法は、パルスピッカーって呼ばれるデバイスを使うこと。これを使うと、80MHzのレーザーから4つ目のパルスを選択して、周波数を20MHzに減らせるんだ。
パルスピッカーの仕組み
パルスピッカーのシステムでは、80MHzのフェムト秒レーザーがポッケルスセルっていう部品を通る。これが電圧に応じて光の偏光を変えるんだ。その後、ビームスプリッターを使って、光をポッケルスセルを通るか通らないかに分ける。ポッケルスセルは、すごく早くオンとオフを切り替える必要があって、そのために強力なドライバーが必要だから、パルスピッカーは高くつくこともある。
簡素化した解決策
この研究では、80MHzのパルスレートを40MHzに変えるための、もっと簡単なデバイスが開発されたんだ。これもポッケルスセルを使ってるけど、操作が簡単になるように工夫されてる。ポッケルスセルにインダクティブコイルを組み合わせることで、低い周波数でも効果的で、少ないパワーで済むんだ。この設定は、既存の周波数増幅器を使えるから、高価な部品が要らないんだ。
技術的な設定
この新しいデバイスに必要な40MHzの同期信号は、市販の周波数分配器を使って作れる。レーザーが適切な信号を出さない場合は、光検出器が必要な同期を得る手助けをするよ。この同期信号を強化するのが大事で、ポッケルスセルとちゃんと機能するようにしないとね。
デバイスのテスト
新しい方法は、マカクサルの視覚皮質からの画像を使ってテストされた。結果は、従来の80MHzの方法と比べて、画像の明るさと質が大幅に向上したことを示してる。テスト中に組織のダメージや色あせの兆候は全く見られなくて、安全に使える設定だったんだ。
新しい方法の利点
この新しいパルス周波数分配器は、一般に入手できる部品から作られていて、研究室が組み立てやすいんだ。既存の二光子イメージングシステムにも簡単に追加できるし、重要なのは、平均出力を同じに保ちながら画像の強度を倍にできることなんだ。
改善されたイメージングの応用
この新しい方法で得られる明るい画像は、いろんな科学的応用に大きく貢献できる。特に、信号が弱い深部組織のイメージングや、ボリュームの迅速なイメージングに役立つんだ。これらの改善は、いくつかの分野での理解や研究成果に繋がるんだ。
リソースの共有
この新しいデバイスは、2つの異なる40MHzレーザーパルスストリームを作れるから、2つの異なるイメージングシステムが同じセットアップを共有できるようになるんだ。2つのパルス間の時間遅延は、タイミングが必要な高度なイメージング技術に適してて、全体的な研究能力を高めるんだ。
結論
この二光子イメージングでレーザーパルスレートを減らすための簡素な方法の開発は、研究者にとって貴重なツールを提供してる。生きた組織へのダメージのリスクを最小限に抑えながら、高品質なイメージングを可能にするんだ。この進歩は、科学研究における効率的なイメージング技術の重要性を強調していて、最終的には生物学的プロセスの理解を助けるんだ。既存のシステムにこのアプローチを組み込むことで、科学者たちは新しいイメージングの可能性を探求し、研究を効果的に進めることができるんだ。
タイトル: A simplified femtosecond laser repetition frequency divider for two-photon imaging
概要: We present a simplified femtosecond laser frequency divider designed to divide the repetition frequency of an 80 MHz laser pulse into a 40 MHz laser pulse using a resonant model Pockels cell. The simplified driving electronics include a commercially obtainable frequency divider, power amplifier and impedance transformer, which can be easily assembled in a laboratory. By simply integrating this device into a conventional two-photon imaging system, we observed a two-fold increase in two-photon excitation efficiency and imaging intensity, while maintaining the same average excitation laser power.
著者: Shiming Tang
最終更新: 2024-03-23 00:00:00
言語: English
ソースURL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2023.07.02.547378
ソースPDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2023.07.02.547378.full.pdf
ライセンス: https://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0/
変更点: この要約はAIの助けを借りて作成されており、不正確な場合があります。正確な情報については、ここにリンクされている元のソース文書を参照してください。
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