新しいセンサーが細胞内のカルシウム研究を変革中
NEMOerセンサーは、生きている細胞のカルシウムダイナミクスをより正確に追跡することができるよ。
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目次
カルシウムは私たちの細胞のさまざまな機能に重要な役割を果たしてるんだ。体がちゃんと働くためのプロセスを調整するのを手伝ってるんだよ。小間隔網(ER/SR)は動物細胞のカルシウムの主な供給源の一つで、このカルシウムシステムがバランスを崩すとERにストレスがかかって、最悪の場合は細胞死に至ることもあるんだ。この不均衡は癌や心臓の問題、神経系に関連する病気と結びついてるんだ。健康な細胞と病気の細胞でERカルシウムがどう変化するかをもっと知るためには、その変化を時間とともに正確に視覚化することが大事なんだ。
カルシウムダイナミクスを研究するための新しいツール
研究者たちは細胞内のカルシウムレベルを追跡するための特別なツール、つまりセンサーを開発したんだ。カルシウムに結合する特定のタンパク質を調整して、カルシウムレベルが上がったり下がったりするのを示すセンサーを作ったの。これにはGCaMPやGECOのようなさまざまなバージョンが含まれてて、カルシウムの変化を測定できるけど、反応が遅かったり検出範囲が限られてるっていう欠点があったんだ。
特に注目すべき開発はNEMOerという一連のセンサーで、カルシウムの変化に対してより敏感で素早く反応できるように設計されてるんだ。これにより、心筋細胞の収縮中に起こるような素早いカルシウムのイベントをよりよくモニタリングできるようになったんだ。
カルシウムインジケーターのデザインの改善
このNEMOerセンサーを作るために、研究者たちは既存のタンパク質に特定の変更を加えて、カルシウムとより競争できるようにしたんだ。これらの変更を導入してERをターゲットにすることで、NEMOerセンサーは明るい信号と広いダイナミックレンジを示すんだ。これにより、カルシウムレベルの微細な変動を捉えることができて、カルシウムがさまざまな細胞活動にどう影響するかを理解するのに重要なんだ。
テストでは、NEMOerセンサーは古いセンサーに比べてカルシウムの変化に対してずっと強い反応を示したんだ。例えば、ERのカルシウムストアが薬で空になったとき、NEMOerセンサーは従来のセンサーに比べて蛍光が印象的に減少したんだ。これは、カルシウムレベルのより大きな変化を時間とともに検出できることを示してるんだ。
さまざまな細胞タイプでの性能
NEMOerセンサーの効果はさまざまな細胞タイプで評価されたんだ。例えば、心筋細胞でNEMOer-fというNEMOerのバリアントを使用した際、電気刺激やカフェインに迅速に反応してカルシウムの変化を検出できたんだ。これは心細胞が収縮中にどう機能するかを理解するのに重要なんだ。
神経細胞では、NEMOer-nが電気刺激に対して特に樹状突起でのカルシウムレベルが高くなるところで大きな反応を示したんだ。これにより、NEMOerセンサーが神経細胞のカルシウムシグナルについての重要な洞察を提供できることを示してて、健康な脳機能にとって大事なんだ。
新しい比率センサー
カルシウムレベルの測定をさらに向上させるために、研究者たちはTuNerというバージョンを開発したんだ。これは二色システムを使用してて、さまざまな細胞のエリアでのカルシウムの変化をよりよく追跡できるんだ。TuNerセンサーをテストしたとき、基準のカルシウムレベルと刺激中の変化をうまく測定できたんだ。これは詳細な細胞研究における可能性を示してるんだ。
ゼブラフィッシュでのin vivo研究
NEMOerセンサーは生きたゼブラフィッシュでテストされたんだ。特定の段階で透明になるから、研究者たちは生きている筋肉細胞の中でセンサーがどう働くかを観察できたんだ。筋肉が収縮したときに、センサーがカルシウムの変化をキャッチして、実際の生物の中で効果的に機能することが分かったんだ。
重要な発見のまとめ
全体的に、NEMOerセンサーは細胞内のカルシウムダイナミクスの研究において重要な進展を示しているんだ。これらは以前のセンサーよりも明るく、敏感だから、心臓や神経系の機能を理解するために重要な素早いカルシウムイベントを検出できるんだ。カルシウムの変化を視覚化する新しい方法を提供することで、NEMOerセンサーはカルシウムシグナルが健康や病気にどう影響するかの研究のためにワクワクする機会を生み出してるんだ。
未来の研究の方向性
NEMOerセンサーに関する発見は、さまざまな生物学的コンテクストでのカルシウムシグナルのさらなる探索への道を開いてるんだ。今後の研究では、さまざまな細胞活動や異なる刺激への応答としてリアルタイムでカルシウムの変化をモニタリングするためにこれらのセンサーがどう使えるかに焦点を当てるかもしれないんだ。これらのダイナミクスを理解することで、病気メカニズムやカルシウムの調整が関与する状態の治療ターゲットに関する洞察が得られるかもしれないんだ。
さらに、研究者たちはこれらのセンサーをさらに最適化して、より良い解像度や反応時間を持たせることも考えるだろうね。NEMOerセンサーをより広範な生物や細胞タイプで利用することで、現在はあまり理解されていないカルシウムシグナルの新しい側面が明らかになるかもしれないんだ。
結論
結論として、NEMOerセンサーの開発はさまざまな細胞内のカルシウムシグナルの追跡において素晴らしい前進を示しているんだ。これらのツールは生きている生物におけるカルシウムの複雑な挙動に関する新しい洞察を提供して、細胞の健康と機能を維持する上でのカルシウムの重要性を強調してるんだ。研究が進むにつれて、NEMOerセンサーはカルシウムシグナルに関連した多くの生物学的プロセスや病気を理解するのに大きな影響を与える可能性があるんだ。
タイトル: Highly Dynamic and Sensitive NEMOer Calcium Indicators for Imaging ER Calcium Signals in Excitable Cells
概要: Endoplasmic/sarcoplasmic reticulum (ER/SR) sits at the heart of the calcium (Ca2+) signaling machinery, yet current genetically encoded Ca2+ indicators (GECIs) lack the ability to detect elementary Ca2+ release events from ER/SR, particularly in muscle cells. Here we report a set of organellar GECIs, termed NEMOer, to efficiently capture ER Ca2+ dynamics with increased sensitivity and responsiveness. Compared to G-CEPIA1er, NEMOer indicators exhibit dynamic ranges that are an order of magnitude larger, which enables up to 5-fold more sensitive detection of Ca2+ oscillation in both non-excitable and excitable cells. The ratiometric version further allows super-resolution monitoring of local ER Ca2+ homeostasis and dynamics. Notably, the NEMOer-f variant enabled the inaugural detection of Ca2+ blinks, elementary Ca2+ releasing signals from the SR of cardiomyocytes, as well as in vivo spontaneous SR Ca2+ releases in zebrafish. In summary, the highly dynamic NEMOer sensors expand the repertoire of organellar Ca2+ sensors that allow real-time monitoring of intricate Ca2+ dynamics and homeostasis in live cells with high spatiotemporal resolution.
著者: Youjun Wang, W. Gu, J.-H. Chen, Y. Zhang, J. Li, H. Zhang, A. Jiang, Z. Zhong, J. Zhang, C. Xi, T. Hou, D. L. Gill, D. Li, Y. Mu, A.-H. Tang
最終更新: 2024-04-28 00:00:00
言語: English
ソースURL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.03.08.583332
ソースPDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.03.08.583332.full.pdf
ライセンス: https://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0/
変更点: この要約はAIの助けを借りて作成されており、不正確な場合があります。正確な情報については、ここにリンクされている元のソース文書を参照してください。
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