バチルス・サブチリスにおけるバイオフィルム形成の理解
研究によると、バチルス・サブチリスはバイオフィルムと胞子形成を通じて栄養素の変化に適応するらしいよ。
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バイオフィルム形成って、単一の細胞が集まってグループを作るプロセスなんだ。細胞が環境の変化を感じ取ると、個々の細胞からコミュニティに切り替わるんだって。バイオフィルム内では、これらの細胞は自分たちが生み出した物質からできた保護層に囲まれていて、有害な化学物質や毒素から守られてるんだ。バイオフィルムの中で、細胞は違った行動をしたり、特有の特徴を示したりすることがあるよ。
バチルス・サブチリスっていうバクテリアでは、バイオフィルムを形成するプロセスがキーとなるタンパク質、Spo0Aが活性化されることで始まるんだ。この活性化はリン酸化っていうプロセスを通じて行われて、Spo0Aタンパク質にリン酸基が追加されるんだよ。感覚ヒスチジンキナーゼと呼ばれる一連のタンパク質が、環境からの信号を感じ取ってSpo0Aを活性化するのを助けてる。それで、Spo0Aが活性化されると、バイオフィルム形成につながる特定の遺伝子の発現を促進し始めるんだ。
バイオフィルム形成と胞子の調節
Spo0Aはバイオフィルム形成だけでなく、バチルス・サブチリスにおける胞子の発達にも重要な役割を果たしてる。Spo0Aが活性化されると、胞子形成に関連する多くの遺伝子もスイッチが入るんだ。これらの遺伝子は、成長にとって好ましくない状況に備えるためにバクテリアを助けるんだよ。
別のタンパク質であるSdaはSpo0Aの活性化を調節するのを手伝うんだ。Sdaは、バクテリアが準備が整っていないとき、たとえばDNA損傷があったり細胞の成長が最適でないときにSpo0Aが活性化されるのを防ぐことができる。この調節によって、バクテリアは過早に胞子形成を始めることがなくて、休眠状態に入る前にダメージを修復することができるんだ。
セリンコドンヒエラルキーの役割
最近の研究では、特定の遺伝子コード、特にセリンというアミノ酸をコードするものが、バクテリアの振る舞いに影響を与える特定のルールがあることが指摘されてる。バクテリアは同じアミノ酸を表すのに異なるコードを使っていて、これらの異なるコードはタンパク質の作り方に様々な影響を与えるんだ。
バチルス・サブチリスでは、セリンが限られてくると、タンパク質を作るリボソームが特定のセリンコードでよく止まることがわかったんだ。この停止は、SinRというバイオフィルム形成の主要な抑制因子の量を減少させることにつながるんだ。SinRのレベルが下がると、バイオフィルム形成を助ける遺伝子の活性化が可能になるんだ。
面白いことに、特定の遺伝子におけるこれらのコードの分布の仕方が、どれくらい効果的にタンパク質に翻訳されるかに重要な役割を果たしているようなんだ。たとえば、SinRをコードする遺伝子は、好ましくないセリンコードの比率が高かった。これは、セリン不足の間、SinRの翻訳効率が低く、結果的にSinRがあまり働かず、バイオフィルム形成が進むことを示唆しているんだ。
セリンコドンヒエラルキーに影響される他の遺伝子の特定
研究はSinRだけで終わらなかった。科学者たちは、セリンが限られているときに、このセリンコドンヒエラルキーの影響を受ける可能性のある他の遺伝子もあるんじゃないかと推測しているんだ。系統的なアプローチを使って、バチルス・サブチリスのゲノムの中で似たような調節効果を受ける可能性のある他の候補を特定したんだ。さまざまな遺伝子をセリンコドン分布に基づいてスコア付けすることで、研究者たちはセリンレベルに似た反応を示す可能性がある候補遺伝子のリストを作成できたんだよ。
特定された候補の中には、バイオフィルムと胞子形成の調節にも関与するsda遺伝子が含まれていた。これは、セリンコドンの使用による調節効果が少数の遺伝子を超えて、バクテリアのゲノム全体に広がる可能性があることを示唆しているんだ。
コドン置換の影響を調べる
セリンコドンの変化が与える影響を確認するために、科学者たちはsda遺伝子のいくつかの変異体を作成したんだ。それぞれの変異体には異なるセリンコドンの組み合わせが置換されていて、これらの変異体がバイオフィルムの形成や胞子形成のタイミングにどのように影響するかをテストしたんだ。
結果として、特定のセリンコドン置換を持つ株は、形成されたバイオフィルムの強度に影響を与えたよ。たとえば、ある変異株は野生型よりも強固なバイオフィルムを形成し、別の変異株はより弱いものを形成した。これは、遺伝子コードのわずかな変化でもバクテリアの行動に大きな影響を与えることがあることを示唆しているんだ。
胞子形成のタイミングを見ると、同じ株で顕著な違いが示されたんだ。特定の置換が胞子形成プロセスの遅延を引き起こしていて、セリンコドンヒエラルキーによるSdaの調節がバクテリアが成長から胞子形成に移行する能力にとって重要であることを示しているんだ。
バイオフィルムと胞子形成の競争アッセイ
異なるsda遺伝子の変異体の影響を深く探るために、競争アッセイを行って、これらの株が混合培養の中でどのようにパフォーマンスを発揮するかを観察したんだ。この競争では、さまざまな株を一緒に育てて、バイオフィルムや胞子形成条件下でどれがより効果的に繁殖できるかを見たんだよ。
これらの実験からの結果は、特定の変異株が競争優位性を持ち、その理由が遺伝的構成に関連している可能性があることを示しているんだ。たとえば、特定のコドン置換を持つ株は、バイオフィルムと胞子形成の両方の競争で成功したんだ。これは、遺伝的要因が競争適応度に大きな影響を与えることを示唆しているよ。
Sdaのタンパク質レベル分析
遺伝子発現や表現型の変化を調べることに加えて、科学者たちは実際のSdaタンパク質のレベルも調べたんだ。遺伝子融合と蛍光マーカーを組み合わせた技術を使って、研究者たちはさまざまな株のSdaタンパク質レベルを可視化し、定量化できたんだ。
結果は、特定の同義コドン置換を持つ株が異なるタンパク質レベルを示すことがわかったよ。たとえば、あるバリアントは野生型と比べてSdaタンパク質レベルが高かった。これは、コドンの使用が遺伝子発現だけでなく、実際に生成されるタンパク質の量にも影響を与えることをさらに支持するものなんだ。
これらの結果は、コードが遺伝子に配置されている方法が、特にセリン不足のような栄養制限条件下でのタンパク質の合成に大きな影響を与えることができるという以前の結論と一致しているんだ。
結論
全体的に、この研究は遺伝子コーディング、栄養の利用可能性、バクテリアの行動との複雑な相互作用を明らかにしているんだ。発見は、バチルス・サブチリスのようなバクテリアが、どのように環境の変化に適応し、複雑な調節ネットワークを通じてナビゲートするかを示しているよ。
バイオフィルム形成や胞子形成のプロセス、またSpo0AやSdaのようなキーとなるタンパク質の役割を探ることで、科学者たちはバクテリアの生命の秘密を明らかにしているんだ。この研究から得られた知見は、バクテリアの行動の理解を深めたり、さまざまな環境でのバイオフィルム関連の課題を管理するための戦略に役立つ可能性があるんだ。
今後の研究を通じて、遺伝学、タンパク質の機能、そしてバクテリアが変化する環境で生き残るためのメカニズムとのつながりを続けて解明していけるといいね。
タイトル: A Novel Regulation on the Developmental Checkpoint Protein Sda that Controls Sporulation and Biofilm Formation in Bacillus subtilis
概要: Biofilm formation by Bacillus subtilis is triggered by an unusually simple environmental sensing mechanism. Certain serine codons, the four TCN codons (N for A, T, C, or G), in the gene for the biofilm repressor SinR caused lowered SinR translation and subsequent biofilm induction during transition from exponential to stationary growth. Global ribosome profiling showed that ribosomes pause when translating the four UCN (U for T on the mRNA) serine codons on mRNA, but not the two AGC/AGU serine codons. We proposed a serine codon hierarchy (AGC/AGT vs TCN) in that genes enriched in the TCN serine codons may experience reduced translation efficiency when serine is limited. In this study, we designed an algorithm to score all protein-coding genes in B. subtilis NCIB3610 based on the serine codon hierarchy. We generated a short list of 50 genes that could be subject to regulation by this novel mechanism. We further investigated one such gene from the list, sda, which encodes a developmental checkpoint protein regulating both sporulation and biofilm formation. We showed that synonymously switching the TCN serine codons to AGC in sda led to delayed biofilm formation and sporulation. This engineered strain also outgrew strains with other synonymously substituted sda alleles (TCN) in competition assays for biofilm formation and sporulation. Lastly, we showed that the AGC serine codon substitutions in sda elevated the Sda protein levels. This serine codon hierarchy-based novel signaling mechanism could be exploited by bacteria in adapting to stationary phase and regulating important biological processes. ImportanceGenome-wide ribosome profiling in Bacillus subtilis shows that under serine limitation, ribosomes pause on the four TCN (N for A, C, G, and T), but not AGC/AGT serine codons, during translation at a global scale. This serine codon hierarchy (AGC/T vs TCN) differentially influences translation efficiency of genes enriched in certain serine codons. In this study, we designed an algorism to score all 4000+ genes in the B. subtilis genome and generated a list of 50 genes that could be subject to this novel serine codon hierarchy-mediated regulation. We further investigated one such gene, sda, encoding a developmental check point protein. We show that sda and cell developments controlled by Sda are also regulated by this novel mechanism.
著者: Yunrong Chai, Y. He, Y. Qin, J. Greenwich, S. Balaban, M. V. L. Darcera, K. Gozzi
最終更新: 2024-05-15 00:00:00
言語: English
ソースURL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.05.13.593929
ソースPDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.05.13.593929.full.pdf
ライセンス: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
変更点: この要約はAIの助けを借りて作成されており、不正確な場合があります。正確な情報については、ここにリンクされている元のソース文書を参照してください。
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