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# 生物学# 微生物学

細菌の鞭毛の動きのメカニズム

細菌が鞭毛やイオン駆動システムを使って泳ぐ仕組みの概要。

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細菌の動きのメカニクスが明細菌の動きのメカニクスが明らかになった関する洞察。バクテリアの動きと工学的運動能力の進展に
目次

バイ菌って小さな生き物で、液体の中を泳ぎ回ることができるんだ。そのために、フラジェラっていう小さな尾みたいな構造を使ってる。フラジェラの動きは特別な機械が回転させてて、バイ菌が食べ物がある場所や有害な物質から離れるように動けるようにしてるんだ。

フラジェラの動き

フラジェラはプロペラみたいに回ってて、エネルギーを生み出すシステムによって制御されてる。このエネルギーはイオンから来ていて、バイ菌の膜のポンプを通って流れるんだ。ポンプが働くと、フラジェラが回転して、バイ菌が動けるようになる。

ポンプの種類

このポンプには、使うイオンによって違う種類があるんだ。あるバイ菌はプロトンを使うし、他のバイ菌はナトリウムイオンを使う。最近の研究では、バイ菌の移動を助けるこのポンプが、いろんな種で似たような構造をしていることがわかって、みんな共通の祖先から来てることを示唆してる。この共通の構造が、バイ菌がどうやって動くのか、そして時間と共にどう進化してきたのかを理解する鍵なんだ。

フラジェラモーターの構造

フラジェラモーターは複数のパーツが一緒に働いてる。各パーツには特定の役割があって、例えば主要な構成要素にはフィラメント、フック、バサルボディがある。これらがイオンで動く機械と一緒に働いて、バイ菌が効果的に泳げるようにしてるんだ。

E. coliの役割

大腸菌(Escherichia coli)、通称E. coliは、科学の研究でよく使われる一般的なバイ菌だ。E. coliは移動を助ける特定のポンプのシステムを持ってる。MotA MotBとExbB ExbDという2つの主要なシステムがあって、E. coliがイオン勾配を利用して前に進むのを助けてる。このシステムは多くの特長を共有していて、似たような設計や機能を持ってることがわかるんだ。

研究におけるキメラ構造

科学者たちは、これらのシステムの異なる部品を組み合わせてキメラを作ってるんだ。これは異なるタンパク質の部品を使ったハイブリッド構造なんだけど、研究者がこれらのシステムがどのように働いているか、各部品が何をしているかを理解するのに役立ってる。過去の試みでは、異なるタイプのイオンを使って機能するキメラタンパク質を作ろうとしたこともあるんだ。

最近の進展

最近の研究では、科学者たちは、特定の部分を取り除いたバイ菌が動けるようにするために、新しいデザインのキメラタンパク質を探求したんだ。いくつかのタンパク質の組み合わせがバイ菌が再び泳げるようにするのを助けたことがわかった。これは、モーターの異なる部分が新しい方法で一緒に働けることを示していて、ワクワクする進展だったんだ。

新しい機能のエンジニアリング

タンパク質工学を使って、研究者たちはポンプコンポーネントの新しい組み合わせを作って、ラボで育ったバイ菌に試してみた。タンパク質の構造に小さな変更を加えるだけで、バイ菌の移動能力が大きく改善されることがわかったんだ。これは、タンパク質パーツの配置がシステムの機能にとって重要だということを明らかにしたんだ。

キメラのテスト

科学者たちは、自分たちのキメラタンパク質の効果をテストするために、特別なプレートで新しい構造を持ったバイ菌を育てた。時間が経つにつれて、泳げるバイ菌を探して、タンパク質の組み合わせがうまくいってることを示した。多くの工夫されたタンパク質の中で、いくつかは効果的に移動を回復できることがわかった。

遺伝子的な変化

研究者たちが成功したキメラを見つけたとき、そのDNAをシーケンシングして、泳ぐ能力に寄与したかもしれない変異を特定した。バイ菌がより良く動くのを助けた特定のDNAの変化が見つかって、これが全体の機能にどのように影響するかについてさらなる研究が進められたんだ。

さらなる改善

チームは、エンジニアリングしたバイ菌の泳ぐ能力をさらに向上させられないかと考えて、E. coliのモーターの元のパーツを新しい構造に置き換えた。その結果、運動能力が時間とともに改善されるのを観察した。このプロセスは、バイ菌が遺伝的な変化を通じて適応し、移動能力を向上させることができることを示したんだ。

突然変異からの洞察

自然界では突然変異が時々起こるけど、これはこれらのキメラタンパク質の機能を改善するのに重要な役割を果たしてきたんだ。重要な突然変異を特定することで、研究者たちは移動をさらに向上させる方法を見つけられるかもしれない。成功したキメラの一つに見つかった顕著な突然変異は、その泳ぐ能力に大きな影響を与えたんだ。

ナトリウムの重要性

興味深いことに、研究では、いくつかの工夫されたタンパク質が効果的に機能するためにナトリウムイオンを必要とすることがわかったんだ。適切なイオン環境がないと、バイ菌は泳ぐのに苦労する。この発見は、これらのモーターシステムの機能にとって正しい条件がどれだけ重要かを強調したんだ。

デザインの課題

成功がある一方で、効果的なキメラタンパク質をデザインするのは簡単じゃないんだ。タンパク質の構造にほんの小さな変更を加えるだけで、機能に異なる結果をもたらすことがある。研究者たちは、どこを変更すべきか、またその選択がバイ菌全体の機能にどのように影響するかを慎重に考える必要があると学んだんだ。

エピスタティックな相互作用

研究から得られたもう一つの重要な洞察は、アクションの場から遠く離れた場所での突然変異の効果だった。これらの突然変異は、全体のモーターシステムの機能を改善するのを助けることができる。この発見は、タンパク質の一部の変更が他の領域の動作に影響を与える可能性があることを示していて、タンパク質の機能がどれだけ相互に関連しているかを示してるんだ。

テストの変動性

科学者たちは、自分たちのテストがE. coliで行われたことに注目したんだけど、これは発見に制限をもたらすかもしれない。異なるバイ菌は異なる泳ぎのメカニズムを持っているし、環境もモーターの性能に大きく影響することがある。この変動性は、いろんなバイ菌タイプにわたってより広範なテストが必要だということを強調してるんだ。

将来の方向性

この研究は、バイ菌の運動性の分野での探索と実験の重要性を示してる。技術と理解の進歩によって、科学者たちはこれらの複雑なシステムがどう働いているのか、また新しい目的のためにどのようにエンジニアリングできるのかをもっと解明することを望んでいるんだ。

結論

バイ菌の動きの理解は、とても興味深い研究分野で、多くの影響があるんだ。フラジェラモーターやイオン駆動システムを研究することで、研究者たちは基本的な生物学とバイオテクノロジーの応用についての洞察を得られる。新しい機能をエンジニアリングして移動を向上させる能力は、この分野での重要な一歩で、微生物学における革新的な研究の継続的な必要性を示してるんだ。

オリジナルソース

タイトル: Hybrid Exb/Mot stators require substitutions distant from the chimeric pore to power flagellar rotation

概要: Powered by ion transport across the cell membrane, conserved ion-powered rotary motors (IRMs) drive bacterial motility by generating torque on the rotor of the bacterial flagellar motor. Homologous heteroheptameric IRMs have been structurally characterized in ion channels such as Tol/Ton/Exb/Gld, and most recently in phage defense systems such as Zor. Functional stator complexes synthesized from chimeras of PomB/MotB (PotB) have been used to study flagellar rotation at low ion-motive force achieved via reduced external sodium concentration. The function of such chimeras is highly sensitive to the location of the fusion site, and these hybrid proteins have thus far been arbitrarily designed. To date, no chimeras have been constructed using interchange of components from Tol/Ton/Exb/Gld and other ion powered motors with more distant homology. Here we synthesised chimeras of MotAB, PomAPotB and ExbBD to assess their capacity for cross-compatibility. We generated motile strains powered by stator complexes with B-subunit chimeras. This motility was further optimised by directed evolution. Whole genome sequencing of these strains revealed that motility-enhancing residue changes occurred in the A-subunit and at the peptidoglycan binding domain of the B-unit, which could improve motility. Overall, our work highlights the complexity of stator architecture and identifies the challenges associated with rational design of chimeric IRMs. ImportanceIon-powered rotary motors (IRMs) underpin the rotation of one of natures oldest wheels, the flagellar motor. Recent structures have shown that this complex drives ion conduction and even phage defence and thus appears to be a fundamental molecular module with diverse biological utility where electrical energy can be coupled to rotational force to execute work. Here, we attempted to rationally design chimeric IRMs to explore the cross-compatibility of these ancient motors. We succeeded in making one working chimera of a flagellar motor and a non-flagellar transport system protein. This had only a short hybrid stretch in the ion-conducting channel, and function was subsequently significantly improved through additional substitutions at sites distant from this hybrid pore region. Our goal was to test the cross-compatibility of these homologous systems and highlight challenges arising when engineering new rotary motors from this fundamental nanomotor.

著者: Matthew AB Baker, P. Ridone

最終更新: 2024-08-18 00:00:00

言語: English

ソースURL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.03.12.584617

ソースPDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.03.12.584617.full.pdf

ライセンス: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/

変更点: この要約はAIの助けを借りて作成されており、不正確な場合があります。正確な情報については、ここにリンクされている元のソース文書を参照してください。

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