アスペルギルス・ウェンティに関するゲノムの洞察
アスペルギルス・ウェンティの研究は医療化合物の生産の可能性を示してるよ。
― 1 分で読む
目次
アスペルギルスは、医学や産業での重要性でよく知られている菌類のグループだよ。これらの菌のいくつかの種は自然界のほぼどこにでもいるんだ。彼らはいろんな役割を果たしていて、死んだ有機物を分解したり、植物や動物に病気を引き起こしたり、他の生物と有益な関係を築いたりしてるんだ。いろんな化合物を作れるから、害のある毒素や役に立つ薬も含めて、科学者たちはこれらの菌を詳しく研究してるよ。
アスペルギルス・ウェンティという種は、生物活性のあるたくさんの化合物を生産することがわかってるんだ。この菌は97種類の異なる物質を作ることが分かっていて、特に医療に使える可能性のあるテルペノイドという種類の化合物を含んでるんだ。その中には、コレステロールを下げるのに役立つロバスタチンみたいな化合物もあるよ。過去40年間、生活生物から得られる天然物は、特にがんや細菌感染の治療に使われる小分子薬の開発に大きく貢献してきたんだ。
ゲノム配列決定の重要性
これらの生物活性化合物がどうやって作られているのかをもっと理解するために、科学者たちはこれらの菌のゲノムを配列決定する必要があるんだ。ゲノムは生物の遺伝物質の完全なセットを指すんだ。2017年に、研究者たちはアスペルギルス・ウェンティCBS 141173のゲノム配列を発表したけど、短い断片しか得られなかった方法でのことだったんだ。
この研究の目的は、アスペルギルス・ウェンティのゲノムをさらに探ることだったんだ。この菌は土壌や水などいろんな環境に存在していて、医療用途の可能性がある小分子を生産することで知られてるよ。特に、抗がん特性があることで知られるノルディテルペノイドジラクトンという特定の化合物群に焦点を当てたんだ。
方法
菌株
アスペルギルス・ウェンティ株は、菌類の多様性センターから取得したよ。栄養豊富な培地で特定の寒天プレートで育てたんだ。
ゲノムDNAとRNA抽出
液体培養で菌を育てて、物理的な方法で細胞を壊してDNAを抽出したよ。遺伝子発現を理解するためのRNAも、2つの異なる成長段階で菌から抽出したんだ。
ゲノム配列決定とアセンブリ
DNAはオックスフォードナノポア技術という方法を使って配列決定したんだ。この技術は、DNAの長いリードを提供して、短いDNA断片をより効率的に結びつけるのに役立つから、ゲノムの組み立てがうまくいくんだ。
ゲノムアノテーション
ゲノムを組み立てた後、研究者たちはそれをアノテーションしたんだ。それは、存在する遺伝子の機能を説明することを意味してるよ。RNA配列データを使って、これらの機能をより正確に特定する手助けをしたんだ。
結果
ゲノムの特徴
アスペルギルス・ウェンティの最終的なゲノムサイズは31.2メガベースで、関連する他の菌と一致していたよ。ゲノムからは12,925の遺伝子が予測されたんだ。研究者たちは、これらの遺伝子の大部分が、基本的な生存には必要ないけど重要な生物学的影響を持つ二次代謝産物の生産に関連していることを強調したよ。
生合成遺伝子クラスター
研究者たちは、これらの二次代謝産物を生み出すことで知られるゲノムの領域を探したんだ。66個の生合成遺伝子クラスター(BGC)が特定されて、その中には、医療に貴重なテルペノイドを生産できるものもたくさんあったよ。
代謝物分析
先進的な技術を使って、研究者たちは菌の抽出物を分析して、生成された化合物を特定したんだ。重要な発見の一つは、アスペロライドAという化合物の特定で、これは抗がん活性の可能性を示したんだ。この化合物は研究中にこの菌によって作られることが確認されたよ。
テルペン合成酵素
テルペン合成酵素は、テルペノイド化合物を作るのに重要な酵素なんだ。研究者たちはアスペルギルス・ウェンティのゲノム内にいくつかのテルペン合成酵素遺伝子を特定したよ。その中には、特定の条件下でテルペノイドの生産に重要な役割を果たしていることを示す、より多く発現しているものもあったんだ。
遺伝子発現
分析の中で、研究者たちはすべてのテルペン合成酵素遺伝子が同時に活性化しているわけではないことを発見したんだ。これは、環境要因がこの菌が生成する化合物に影響を与えるかもしれないことを示しているよ。
系統解析
アスペルギルス・ウェンティのテルペン合成酵素が他の菌のそれとどう関係しているのかを理解するために、研究者たちは系統解析を行ったんだ。この解析により、さまざまなテルペン合成酵素の多様なグループが示されて、生成できる可能性のあるテルペノイド化合物のバラエティがあることがわかったよ。
結論
この研究は、アスペルギルス・ウェンティのゲノムと生物活性化合物の生産の可能性について重要な洞察を提供したんだ。ゲノムを配列決定してアノテーションすることで、これらの菌が貴重な薬用化合物を生み出す経路を理解するための将来の研究に向けた基盤が整ったよ。アスペロライドAのような成分の特定は、これらの菌が医薬品開発において持つ可能性を強調しているんだ。
将来的には、研究者たちはこれらの貴重な化合物を生産する遺伝子を操作するために様々な技術を使う予定なんだ。そうすることで、特定の代謝物の収量を増やしたり、新たな治療可能性を持つ化合物を生み出すことを目指しているよ。
この研究は、新しい薬を探す中での菌類の遺伝学を理解する重要性を示していて、バイオテクノロジーの応用における菌類の豊富な資源を際立たせているんだ。配列決定技術や分析手法の進展が続く中で、新しい生物活性化合物を発見する可能性はまだまだ広がっているよ。
タイトル: Identification of a terpene synthase arsenal using long-read sequencing and genome assembly of Aspergillus wentii
概要: Fungi are talented producers of secondary metabolites with applications in the pharmaceutical and agrochemical sectors. Aspergillus wentii CBS 141173 has gathered research interest due to its ability to produce high-value norditerpenoid compounds, including anticancer molecules. In this study, we aimed to expand the genomic information available for A. wentii to facilitate the identification of terpenoid biosynthetic genes that may be involved in the production of bioactive molecules. Long-read genome sequencing of Aspergillus wentii CBS 141173 was conducted using Oxford Nanopore Technologies (ONT) MinION MK1C. In addition, paired-end stranded RNA-seq data from two time points, 7 days and 30 days, was used for functional annotation of the assembled genome. Overall, we assembled a genome of approximately 31.2 Mb and identified 66 biosynthetic gene clusters from the annotated genome. Metabolic extracts of A. wentii were analysed and the production of the bioactive terpenoid asperolide A was confirmed. We further mined the assembled and annotated genome for BGCs involved in terpenoid pathways using a combination of antiSMASH and local BlastP and identified 16 terpene synthases. Phylogenetic analysis was conducted and allowed us to establish relationships with other characterised terpene synthases. We identified two terpene clusters potentially involved in pimarane-like diterpenoid biosynthesis. Finally, the analysis of the 16 terpene synthases in our 7-day and 30-day transcriptomic data suggested that only four of them were constitutively expressed under laboratory conditions. These results provide a scaffold for the future exploration of terpenoid biosynthetic pathways for bioactive molecules in A. wentii. The terpenoid clusters identified in this study are candidates for heterologous gene expression and/or gene disruption experiments. The description and availability of the long-read genome assembly of A. wentii CBS 141173 further provides the basis for downstream genome analysis and biotechnological exploitation of this species.
著者: Fabrizio Alberti, R. Olumakaiye, C. Corre
最終更新: 2024-09-24 00:00:00
言語: English
ソースURL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.09.23.614465
ソースPDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.09.23.614465.full.pdf
ライセンス: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
変更点: この要約はAIの助けを借りて作成されており、不正確な場合があります。正確な情報については、ここにリンクされている元のソース文書を参照してください。
オープンアクセスの相互運用性を利用させていただいた biorxiv に感謝します。