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Klebsiella pneumoniae: Lidando com a Resistência a Antibióticos

Pesquisas identificam genes essenciais para tratar infecções por Klebsiella pneumoniae.

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Klebsiella Pneumoniae é um tipo de bactéria que pode ser encontrada em vários lugares, como no meio ambiente e em hospitais. Essas bactérias são conhecidas por causar várias infecções, especialmente em pessoas com o sistema imunológico debilitado ou com problemas de saúde como diabetes ou alcoolismo. As infecções podem variar de pneumonia grave a infecções do trato urinário e infecções sanguíneas.

Uma grande preocupação com a Klebsiella pneumoniae é que ela pode resistir a muitos antibióticos, dificultando o tratamento. Essa resistência geralmente leva a taxas de mortalidade mais altas e estadias mais longas nos hospitais, o que pesa no sistema de saúde. Um tipo específico de resistência, que afeta antibióticos comuns como a penicilina, é particularmente preocupante. As bactérias podem adquirir essa resistência através de elementos genéticos especiais chamados plasmídeos.

Para lidar com o problema das cepas resistentes de Klebsiella pneumoniae, os pesquisadores estão super interessados em encontrar novas formas de tratar as infecções. Identificar os genes que essas bactérias precisam para crescer e sobreviver em ambientes humanos pode ajudar a encontrar novas opções de tratamento.

Variantes de Klebsiella pneumoniae

Estudos recentes mostraram que diferentes cepas de Klebsiella pneumoniae podem existir em ambientes clínicos (hospitais) e no meio ambiente. Duas principais tipos de cepas clínicas, conhecidas como clássicas e hipervirulentas, têm características e fatores de virulência diferentes. Enquanto alguns genes ligados à capacidade dessas bactérias de causar doenças são conhecidos, ainda tem muito a aprender.

Klebsiella pneumoniae pode infectar o trato urinário e sobreviver na corrente sanguínea, contando com vários fatores de virulência. Pesquisas mostraram que certos componentes de superfície dessas bactérias, como lipopolissacarídeos e polissacarídeos, ajudam elas a resistir aos ataques do sistema imunológico humano.

Sequenciamento de Inserção de Transposon (TIS)

Para estudar quais genes são essenciais para Klebsiella pneumoniae, os cientistas usam um método chamado Sequenciamento de Inserção de Transposon (TIS). Essa técnica ajuda os pesquisadores a identificar quais genes são necessários para as bactérias crescerem e prosperarem em diferentes condições.

Em um estudo recente, os cientistas criou uma biblioteca de transposons de uma cepa específica de Klebsiella pneumoniae conhecida como ECL8. O objetivo era descobrir quais genes eram vitais para a sobrevivência em condições de laboratório, urina humana e soro humano.

Ao analisar a biblioteca de transposons, geraram uma lista de Genes Essenciais para o crescimento no laboratório e durante a exposição a urina e soro de humanos. Essas informações podem oferecer insights valiosos sobre como essas bactérias sobrevivem e podem levar a novos alvos de tratamento.

Cepas Bacterianas e Condições de Cultivo

No estudo, cepas específicas de Klebsiella pneumoniae foram cultivadas usando meios de crescimento ricos. As bactérias foram cultivadas em um ambiente controlado para garantir que chegassem ao estágio certo de crescimento para a experimentação. Após o crescimento, os cientistas prepararam amostras para mais testes.

A pesquisa envolveu a criação de uma biblioteca de mutantes, cada um com uma alteração genética específica, para avaliar suas habilidades de crescimento em diferentes ambientes.

Triagem para Crescimento em Urina Humana

Para uma parte do estudo, os pesquisadores queriam ver como a Klebsiella pneumoniae poderia crescer na urina humana. Eles juntaram urina de voluntários saudáveis e misturaram com a biblioteca de mutantes. Em várias rodadas de crescimento, eles mediram quão bem cada mutante se saiu na urina em comparação com um grupo controle crescido em condições de laboratório.

Os resultados mostraram que apenas um pequeno número de genes eram necessários para a sobrevivência na urina. Alguns desses genes estavam ligados à capacidade das bactérias de absorver ferro, que é crucial para o crescimento delas. Os níveis de ferro na urina podem limitar como as bactérias prosperam, ressaltando a importância da aquisição de ferro para a sobrevivência delas.

Triagem para Crescimento em Soro Humano

Outro aspecto chave do estudo envolveu expor as bactérias ao soro humano, que é rico em fatores imunológicos. O objetivo era identificar quais genes permitem que Klebsiella pneumoniae sobrevida na presença de anticorpos humanos.

Após expor a biblioteca de mutantes ao soro, os pesquisadores descobriram que muitos genes eram necessários para resistir à morte induzida pelo soro. Alguns desses genes estavam relacionados à produção da camada externa das bactérias, que ajuda a protegê-las do ataque do sistema imunológico.

Identificando Genes Essenciais

O estudo forneceu uma lista abrangente de genes essenciais para o crescimento de Klebsiella pneumoniae ECL8. Analisando os pontos de inserção de transposon, os pesquisadores determinaram quais genes eram críticos para a sobrevivência tanto em condições de urina quanto de soro.

Eles descobriram genes comuns que eram importantes para ambos os ambientes, sugerindo que essas funções são vitais para as bactérias em diferentes estágios de infecção. Por exemplo, genes envolvidos na aquisição de ferro eram cruciais para a sobrevivência em ambas as condições, destacando a importância do ferro para essas bactérias em hospedeiros humanos.

Implicações para o Tratamento

As descobertas têm implicações significativas para tratar infecções por Klebsiella pneumoniae. Ao entender os genes essenciais para a sobrevivência em diferentes ambientes, os pesquisadores podem desenvolver terapias direcionadas que inibem a capacidade das bactérias de crescer e resistir ao tratamento.

Novas estratégias terapêuticas podem focar em interromper as vias de absorção de ferro ou direcionar as camadas externas protetoras das bactérias. Também há potencial para vacinas que visem os fatores de virulência identificados para prevenir infecções em populações vulneráveis.

Conclusão

Klebsiella pneumoniae é um patógeno complexo capaz de causar infecções sérias, especialmente em indivíduos imunocomprometidos. Essa pesquisa lança luz sobre os genes essenciais que permitem que essas bactérias sobrevivam em ambientes humanos como urina e soro. Ao identificar esses determinantes genéticos, os cientistas podem trabalhar para desenvolver novas terapias, oferecendo esperança contra infecções causadas por esse organismo multirresistente.

A pesquisa contínua será crucial para expandir nossa compreensão sobre Klebsiella pneumoniae e desenvolver estratégias eficazes contra sua crescente ameaça em ambientes de saúde. À medida que nosso conhecimento continuar a evoluir, o potencial para tratamentos inovadores para combater esse patógeno persistente aumentará.

Fonte original

Título: Transposon mutagenesis screen in Klebsiella pneumoniae identifies genetic determinants required for growth in human urine and serum

Resumo: Klebsiella pneumoniae is a global public health concern due to the rising myriad of hypervirulent and multi-drug resistant clones both alarmingly associated with high mortality. The molecular microbial genetics underpinning these recalcitrant K. pneumoniae infections is unclear, coupled with the emergence of lineages resistant to nearly all present day clinically important antimicrobials. In this study, we performed a genome-wide screen in K. pneumoniae ECL8, a member of the endemic K2-ST375 pathotype most often reported in Asia, to define genes essential for growth in a nutrient-rich laboratory medium (Luria-Bertani medium), human urine and serum. Through transposon directed insertion-site sequencing (TraDIS), a total of 427 genes were identified as essential for growth on LB agar, whereas transposon insertions in 11 and 144 genes decreased fitness for growth in either urine or serum, respectively. These studies provide further knowledge on the genetics of this pathogen but also provide a strong impetus for discovering new antimicrobial targets to improve current therapeutic options for K. pneumoniae infections.

Autores: Ian R. Henderson, J. Gray, V. V. L. Torres, E. C. Goodall, S. A. McKeand, D. Scales, C. Collins, L. Wetherall, Z. J. Lian, J. A. Bryant, M. T. Milner, K. Dunne, C. Icke, J. Rooke, T. Schneiders, P. A. Lund, A. F. Cunningham, J. A. Cole

Última atualização: 2024-02-07 00:00:00

Idioma: English

Fonte URL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2023.05.31.543172

Fonte PDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2023.05.31.543172.full.pdf

Licença: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/

Alterações: Este resumo foi elaborado com a assistência da AI e pode conter imprecisões. Para obter informações exactas, consulte os documentos originais ligados aqui.

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