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# Biologie# Biologie du cancer

Nouveau dispositif améliore l'étude des sphéroïdes tumoraux

Un nouvel outil améliore la recherche sur les sphéroïdes tumoraux 3D et la migration cellulaire.

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Les Sphéroïdes tumoraux tridimensionnels sont de petits groupes de cellules cancéreuses qui se développent de manière à ressembler à de vraies tumeurs dans le corps. Contrairement aux cultures cellulaires plates traditionnelles qui ne montrent qu'une partie du tableau, ces sphéroïdes 3D permettent aux chercheurs d'étudier comment les tumeurs se comportent de manière plus précise. Ils imitent beaucoup mieux l'environnement des tumeurs solides, ce qui aide les scientifiques à comprendre comment les tumeurs grandissent, se propagent et réagissent aux Traitements.

Apparence et motifs de croissance des sphéroïdes

Vu au microscope, les sphéroïdes 3D apparaissent comme des boules translucides avec une bordure claire et un centre plus sombre. Ils grandissent d'une manière spécifique, commençant par une augmentation rapide de taille suivie d'une phase de croissance plus lente une fois qu'ils atteignent une certaine taille, généralement autour de 500 micromètres. Mesurer leur épaisseur fournit des informations plus précises sur leur croissance par rapport à la mesure uniquement de leur largeur et hauteur.

Limitations de la Microscopie traditionnelle

Bien que la microscopie optique soit une méthode courante pour observer les sphéroïdes, elle a quelques inconvénients. Il peut être difficile de mesurer la structure 3D complète des sphéroïdes, en particulier leur épaisseur. Leur nature transparente peut rendre les images floues, ce qui entraîne des estimations de taille incorrectes si seules des images 2D sont utilisées. L'imagerie confocale peut produire des images 3D plus claires, mais elle a des limites qui compliquent l'analyse des sphéroïdes plus grands. Des alternatives comme la tomographie par cohérence optique (OCT) et la microscopie par fluorescence à plan lumineux (LSFM) peuvent être plus efficaces, mais nécessitent un équipement spécial et peuvent aussi avoir des limites.

Le besoin de techniques de mesure standardisées

Un autre défi rencontré dans la recherche est qu'il n'existe pas de méthodes standardisées pour mesurer la taille et la forme des sphéroïdes à travers différentes techniques d'imagerie. Cette incohérence complique la tâche des scientifiques pour comparer leurs découvertes ou répéter des expériences. Établir des lignes directrices claires sur la manière de prendre, traiter et rapporter les images des sphéroïdes est crucial pour faire avancer ce domaine d'étude.

Développement d'un appareil d'observation multi-angle

Pour surmonter ces défis, les chercheurs ont conçu un nouvel appareil qui permet de voir les sphéroïdes sous différents angles en utilisant la microscopie à champ clair standard. Cet appareil se compose d'une boîte de pétri, d'une série de micro-puits en agarose, et d'un module optique pour l'observation. L'appareil peut suivre comment les sphéroïdes 3D se forment et comment les cellules migrent loin d'eux. Il peut également observer les changements de forme des sphéroïdes lorsque deux sphéroïdes fusionnent.

Validation de l'appareil pour des observations de qualité

Pour s'assurer que ce nouvel appareil fonctionne bien, les chercheurs ont effectué des tests. Ils l'ont placé sur un microscope standard et ont confirmé qu'il fournit de bonnes images depuis les vues inférieure et latérale des sphéroïdes. Le poids de l'appareil est étonnamment léger, ce qui le rend facile à manipuler. La configuration permet aux chercheurs d'observer la structure 3D des sphéroïdes sans les endommager.

Observation de la dynamique de croissance des sphéroïdes

Avec le nouvel appareil, les chercheurs peuvent suivre comment les sphéroïdes changent au fil du temps. Par exemple, lorsque des cellules de Cancer de la prostate sont placées dans des micro-puits d'agarose, elles s'étalent d'abord puis commencent à se regrouper. Avec le temps, elles forment une forme ronde. Cela peut être observé sous des angles inférieurs et latéraux, donnant un aperçu complet de leur croissance et de leur structure.

Étude de la Migration cellulaire depuis les sphéroïdes

L'étude de la manière dont les cellules migrent des sphéroïdes est essentielle pour comprendre comment les tumeurs se propagent. Les chercheurs peuvent observer les changements dans la structure des sphéroïdes alors que certaines cellules se déplacent vers l'extérieur pour former de nouvelles zones. Suivre ces changements depuis les vues inférieure et latérale aide à rassembler des données importantes sur le comportement des cellules dans leur environnement naturel.

Investigation du noyau sombre des sphéroïdes

Une caractéristique commune des sphéroïdes tumoraux plus grands est la formation d'un noyau sombre, ce qui peut indiquer des zones de faible apport en oxygène et en nutriments. Observer comment ce noyau se développe peut fournir des informations sur la santé de la tumeur. Les chercheurs ont découvert que le temps nécessaire à la formation du noyau sombre est lié au nombre de cellules initialement présentes dans le sphéroïde.

Observation de la fusion entre sphéroïdes

La fusion entre sphéroïdes est un autre domaine de recherche crucial. Grâce au nouvel appareil, les chercheurs peuvent observer deux sphéroïdes se rapprocher et observer comment leurs formes et structures changent au fil du temps. L'appareil permet de mesurer avec précision les angles et les longueurs pendant le processus de fusion, offrant une vue complète de l'interaction des cellules.

Évaluation des effets du traitement sur les sphéroïdes

L'impact des traitements sur les sphéroïdes peut être étudié en détail. Par exemple, les chercheurs peuvent appliquer des médicaments de chimiothérapie ou des cellules immunitaires aux sphéroïdes et observer comment ces traitements affectent leur taille et leur forme. Grâce à cette méthode, ils peuvent mesurer les réponses et mieux comprendre comment les thérapies pourraient fonctionner dans un environnement tumoral réel.

Conclusion

Le développement d'un appareil d'observation multi-angle est une avancée significative dans l'étude des sphéroïdes tumoraux 3D. Cet outil permet aux chercheurs d'obtenir une compréhension plus approfondie du comportement des tumeurs, de la migration cellulaire et des effets des traitements. En fournissant une image plus claire de la nature tridimensionnelle des sphéroïdes, cette méthode peut conduire à de meilleures stratégies pour lutter contre le cancer à l'avenir. Grâce à des recherches et des innovations continues, les scientifiques espèrent améliorer leur capacité à étudier les tumeurs et, finalement, améliorer les résultats pour les patients.

Source originale

Titre: Non-destructive in situ monitoring of structural changes of 3D tumor spheroids during the formation, migration, and fusion process

Résumé: For traditional laboratory microscopy observation, the multi-dimensional, real-time, in situ observation of three-dimensional (3D) tumor spheroids has always been the pain point in cell spheroid observation. In this study, we designed a side-view observation petri dish/device that reflects light, enabling in situ observation of the 3D morphology of cell spheroids using conventional inverted laboratory microscopes. We used a 3D-printed handle and frame to support a first surface mirror, positioning the device within a cell culture petri dish to image cell spheroid samples. The imaging conditions, such as the distance between the mirror and the 3D spheroids, the light source, and the impact of the culture medium, were systematically studied to validate the in-situ side-view observation. The results proved that placing the surface mirror adjacent to the spheroids enables non-destructive in situ real-time tracking of tumor spheroid formation, migration, and fusion dynamics. The correlation between spheroid thickness and dark core appearance under light microscopy and the therapeutic effects of chemotherapy doxorubicin and Natural Killer cells on spheroidss 3D structure was investigated.

Auteurs: Ling Yu, K. Ning, Y. Xie, W. Sun, L. Feng, C. Fang, R. Pan, Y. Li

Dernière mise à jour: 2024-11-27 00:00:00

Langue: English

Source URL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.07.25.605064

Source PDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.07.25.605064.full.pdf

Licence: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/

Changements: Ce résumé a été créé avec l'aide de l'IA et peut contenir des inexactitudes. Pour obtenir des informations précises, veuillez vous référer aux documents sources originaux dont les liens figurent ici.

Merci à biorxiv pour l'utilisation de son interopérabilité en libre accès.

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