Presença do Vírus Zika em Sindh, Paquistão
Estudo revela vírus Zika circulando em Sindh, mostrando os desafios de detecção.
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Índice
- Desafios na Detecção
- Objetivo do Estudo
- Ética e Recrutamento de Pacientes
- Locais do Estudo
- Critérios de Inclusão e Exclusão
- Coleta de Dados dos Pacientes
- Resultados dos Testes
- Testes de PCR em Tempo Real
- Cultivo do Vírus
- Testes de Neutralização
- Análise Estatística
- Descobertas sobre o ZIKV em Sindh
- Conclusão sobre a Presença do ZIKV
- Fonte original
O vírus Zika (ZIKV) foi identificado como uma causa de Febre em crianças e adultos ao redor do mundo. No entanto, os países da Ásia Ocidental e do Oriente Médio ainda não viram muitos casos. No Paquistão, alguns casos mostraram sinais de Anticorpos contra o ZIKV, mas a confiabilidade dessa informação é incerta por causa das dificuldades em detectar vírus semelhantes.
O ZIKV é um vírus que mede cerca de 40 a 60 nanômetros. Ele tem uma camada protetora e contém material genético feito de RNA de fita simples, que tem cerca de 11.000 letras. Esse RNA leva instruções para fazer proteínas que ajudam o vírus a funcionar. O ZIKV tem várias proteínas que ajudam a infectar células hospedeiras e se multiplicar.
Nos últimos anos, surtos de outros vírus como Dengue e chikungunya afetaram muitas pessoas no Paquistão. A chikungunya foi confirmada recentemente em Karachi, a maior cidade do país. Pode haver casos de ZIKV que não foram relatados, já que seus sintomas podem ser leves e parecer com os de outras infecções virais. Um sistema de testes adequado é necessário para diferenciar o ZIKV de outros vírus relacionados.
Desafios na Detecção
O ZIKV é frequentemente confundido com outros vírus porque compartilham sintomas semelhantes. A falta de casos confirmados no Paquistão não significa que o vírus não esteja se espalhando. Na verdade, é provável que o ZIKV esteja presente, mas não relatado devido a sintomas leves que não levam as pessoas a procurar ajuda médica. O ZIKV é transmitido pelo mesmo tipo de mosquito que a dengue e a chikungunya, e eles podem apresentar sintomas semelhantes em indivíduos infectados.
Pesquisas mostraram que o ZIKV circula frequentemente junto com outros vírus relacionados, como dengue, vírus do Nilo Ocidental, vírus da encefalite japonesa e vírus da febre amarela. Testes de anticorpos podem ser complicados, pois a presença de anticorpos de um vírus pode afetar os resultados de outro. Isso torna difícil saber com certeza se alguém tem ZIKV. Infelizmente, não foram feitas muitas pesquisas no Paquistão para esclarecer a situação.
Objetivo do Estudo
O principal objetivo deste estudo foi verificar se o ZIKV está por trás de casos de febre em pessoas de diferentes áreas da província de Sindh, no Paquistão. Os pesquisadores usaram métodos de teste específicos para buscar o ZIKV em pacientes que apresentavam febre e outros sintomas semelhantes.
Ética e Recrutamento de Pacientes
Antes de começar o estudo, os pesquisadores obtiveram aprovação de um comitê de ética local. Pacientes com febre durando de 5 a 7 dias foram abordados por profissionais de saúde treinados. As informações sobre o estudo foram compartilhadas com eles, e somente aqueles que concordaram em participar foram incluídos.
Locais do Estudo
Cinco hospitais na província de Sindh foram escolhidos para o estudo. Os membros da equipe foram treinados para coletar dados e amostras dos pacientes. Os hospitais envolvidos no estudo estavam localizados em grandes cidades, proporcionando bom acesso a uma variedade de pacientes.
Critérios de Inclusão e Exclusão
Pacientes com idades entre 10 e 65 anos que mostraram sintomas de febre eram elegíveis para participar. Aqueles fora dessa faixa etária ou diagnosticados com outras doenças específicas, como gripe ou tuberculose, não foram incluídos no estudo.
Coleta de Dados dos Pacientes
Um estudo transversal foi realizado, e um total de 745 pacientes foram incluídos de abril de 2015 a junho de 2017. Amostras de sangue foram coletadas para testar o ZIKV, e vários fatores, incluindo idade, gênero e sintomas foram registrados. Os sintomas avaliados incluíram febre, erupção cutânea, dores no corpo, dores de cabeça e outros sinais de doença. Testes de sangue foram realizados para verificar outros indicadores de saúde.
Os pesquisadores consideraram a presença de anticorpos do ZIKV como um sinal de possível infecção, seguindo diretrizes estabelecidas pelas autoridades de saúde.
Resultados dos Testes
Dos 745 pacientes, 4,9% testaram positivo para anticorpos do ZIKV sem mostrar sinais de infecção por outros vírus semelhantes. Entre aqueles que mostraram sinais de infecção, alguns tinham anticorpos que reagiam a outros vírus também.
As amostras de sangue foram testadas para o vírus da dengue primeiro. Aqueles que testaram negativo para dengue foram então testados para o ZIKV. Os níveis de anticorpos do ZIKV no sangue dos pacientes forneceram insights sobre uma possível infecção pelo ZIKV.
Testes de PCR em Tempo Real
O RNA, o material genético do ZIKV, foi extraído das amostras dos pacientes. Esse processo de extração foi feito cuidadosamente para preparar as amostras para os testes. Usando ferramentas e métodos específicos, os pesquisadores pretendiam detectar a presença do RNA do ZIKV.
Cultivo do Vírus
As equipes de pesquisa cultivaram o ZIKV em um ambiente de laboratório usando células especiais. Eles monitoraram o crescimento do vírus para garantir resultados de teste precisos. O vírus foi cultivado passo a passo para analisar seu comportamento.
Testes de Neutralização
Para confirmar infecções por ZIKV, os pesquisadores realizaram um teste de neutralização. Esse teste envolveu misturar o soro do paciente com o vírus em uma cultura de laboratório para ver se o soro poderia impedir o vírus de causar a infecção. Resultados positivos indicaram que os anticorpos no soro do paciente poderiam lutar efetivamente contra o ZIKV.
Análise Estatística
Os pesquisadores usaram ferramentas estatísticas para analisar os dados. Eles compararam diferentes categorias de pacientes com base nos resultados dos testes para encontrar padrões entre os que testaram positivo, negativo ou mostraram reatividade cruzada com outros vírus.
Descobertas sobre o ZIKV em Sindh
Dos 745 pacientes avaliados, uma pequena porcentagem testou positivo para anticorpos do ZIKV. As amostras com reatividade cruzada mostraram que alguns indivíduos tinham anticorpos que podem reagir com múltiplos flavivírus como dengue e vírus do Nilo Ocidental. A maioria dos pacientes apresentou sintomas leves.
Os sintomas clínicos comuns entre os pacientes positivos para ZIKV incluíam febre, mas sintomas específicos como erupção cutânea e dor de cabeça eram comuns em todos os três grupos de pacientes. Gênero e idade não afetaram significativamente as taxas de infecção por ZIKV.
Conclusão sobre a Presença do ZIKV
Com base nas descobertas, parece que o ZIKV está circulando no Paquistão, especialmente na região de Sindh. O estudo destaca a necessidade de melhores sistemas de teste e monitoramento para confirmar infecções por ZIKV, já que podem imitar outras doenças como a dengue.
Confirmando a presença do ZIKV por meio de testes específicos, os pesquisadores pretendem melhorar a compreensão da disseminação desse vírus no Paquistão. O estudo indica uma necessidade urgente de pesquisa contínua para monitorar o ZIKV e seu impacto na saúde pública.
Os esforços futuros devem se concentrar em métodos de teste simultâneos, incluindo amostras de soro e urina, para obter uma imagem mais clara das infecções por ZIKV na região. Isso poderia ajudar os profissionais de saúde a diagnosticar e gerenciar melhor os casos de febre entre os pacientes.
Por meio de uma vigilância e testes adequados, os oficiais de saúde podem mapear os riscos e se preparar para possíveis aumentos nos casos de ZIKV, especialmente durante a temporada de monções, quando as populações de mosquitos aumentam.
Título: Zika Virus looming epidemic in Pakistan: seroprevalence findings by plaque reduction neutralization test in the Sindh Region of Pakistan
Resumo: BackgroundZika virus (ZIKV) has emerged as a cause of febrile illness in children and adults globally. West Asian and Middle Eastern countries have not yet experienced the widespread emergence of ZIKV. In Pakistan, detection of ZIKV antibodies have been reported. However, the validity of this data is questionable given the current understanding of flaviviral antigenic cross-reactivity. In order to determine if ZIKV is circulating in the Sindh region of Pakistan, patients presenting to healthcare centers with an acute febrile dengue-like illness were evaluated for ZIKV infection. MethodsDengue virus (DENV) screening in patients was performed using a commercial ELISA Rapid Test NS1 antigen capture test. All DENV negative samples were tested for Zika virus, using a commercial IgM capture ELISA kit. Additionally, a plaque reduction neutralization test (PRNT) was performed to measure neutralizing antibodies. Singleplex, two-step Real-time PCR using general primers and probes was performed for the detection of Zika virus nucleic acid. ResultsPatients with acute dengue-like illness (DLI) presenting at healthcare centers in different sites throughout the Sindh region of Pakistan were recruited. A total of 745 patient samples were tested for ZIKV via IgM ELISA and RT-PCR. Thirty-seven samples (4.9%) tested positive for ZIKV IgM without any cross-reactivity to other flaviviruses tested simultaneously. These were considered as presumptive positive for ZIKV, selected presumptive positive samples (n=20) were confirmed using PRNT50 using Vero cells. All 20 samples showed ZIKV neutralization at PRNT50. ConclusionsOur study provides evidence that ZIKV is circulating in the Sindh region of Pakistan and is a probable cause of clinical dengue-like illness (DLI) cases that are seen seasonally in Pakistan.
Autores: Erum Khan, K. imtiaz, J. Farooqui, K. L. Barr, a. A. R. Kanji, D. Prakoso, Z. Azizullah, M. T. Long
Última atualização: 2023-05-01 00:00:00
Idioma: English
Fonte URL: https://www.medrxiv.org/content/10.1101/2023.04.27.23289241
Fonte PDF: https://www.medrxiv.org/content/10.1101/2023.04.27.23289241.full.pdf
Licença: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
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