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# 生物学# 神経科学

ゼブラフィッシュの幼魚の脳回路をマッピングする

研究者たちがゼブラフィッシュの脳のコネクションを調べるためのトレーシング技術を強化したよ。

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ゼブラフィッシュの神経回路ゼブラフィッシュの神経回路マッピングつながりが詳しくわかった。新しい技術で、幼魚ゼブラフィッシュの脳の
目次

ゼブラフィッシュは、小さなサイズ、透明な体、遺伝的柔軟性のおかげで、脳の研究に役立つモデルになってる。研究者たちは、特に幼生期のゼブラフィッシュの異なる脳細胞のつながりや機能を理解しようとしてる。神経細胞がどうコミュニケーションを取るかを追跡する方法が開発され、脳の仕組みへの洞察を得ることができてる。

幼生ゼブラフィッシュの特別な点

幼生ゼブラフィッシュを使う主な利点の一つは、脳細胞がリアルタイムでどう機能するかを観察できること。小さくて透明な体のおかげで、科学者たちは複雑な機器なしで脳を観察できる。特定の遺伝子を操作して特性を表現させることができるから、特定の神経細胞がどんなふうに振る舞ってつながるかを研究するのが簡単なんだ。

神経のつながりをマッピングするチャレンジ

神経同士のつながり、つまり神経回路をマッピングするのは難しい作業。これには信号がどう神経から神経へ移動するかを追跡する高度な技術が必要。幼生ゼブラフィッシュでは、効果的に神経をラベル付けしてつながりを追跡できるツールが必要だ。

神経回路を追跡するための新しいツール

最近の追跡ツールの進歩により、神経回路をより効果的に研究できるようになった。その一つが、特定の神経細胞だけに感染するように設計された改良された狂犬病ウイルス。このツールは、助けとなるタンパク質を導入することで、ウイルスがつながった神経間で広がることを可能にする。これを使うことで、研究者はどの神経がつながっていて、情報がどう流れるかを可視化できる。

改良された狂犬病ウイルスの使い方

この研究では、科学者たちが幼生ゼブラフィッシュにおける改良された狂犬病ウイルスの使い方を改善した。ウイルスを特定の神経に注入する方法を開発して、つながりの追跡が正確になるようにした。この方法は、助けとなるタンパク質の注入と狂犬病ウイルスそのものの注入の二つの主要な注入を含む。研究者たちは、この二段階のプロセスが脳のつながりを追跡する能力を大幅に向上させることを発見した。

最近の実験からの重要な発見

新しい方法を適用することで、研究者たちは効率の良い条件と低い毒性を得ることができた。特定の狂犬病ウイルスの株を使用し、幼生を少し高めの温度で育てることで、追跡性能が大幅に改善されることがわかった。結果は、彼らの方法がゼブラフィッシュで使われた以前の方法に比べて20倍も効果的であることを示した。

ウイルス感染後の神経の健康

この研究のもう一つの重要な側面は、ウイルス感染後の神経の健康の観察だ。科学者たちは、幼生ゼブラフィッシュが注射後少なくとも10日間は正常な神経の健康を保つことを発見した。これは、追跡後に神経回路の機能的研究を行うことができ、神経が期待通りに刺激に反応することを確保するのに重要だ。

小脳における神経接続のマッピング

研究者たちは、追跡方法の効果を示すために、ゼブラフィッシュの小脳における接続のマッピングに集中した。彼らは、顆粒細胞と呼ばれる特定の神経細胞が小脳内のプルキンエ細胞とどのように接続されているかを調査した。追跡技術を使うことで、これらの接続がどのように整理されているか、そして異なる顆粒細胞がプルキンエ細胞とどのように接続されるかを詳しく示すことができた。

細胞タイプ特異的な追跡の重要性

新しい追跡方法の大きな利点は、特定の神経細胞タイプを追跡できることだ。専門的な遺伝子マーカーを使用することで、研究者はどの神経が追跡されているかを特定できる。これにより、脳内で特定の神経タイプがどのように相互作用するかについてより洗練された理解が得られる。神経細胞(サポート細胞)を視覚的に分離できることで、回路マッピングの精度が向上する。

接続の詳細な分析

この研究はまた、小脳内の神経回路の複雑さを浮き彫りにしている。研究者たちは、追跡された神経の3Dモデルを再構築し、異なる神経タイプがどのように接続されているかを明らかにした。彼らは、接続がこれらの回路の機能を反映する方法で維持されていることを発見し、小脳が情報を処理する方法の理解に貢献した。

神経回路研究の今後の方向性

この研究は、今後の研究の新しい可能性を開く。新しい追跡ツールは、他の脳の領域や異なるタイプの神経回路を探求するのにも使える。接続を可視化し、分析する能力を高めることで、科学者たちは脳が情報をどう処理し、発展し、変化にどのように反応するかをよりよく理解できるようになる。

結論

幼生ゼブラフィッシュにおける神経回路の追跡の進展は、神経科学において重要な一歩を意味している。新しい技術とゼブラフィッシュのモデル有機体としての利点を組み合わせることで、研究者たちは脳の複雑なネットワークをこれまで以上に詳細に探求することができる。この知識は、脳の機能や発展についての新しい洞察をもたらし、神経障害の理解に対する潜在的な影響を持つかもしれない。

オリジナルソース

タイトル: An applicable and efficient retrograde monosynaptic circuit mapping tool for larval zebrafish

概要: The larval zebrafish is a vertebrate model for in vivo monitoring and manipulation of whole-brain neuronal activities. Tracing its neural circuits still remains challenging. Here we report an applicable methodology tailored for larval zebrafish to achieve efficient retrograde trans-monosynaptic tracing from genetically defined neurons via EnvA-pseudotyped glycoprotein-deleted rabies viruses. By combinatorially optimizing multiple factors involved, we identified the CVS strain trans-complemented with advanced expression of N2cG at 36{degrees}C as the optimal combination. It yielded a tracing efficiency of up to 20 inputs per starter cell. Its low cytotoxicity enabled the viable labeling and calcium imaging of infected neurons 10 days post-infection, spanning larval ages commonly used for functional examination. Cre-dependent labeling was further developed to enable input cell-type-specific tracing and circuit reconstruction. We mapped cerebellar circuits and uncovered the ipsilateral preference and subtype specificity of granule cell-to-Purkinje cell connections. Our method offers an efficient way for tracing neural circuits in larval zebrafish.

著者: Xufei Du, T. Chen, Q. Deng, K. Lin, X. Zheng, X. Wang, Y. Zhong, X. Ning, Y. Li, F. Xu

最終更新: 2024-07-02 00:00:00

言語: English

ソースURL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.06.27.601104

ソースPDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.06.27.601104.full.pdf

ライセンス: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/

変更点: この要約はAIの助けを借りて作成されており、不正確な場合があります。正確な情報については、ここにリンクされている元のソース文書を参照してください。

オープンアクセスの相互運用性を利用させていただいた biorxiv に感謝します。

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