Avanços nas Técnicas de Isolamento de Miócitos Usando Microfluídica

A China é um dos maiores produtores e consumidores de carne de frango. A indústria de criação de frangos é fundamental para o setor agrícola e contribui bastante pra economia rural. À medida que a indústria cresce, ela melhora a dieta das pessoas que vivem em cidades e vilarejos, fornecendo nutrientes importantes como proteína. Além disso, se tornou um jogador importante no mercado global de carnes, com uma demanda crescente por frango de qualidade.

#Importância dos Mioblastos

Os mioblastos são células especiais que formam fibras musculares. Elas vêm de células-tronco e desempenham um papel crucial na reparação dos Músculos após uma lesão. Os pesquisadores estão interessados nessas células porque elas podem se transformar em diferentes tipos de células musculares e ajudar na engenharia de tecidos. Para estudar os mioblastos, é preciso isolá-los dos tecidos musculares. Os métodos tradicionais de separação dos mioblastos, como usar diferentes técnicas de adesão, gradientes de densidade e citometria de fluxo, têm seus desafios, como ser demorados e caros.

#Nova Tecnologia: Microfluídica

A microfluídica é uma nova forma de separar células que aproveita como os fluidos se comportam em pequenos espaços. Essa técnica é mais rápida, usa menos amostra e é mais fácil de configurar em comparação com os métodos tradicionais. A microfluídica já foi usada com sucesso para isolar e detectar diferentes tipos de células. Existem duas abordagens principais dentro da microfluídica: métodos ativos e passivos. Os métodos ativos usam forças como luz ou eletricidade, enquanto os passivos usam o design do chip para separar as células no fluido. Entre as técnicas passivas, uma popular é a Deslocação Lateral Determinística (DLD), que é simples e eficaz na separação de vários tipos de células.

#Como Funciona o DLD

O DLD usa um design especial de pilares em um fluido para separar partículas com base no tamanho. Quando as células passam pelas lacunas entre esses pilares, as células menores seguem o caminho original do fluxo, enquanto as maiores são empurradas para o lado. Essa separação permite que os pesquisadores isolem tipos específicos de células, como os mioblastos, de uma mistura.

Por exemplo, em uma configuração de DLD, dois tipos de células são testadas: mioblastos que são pequenos e células agrupadas que são maiores. Dependendo do tamanho, essas células vão seguir caminhos diferentes pelo chip. Esse método é eficaz para isolar mioblastos de outros tipos de células presentes no tecido muscular.

#Desenvolvimento de Mioblastos em Frangos

Nos frangos Wenchang, o desenvolvimento do tecido muscular é um processo crítico que acontece durante as fases embrionárias. Começando por volta do dia 7 ao dia 15, as células musculares (mioblastos) crescem e se preparam para formar as fibras musculares maduras. Pesquisas mostram que o melhor momento para isolar esses mioblastos é por volta do dia 12, quando suas quantidades estão mais altas, e ainda não começaram a formar estruturas mais complexas.

#Métodos para Isolar Mioblastos

Para isolar mioblastos, os pesquisadores começam preparando o tecido muscular do frango. Depois de limpar e processar as amostras, eles usam produtos químicos específicos para quebrar o tecido e obter uma suspensão celular. Essa mistura passa pelo chip DLD para separação.

O design do chip tem um papel importante nesse processo. Os pesquisadores usaram pilares triangulares, que mostraram ser mais eficazes na separação de células. O chip pode ser ajustado para controlar o fluxo e ajuda a maximizar a recuperação dos mioblastos, mantendo-os vivos.

#Observando e Contando Células

Depois do processo de separação, os pesquisadores coletam as células que saem dos diferentes saídas do chip. Eles observam essas células sob um microscópio para verificar seus tamanhos e contar quantas de cada tipo existem. Os pesquisadores também avaliam a pureza dos mioblastos coletados para garantir que não estejam misturados com outras células indesejadas.

#Identificando Mioblastos

Para confirmar que as células são realmente mioblastos, marcadores específicos são usados. Corantes fluorescentes ajudam a destacar os mioblastos sob um microscópio. Os mioblastos mostram certas cores quando tingidos, facilitando a identificação, enquanto outros tipos de células, como fibroblastos e aglomerados maiores, não mostram esses marcadores.

#Análise dos Resultados

Os resultados desses processos de isolamento mostram que o chip DLD coleta de forma eficaz uma alta porcentagem de mioblastos. A maioria das células da primeira saída do chip é confirmada como mioblastos, enquanto as outras saídas contêm uma mistura de diferentes tipos de células.

#Conclusão

O estudo indica que a tecnologia microfluídica, especialmente o método DLD, pode isolar mioblastos de forma bem-sucedida e eficiente do músculo de frango. Essa abordagem não só melhora as taxas de recuperação celular, mas também mantém a viabilidade das células. Isolar mioblastos é importante para estudos futuros sobre crescimento e reparo muscular e, com os avanços na tecnologia microfluídica, os pesquisadores podem continuar a aprimorar sua compreensão do desenvolvimento muscular em aves e outros animais.