Améliorer la microscopie à fluorescence avec l'apprentissage profond
Un modèle de deep learning améliore la qualité des images dans les échantillons biologiques épais.
― 6 min lire
Table des matières
- Le Problème de l'Aberration Optique
- Solutions Actuelles
- Apprentissage profond comme Solution
- Génération de Données d'Entraînement
- Performance du Modèle et Simulations
- Tests Réels avec des Échantillons Biologiques
- Application à Différentes Techniques de Microscopie
- Améliorations Dépendant de la Profondeur
- Avancées en Imagerie en Temps Réel
- Limitations et Directions Futures
- Conclusion
- Source originale
La microscopie par fluorescence est une technique utilisée pour visualiser de petites structures dans des échantillons biologiques. Elle permet aux scientifiques de voir des parties spécifiques des cellules en utilisant des colorants fluorescents qui s'illuminent lorsqu'ils sont exposés à certaines longueurs d'onde de lumière. Cependant, cette méthode peut rencontrer des défis lorsqu'il s'agit de visualiser des échantillons qui sont profonds et épais. Quand la lumière traverse différents matériaux, elle peut se déformer, ce qui entraîne des images floues. C'est ce qu'on appelle l'aberration optique.
Le Problème de l'Aberration Optique
Les Aberrations optiques se produisent lorsque la lumière rencontre des différences d'épaisseur ou de densité dans l'échantillon. Ces différences peuvent venir d'un mauvais alignement dans le microscope, de défauts dans les éléments optiques ou de variations dans le liquide entourant l'échantillon. Du coup, les images capturées des parties plus profondes de l'échantillon peuvent avoir une qualité inférieure : moins de contraste, du bruit, et une mauvaise résolution. Ça devient un problème important quand les chercheurs veulent étudier des détails complexes dans des échantillons épais.
Solutions Actuelles
Une façon de gérer ces déformations est d'utiliser des optiques adaptatives (OA). Les techniques OA mesurent comment le front d'onde de la lumière a été déformé puis le corrigent avec des dispositifs spéciaux comme des miroirs. Bien que ces corrections puissent grandement améliorer la qualité de l'image, elles nécessitent souvent plus de temps et de ressources, ce qui les rend moins pratiques pour de nombreux labos. Les chercheurs cherchent d'autres méthodes efficaces pour corriger les aberrations sans ralentir le processus d'imagerie ou nécessiter un équipement coûteux.
Apprentissage profond comme Solution
Une alternative prometteuse vient de la technologie d'apprentissage profond. L'apprentissage profond peut aider à améliorer la Qualité d'image en inversant les effets des déformations. Les chercheurs peuvent entraîner des modèles d'apprentissage profond avec des paires d'images de haute qualité (propres) et leurs versions déformées. En comprenant comment les déformations affectent les images, le modèle peut apprendre à nettoyer les déformations lors de l'analyse.
Génération de Données d'Entraînement
Les chercheurs ont créé des déformations synthétiques pour générer des données d'entraînement. D'abord, ils ont pris des images de haute qualité et ont délibérément ajouté des déformations pour imiter la façon dont des images de parties plus profondes d'un échantillon apparaîtraient. Ça leur a permis de produire un ensemble de données utilisable pour entraîner le modèle d'apprentissage profond. Le modèle, appelé DeAbe, apprend à corriger les déformations en fonction des infos fournies durant la phase d'entraînement.
Performance du Modèle et Simulations
L'efficacité du modèle DeAbe a été évaluée à travers des simulations, où des formes et objets 3D ont été créés et déformés en utilisant des fonctions mathématiques connues. Des vérifications visuelles ont suggéré que DeAbe pourrait restaurer ces images déformées avec une qualité bien meilleure que d'autres techniques communes de restauration d'images. Le modèle a été particulièrement efficace pour maintenir la qualité même avec différents types de déformations.
Tests Réels avec des Échantillons Biologiques
Après avoir validé le modèle via des simulations, les chercheurs ont appliqué DeAbe à de vrais échantillons biologiques. Ils se sont surtout concentrés sur des échantillons de cellules et de tissus. Les résultats ont montré que DeAbe pouvait améliorer significativement la visibilité des structures fines dans les échantillons. Par exemple, il a amélioré la clarté des composants cellulaires, qui étaient devenus obscurcis dans les images déformées.
Application à Différentes Techniques de Microscopie
Les capacités de DeAbe ont été testées à travers diverses techniques de microscopie, y compris la microscopie confocale et à deux photons. Chaque technique a montré des améliorations substantielles de la qualité d'image. Dans un exemple, des échantillons vivants de petits nématodes (C. elegans) ont été imagés, et le modèle DeAbe a pu restaurer des détails cellulaires importants qui étaient initialement perdus à cause de la déformation.
Améliorations Dépendant de la Profondeur
Un avantage frappant du modèle DeAbe est sa capacité à corriger les images floues capturées à différentes profondeurs dans un échantillon. L'entraînement du modèle a garanti qu'il pouvait retrouver la clarté même en visualisant les parties les plus profondes d'un échantillon. C'est particulièrement critique quand il s'agit de visualiser des structures biologiques complexes profondément ancrées dans les tissus.
Avancées en Imagerie en Temps Réel
DeAbe peut aussi être intégré dans des études d'imagerie en temps réel, qui capturent les changements dans les échantillons au fil du temps. Ces études sont essentielles pour comprendre des processus dynamiques comme la division cellulaire et le mouvement. En appliquant DeAbe à ces enregistrements, les chercheurs peuvent maintenir une haute qualité d'image tout au long de la période d'observation, ce qui est souvent un défi avec les techniques d'imagerie conventionnelles.
Limitations et Directions Futures
Bien que DeAbe ait prouvé son utilité, il a quelques limitations. Le succès du modèle dépend de la qualité des données d'entraînement. Si les images d'entraînement ne représentent pas fidèlement les structures des échantillons cibles, le modèle peut avoir du mal à fournir des corrections précises. De plus, les modèles d'apprentissage profond fonctionnent mieux lorsque les variations au sein des échantillons sont cohérentes.
Dans le futur, les chercheurs pourraient envisager d'élargir l'application de DeAbe. Ils pourraient explorer l'entraînement de modèles avec une diversité plus large d'échantillons ou se concentrer sur la correction d'autres formes de déformations qui ne sont pas constantes à travers la profondeur de l'imagerie. Ces avancées pourraient mener à des techniques d'imagerie encore plus puissantes dans le domaine de la biologie.
Conclusion
L'introduction de modèles d'apprentissage profond comme DeAbe offre une opportunité passionnante pour améliorer la microscopie par fluorescence. En compensant efficacement les aberrations optiques, DeAbe améliore la qualité des images capturées à partir d'échantillons biologiques épais, assurant que les chercheurs peuvent observer des détails importants sans avoir besoin d'équipement coûteux ou de temps de traitement longs. Cette approche innovante pourrait mener à des percées importantes dans la recherche biologique et les techniques d'imagerie.
Titre: Deep learning-based aberration compensation improves contrast and resolution in fluorescence microscopy
Résumé: Optical aberrations hinder fluorescence microscopy of thick samples, reducing image signal, contrast, and resolution. Here we introduce a deep learning-based strategy for aberration compensation, improving image quality without slowing image acquisition, applying additional dose, or introducing more optics into the imaging path. Our method (i) introduces synthetic aberrations to images acquired on the shallow side of image stacks, making them resemble those acquired deeper into the volume and (ii) trains neural networks to reverse the effect of these aberrations. We use simulations and experiments to show that applying the trained de-aberration networks outperforms alternative methods, providing restoration on par with adaptive optics techniques; and subsequently apply the networks to diverse datasets captured with confocal, light-sheet, multi-photon, and super-resolution microscopy. In all cases, the improved quality of the restored data facilitates qualitative image inspection and improves downstream image quantitation, including orientational analysis of blood vessels in mouse tissue and improved membrane and nuclear segmentation in C. elegans embryos.
Auteurs: Min Guo, Y. Wu, C. M. Hobson, Y. Su, S. Qian, E. Krueger, R. Christensen, G. Kroeschell, J. Bui, M. Chaw, L. Zhang, J. Liu, X. Hou, X. Han, Z. Lu, X. Ma, A. Zhovmer, C. Combs, M. Moyle, E. Yemini, H. Liu, Z. Liu, A. Benedetto, P. La Riviere, D. Colon-Ramos, H. Shroff
Dernière mise à jour: 2024-07-15 00:00:00
Langue: English
Source URL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2023.10.15.562439
Source PDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2023.10.15.562439.full.pdf
Licence: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
Changements: Ce résumé a été créé avec l'aide de l'IA et peut contenir des inexactitudes. Pour obtenir des informations précises, veuillez vous référer aux documents sources originaux dont les liens figurent ici.
Merci à biorxiv pour l'utilisation de son interopérabilité en libre accès.