食品安全におけるバチルス・セレウス芽胞の調査
研究は、B. cereusのスポアがどのように食品生産で付着し、生き残るかを調べてるよ。
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バチルス・セレウスは、土壌や水、植物などさまざまな環境に存在する細菌のグループだよ。これらの細菌は食品を汚染することがあり、食中毒を引き起こすことで知られている。B. セレウスに関連する食中毒には、嘔吐を引き起こすタイプと下痢を引き起こすタイプの2つがあるんだ。B. セレウスは食品成分を分解することもできて、食品の品質を下げたり、保存期間を短くしたりする。
食品生産者にとって大きな問題は、B. セレウスが非常に頑丈な芽胞を形成できることだよ。芽胞は熱や放射線、化学物質などの有害な条件にも耐えられるんだ。この芽胞のおかげで、食品や生産ツールの清掃がとても難しく、しかも高くつくんだ。芽胞は特別なコアと保護層を持っていて、厳しい状況に耐えるのを助けている。
研究によると、B. セレウスの芽胞は、ステンレススチールやプラスチックなどの食品生産施設の表面によりよく付着することが分かっている。この強い粘着性のせいで、芽胞を取り除くのが難しくなり、厳しい環境でも生き残る能力が高まる。さらに、芽胞が表面に付着すると、細菌のコミュニティであるバイオフィルムを形成することができる。食品生産機器におけるバイオフィルムは、持続的な汚染の問題を引き起こし、清掃や衛生管理のコストを上げる。
効果的に清掃・消毒するためには、これらの芽胞が周囲や互いにどのように相互作用するのかについて、もっと情報が必要なんだ。また、細菌同士がくっつくことも分かっていて、それが様々な環境ストレスに耐える手助けをする。細菌がくっつく過程は、通常、彼らの表面にある特別な分子によって促進される。
付属体の重要性
最近の研究では、多くのB. セレウス細菌が内因性芽胞付属体、つまりENAという特別な構造の遺伝子を持っていることが指摘されている。この付属体にはS-ENAとL-ENAの2種類がある。S-ENAは芽胞の上にある長くて柔軟な繊維で、表面により良く結びつくのを助ける。一方、L-ENAは短く、芽胞の構造をさらに強化するのを助ける。これらの付属体は、芽胞が表面や互いにくっつく能力に重要な役割を果たすかもしれない。
研究はまた、これらの付属体の存在がバイオフィルムの形成を高める可能性があることを示唆している。細菌が一緒にくっつくことができるほど、環境で生き残る可能性が高くなる。だから、これらの付属体の働きを理解することは、食品生産における汚染リスクを減らす手助けになるんだ。
研究目標
この研究の主な目標は、S-ENAとL-ENAの付属体がB. セレウスの芽胞同士や周囲への付着能力にどう影響するかを探ることだよ。異なるタイプの芽胞を使って、互いと生育細胞(細菌の活発な形態)との相互作用を観察する予定なんだ。塩濃度や周りの液体中の他の物質がこれらの相互作用にどう影響するかも調べるつもり。
沈降ダイナミクス
芽胞がどれだけくっつくかを評価するために、液体中での沈降の様子を調べるよ。細菌がクラスターを形成すると、個々の細菌よりも早く沈降する傾向があるんだ。この研究では、異なるバッチの芽胞を液体で満たしたガラス管に入れて、時間経過とともにどう沈降するかを観察するつもり。付属体が多い芽胞ほど、クラスターを形成して早く沈降するだろうと期待している。
観察結果を使って、芽胞を沈降の速さに基づいて異なるグループに分類するつもりだ。強い付着特性のために早く沈むものもあれば、効果的にクラスターを形成できずに遅く沈むものもある。
実験手順
菌株と芽胞の準備
まず、食品媒介病を引き起こすことで知られるB. セレウスの異なる菌株から始めるよ。芽胞をテスト用に準備するために、特別なプレートで細菌を数週間育てて、大部分が芽胞を形成するまで待つ。その後、必要になるまで収集して保存しておくつもり。
沈降試験
芽胞懸濁液をサンプル管に入れて、沈降させながら沈降試験を実施するよ。カメラを使って、さまざまな時間ポイントで画像を撮影して、芽胞が時間経過とともにどう沈降するかを観察する。実験の後、芽胞が成長したり形が変わったりしていないかを確認するつもり。
光トラッピング設定
芽胞同士の相互作用を研究するために、光トラッピングという方法を使うよ。これはレーザーを使って個々の芽胞を捕まえて、その動きを観察する方法だ。2つの芽胞を捕まえて一緒に保持し、解放後にくっついているかを確認する実験を設定するつもり。
キャッチ・アンド・リリース試験
芽胞がどれだけ互いに付着するかを調べるために、いくつかの試験を行うよ。一つの試験では、2つの芽胞を近くに置いて、解放したときにくっつくかを観察する。別の試験では、芽胞が隣の生育細胞とどう相互作用するかを評価して、くっついているか、どれくらい近いかを観察する予定。
沈降パターンの結果
沈降法を使って、付属体に基づいて芽胞株間に違いが見られると期待している。付属体が多い芽胞は早く沈降し、管の底に濃いペレットを形成するはず。逆に、付属体がない芽胞は遅く沈降し、濃度の低いペレットを作る。
データを分析しながら、観察された沈降パターンに基づいて芽胞株を分類するつもりだ。これらのパターンを特定することで、芽胞が液体の中でどう作用するかにおける異なる付属体の役割を理解できる。
芽胞の相互作用の観察
カメラ設定を通じて、芽胞同士がくっつくかどうかを調べるつもりだ。2つの芽胞が保持された後にどれくらいの頻度で付着しているかを評価するよ。付着の頻度を異なる株間で比較する。
芽胞同士の付着に加えて、実験では芽胞が生育細胞とどう相互作用するかも調べる予定だ。芽胞の付属体の種類に基づいて、異なる結合トレンドが見られると思っている。
環境が付着に及ぼす影響
異なる条件をテストしながら、周囲の環境が芽胞の相互作用にどう影響するかも評価するよ。異なる塩濃度の溶液を使用して、芽胞の結合や沈降速度に与える影響を見ていくつもり。
目指しているのは、イオン濃度のような要因が芽胞が互いにくっつく能力や周囲への付着にどのように影響するかを理解することだ。この情報は、食品生産における清掃方法を改善するのに役立つかもしれない。
結論
B. セレウスの芽胞の相互作用や行動を調べることで、食品生産環境で生存し拡散する能力についての洞察を得ることができると思っている。付属体の役割を理解することで、汚染を防止するためのより効率的な戦略を開発できるはず。
付属体の存在は、芽胞が表面や互いに付着する能力に重要な役割を果たしているみたいで、液体中でどう沈降するかにも影響を与えている。この研究は、食品業界にとって貴重な情報を提供し、B. セレウスの汚染リスクを軽減するのに役立つかもしれない。
要するに、B. セレウスの芽胞の行動や相互作用、環境要因の影響を包括的に評価しているんだ。この結果は、食品生産現場での汚染を減らすための実用的な応用につながる可能性があるよ。
タイトル: The role of endospore appendages in spore-spore contacts in pathogenic bacilli
概要: Species within the spore-forming Bacillus cereus sensu lato group are recognized for their role in food spoilage and food poisoning. B. cereus spores are decorated with numerous pilus-like appendages, called S-ENAs and L-ENAs. These appendages are believed to play crucial roles in self-aggregation, adhesion, and biofilm formation. By using both bulk and single-cell approaches, we investigate the role of S-and L-ENAs as well as the impact of different environmental factors in spore-to-spore contacts and in the interaction between spores and vegetative cells. Our findings reveal that ENAs, and particularly their tip fibrilla, play an essential role in spore self-aggregation but not in the adhesion of spores to vegetative cells. The absence of L-BclA, which builds the L-ENA tip fibrillum, reduced both S-and L-ENA mediated spore aggregation, emphasizing the interconnected roles of S-and L-ENAs. Increased salt concentrations in the liquid environment significantly reduced spore aggregation, implying a charge dependency of spore-spore interactions. By elucidating these complex interactions, our study provides valuable insights into spore dynamics. This knowledge can guide future studies on spore behavior in environmental settings and aids in developing strategies to manage bacterial aggregation for beneficial purposes, like controlling biofilms in food production equipment.
著者: Magnus Andersson, U. L. Jonsmoen, D. Malyshev, M. Sleutel, E. E. Kristensen, E. D. Zegeye, H. Remaut, M. E. Aspholm
最終更新: 2024-04-22 00:00:00
言語: English
ソースURL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.04.22.590507
ソースPDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.04.22.590507.full.pdf
ライセンス: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
変更点: この要約はAIの助けを借りて作成されており、不正確な場合があります。正確な情報については、ここにリンクされている元のソース文書を参照してください。
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