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細菌の生存における小さなRNAの役割

バクテリアにおける小さなRNAの重要性、特にストレス応答での役割を探ってみよう。

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小型RNA:バイ菌生存の鍵小型RNA:バイ菌生存の鍵割を調査中。小さなRNAの細菌の適応と病気における役
目次

小さな調節RNA、よくsRNAって呼ばれるやつは、バイ菌の遺伝子の動きをコントロールするのに重要なんだ。バイ菌が適応したり、生き延びたり、成長したりするのを助けるいろんなプロセスに関わってる。sRNAの種類によって、他のRNA分子と直接連携したり、それに関わるタンパク質に影響を与えたりすることができる。

sRNAの種類

バイ菌には主に2つのsRNAのタイプがある。1つのタイプはRNA分子と直接結合して、塩基対を形成する。このインタラクションは、RNAがどれだけ作られるか、どう使われるか、どれくらい長く続くかを変えることができる。もう1つのタイプは直接結合しないけど、RNAやDNAに結合するタンパク質に干渉することで、RNAの量に影響を与えるんだ。

sRNAが遺伝子の活性を調整する一般的な方法の1つは、バイ菌の翻訳機構をブロックすること。RNAの翻訳プロセスを開始するために重要な部分にくっつくことで、細胞がタンパク質を作るのを妨げる。その結果、機械がRNAを認識できなくなってタンパク質を作れなくなるんだ。

バイ菌におけるsRNAの重要性

E. coliのようなグラム陰性バイ菌でsRNAがどう機能するかについてはかなり学ばれたけど、ストレプトコッカス・ニューモニエ(肺炎球菌)のようなグラム陽性バイ菌での役割についてはまだまだ解明されてないことが多い。S. pneumoniaeは肺炎を引き起こす大きな原因で、毎年多くの人が亡くなってるから、その遺伝子調節を理解することは感染症と戦う手助けになる。

S. pneumoniaeにおけるsRNAの発見

研究者たちはS. pneumoniaeに数百の潜在的なsRNAを見つけてるけど、そのほとんどの役割はまだ不明なんだ。初期の研究ではCcn sRNAとして知られる5つの関連するsRNAが確認された。これは、バイ菌が抗生物質などの特定のストレッサーに遭遇したときに作られることがわかった。その中の1つ、CcnAは、バイ菌が細胞外に出る能力に悪影響を与えることがわかった。これは生存や感染過程にとって重要なんだ。

Ccn sRNAと病原性

最近の研究結果によると、5つのCcn sRNAはS. pneumoniaeが病気を引き起こす能力に関わってる。これらのsRNAをコードする遺伝子を削除すると、肺炎のマウスモデルで特定のS. pneumoniae株の病原性が減少したんだ。それに、これらのsRNAがないと、バイ菌は亜鉛に敏感になり、成長や生存が難しくなる。

Ccn sRNAが亜鉛耐性に及ぼす影響

亜鉛はバイ菌にとって欠かせない栄養素だけど、過剰な亜鉛は有害なんだ。研究者たちはCcn sRNAがないS. pneumoniaeが過剰な亜鉛に対処するのに苦労することを発見した。マンガンや酸素を減少させる化学物質など他の物質を加えることで、バイ菌は亜鉛ストレスから回復する助けになることがわかった。これはCcn sRNAがバイ菌内の亜鉛レベルを管理するのを助けて、困難な状況でも繁栄できるようにしてることを示唆してる。

S. pneumoniaeの成長研究

異なる株のS. pneumoniaeを研究した実験では、特定のsRNAの有無が成長率に影響を与えることがわかった。いろんな条件でバイ菌の成長をモニターして、Ccn sRNA遺伝子が削除された株と正常の株との間で成長の違いが大きかった。

亜鉛を加えた状態でこれらのバイ菌を育てたとき、Ccn sRNAがない株では成長が顕著に減少した。この効果は、Ccn sRNAが正常な株よりも少なく見えた。これにより、これらの分子が高い亜鉛レベルに対するバイ菌の反応を管理するのに重要だってわかる。

遺伝子発現の変化

成長の違いを理解するために、研究者たちはCcn sRNAの有無でバイ菌のどの遺伝子がオンになったりオフになったりしたかを調べた。多くの金属の取り扱いに関連する遺伝子が影響を受けたことがわかった。特に、Ccn sRNAが取り除かれると、亜鉛の取り込みや輸出に関わるいくつかの遺伝子が異なるレベルで発現した。

これは、Ccn sRNAを取り除くことでバイ菌の金属管理システムに不均衡が生じ、過剰な亜鉛による毒性リスクが増加することを示唆してる。

亜鉛不均衡の結果

高レベルの未調整の亜鉛はS. pneumoniaeの重要な酵素の機能を妨げることがある。これらの酵素の多くは、正しく機能するためにマンガンを必要とする。研究結果は、Ccn sRNAがないと、バイ菌がさまざまな細胞機能に必要なマンガンレベルを維持するのが難しくなることを示してる。

sRNAはバイ菌が自由亜鉛を持ちすぎないように助けるみたいで、これがマンガンを必要とする酵素に干渉する可能性がある。自由亜鉛の蓄積は、マンガン依存性の酵素が正しく働かなくなる状態を引き起こすことがある。

酸素と酸化ストレスの役割

実験ではバイ菌の反応における酸素の役割も探求された。酸素の量を減らすことで、亜鉛の過剰がバイ菌の成長に及ぼす影響が減少した。これは、亜鉛が多すぎると酸化ストレスが生じる可能性があり、Ccn sRNAがないとバイ菌が成長するのが難しい要因だって示してる。

別のアプローチでは、特定の酵素であるスーパーオキシドジスムターゼA(SodA)を調べたんだけど、Ccn sRNAがないバイ菌ではそのレベルが低かった。この酵素は酸化ストレスの管理に重要で、活動が減ることでこれらのバイ菌が高亜鉛環境で苦労する理由が説明できるかもしれない。

Ccn sRNAの役割をまとめると

要するに、Ccn sRNAはS. pneumoniaeが厳しい環境、特に過剰な亜鉛に直面したときの生存に重要なんだ。彼らは亜鉛やマンガンなどの重要な金属のバランスを維持し、バイ菌の成長を妨げる毒性を防ぐのを助けてる。Ccn sRNAの存在も酸化ストレスの管理に寄与して、ストレスの多い状況でもバイ菌が繁栄できるようにしてる。

結論

Ccn sRNAに関する研究は、バイ菌が環境に適応し生き残るために使う複雑な調節システムに光を当ててる。これらのプロセスを理解することで、S. pneumoniaeのようなバイ菌による感染症と戦う方法に貴重な洞察が得られる。これらの小さなRNAやそれらが制御する経路をターゲットにすることで、新しい治療法が開発できるかもしれない。

バイ菌感染との戦いが続く中、Ccn sRNAに関する発見は将来の研究に対する有望な道を提供していて、命を救う可能性がある革新につながるかもしれない。バイ菌の小さなRNAの探求は、さらに調査する余地がある分野で、実験室を超えて臨床実践にも広がる影響があるんだ。

オリジナルソース

タイトル: The five homologous CiaR-controlled Ccn sRNAs of Streptococcus pneumoniae modulate Zn-resistance.

概要: Zinc is a vital transition metal for Streptococcus pneumoniae, but is deadly at high concentrations. In S. pneumoniae, elevated intracellular free Zn levels result in mis-metallation of key Mn-dependent metabolic and superoxide detoxifying enzymes resulting in Zn intoxication. Here, we report our identification and characterization of the function of the five homologous, CiaRH-regulated Ccn sRNAs in controlling S. pneumoniae virulence and metal homeostasis. We show that deletion of all five ccn genes (ccnA, ccnB, ccnC, ccnD, and ccnE) from S. pneumoniae strains D39 (serotype 2) and TIGR4 (serotype 4) causes Zn hypersensitivity and an attenuation of virulence in a murine invasive pneumonia model. We provide evidence that bioavailable Zn disproportionately increases in S. pneumoniae strains lacking the five ccn genes. Consistent with a response to Zn intoxication or relatively high intracellular free Zn levels, expression of genes encoding the CzcD Zn exporter and the Mn-independent ribonucleotide reductase, NrdD-NrdG, were increased in the {Delta}ccnABCDE mutant relative to its isogenic ccn+ parent strain. The growth inhibition by Zn that occurs as the result of loss of the ccn genes is rescued by supplementation with Mn or OxyraseTM, a reagent that removes dissolved oxygen. Lastly, we found that the Zn-dependent growth inhibition of the {Delta}ccnABCDE strain was not altered by deletion of sodA, whereas the ccn+{Delta}sodA strain phenocopied the {Delta}ccnABCDE strain. Overall, our results indicate that the Ccn sRNAs have a crucial role in preventing Zn intoxication in S. pneumoniae. AUTHOR SUMMARYZn and Mn are essential micronutrients for many bacteria, including Streptococcus pneumoniae. While Zn performs vital structural or catalytic roles in certain proteins, in excess, Zn can inhibit Mn uptake by S. pneumoniae and displace, but not functionally replace Mn from key enzymes including superoxide dismutase A (SodA). Here, we show that the Ccn small regulatory RNAs promote S. pneumoniae resistance to Zn intoxication. Furthermore, we demonstrate that these small regulatory RNAs modulate the ability of S. pneumoniae to cause invasive pneumonia. Altogether, these findings reveal a new layer of regulation of S. pneumoniae Zn homeostasis and suggest that there are factors in addition to known transporters that modulate intracellular, bioavailable Zn levels.

著者: Nicholas R. De Lay, N. Verma, D. Sinha, A. Garrett, M. K. Osterberg, S. Reiling, D. Porter, D. P. Giedroc, M. E. Winkler

最終更新: 2024-04-04 00:00:00

言語: English

ソースURL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2023.11.07.565944

ソースPDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2023.11.07.565944.full.pdf

ライセンス: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/

変更点: この要約はAIの助けを借りて作成されており、不正確な場合があります。正確な情報については、ここにリンクされている元のソース文書を参照してください。

オープンアクセスの相互運用性を利用させていただいた biorxiv に感謝します。

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