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# 生物学# 神経科学

脳マッピングのための電子顕微鏡技術の進歩

新しい技術が脳研究の画像速度と精度を向上させてるよ。

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脳画像技術の向上脳画像技術の向上ッピング。革新的な方法で、より速く、より正確な脳マ
目次

シリアルセクション電子顕微鏡法(ssEM)は、科学者たちがミミズやハエ、魚といった小動物の脳内の微細回路を詳しく観察するために使う技術だよ。これによって、脳細胞同士がどうつながっているかを示す詳細なマップが作成できるんだ。科学者たちはこの技術を使って、マウスのような哺乳類の接続がどう働いているのかを理解しようとしていて、学習、記憶、脳の発達に関する重要な特徴を特定している。

脳内の接続を研究する分野、すなわちコネクトミクスは成長中なんだ。研究者たちは異なる動物の脳マップを比較して脳の進化や病気を引き起こす問題について学んでいる。脳マップが増えるにつれて、これらの画像を迅速かつ効率的に収集・分析する方法を見つけることが重要だってことが明らかになっているよ。

現在の脳画像収集の制限

今のところ、これらの脳画像を収集するために必要な特別で高価な機器を持っているラボはほんの数カ所しかないんだ。彼らは、透過型電子顕微鏡カメラアレイや複数のビームを持つ走査型電子顕微鏡のような高度な機械を使っている。これまで、実際の画像を取得することはそれほど大きな課題ではなかったけど、画像データを分析することが問題だった。従来の方法では、画像を分解して各細胞とそのつながりを認識するのに時間がかかるんだ。

最近の技術の進歩、特に機械学習のおかげで、データ解析が速くなってきた。今の課題は、研究者たちが解析の速度に追いつくために、画像を収集する方法をもっと速くする必要があるってこと。状況を改善するための一つの方法は、より手頃な電子顕微鏡を改造して必要なデータを収集することなんだ。

ポイントスキャン走査型電子顕微鏡の仕組み

ポイントスキャン走査型電子顕微鏡を使って脳画像を収集する際、画像を集めるのにかかる時間は主に機械が各ピクセルにフォーカスする時間によって決まるんだ。良い画像を得るためには、電子ビームが通常各ピクセルに少なくとも1000ナノ秒留まる必要があるんだ。ビームがあるピクセルから別のピクセルに移動するのは、留まる時間に比べてほんのわずかなんだ。

コネクトミクスのイメージングプロセスを速くするために、研究者たちはビームが各ピクセルに留まる時間を減らしながら、まだ十分な情報を集める必要がある。これらの画像の正確性は非常に重要で、脳細胞やそのつながりの正しい輪郭を示す必要があるんだ。

脳研究における画像の正確性の重要性

脳研究における画像の質で最も重要なのは、ニューロンやそのつながり(シナプス)のエッジを正確に識別する能力なんだ。従来の方法では、すべてのピクセルに同じ留まる時間を使うんだけど、長い留まる時間はより正確な画像を意味するんだ。しかし、これは速度を求めるイメージングと正確さの間に対立を生むんだ。

以前の方法は、初期の画像を作成した後に画像の質を改善しようとしたけど、ノイズを取り除いたり解像度を上げたりする技術は、初期の画像収集時に逃した詳細を加えることはできなかったんだ。

この制限に対処するために、研究者たちは実際のイメージングプロセス中に重要な情報を取り戻す方法を開発したんだ。彼らは、画像の中でエラーが起こる可能性のある領域を認識し、明確さのためにこれらの領域を再スキャンするために追加の時間を取る「スマート」パイプラインを作ったんだ。

SmartEMパイプラインの説明

SmartEMパイプラインは、脳画像の中で解釈しにくいエリアを迅速に見つけて修正するように設計されているんだ。解析が難しい領域や、シナプスのような重要な特徴を含む地域を特定して、これらのエリアにもっとイメージングの努力を集中させるんだ。これを初期イメージングのリアルタイムで行うことで、全体的なイメージング時間を大きく増やさずにより良い画像を得ることができるんだ。

このアプローチは、顕微鏡のコンピュータ上で動作する機械学習アルゴリズムを使っているんだ。これらのアルゴリズムはERRNETと呼ばれ、画像の質が欠けている可能性のあるエリアを検出する方法を学習するんだ。それらのエリアを特定したら、システムは正確性を向上させるために、どのエリアを遅い速度で再スキャンする必要があるかを決定するんだ。

留まる時間がセグメンテーションの正確性に与える影響

異なる留まる時間が画像の質にどれほど影響するかをテストするために、科学者たちはマウスの視覚皮質からの画像を25ナノ秒から1200ナノ秒の異なる留まる時間でスキャンしたんだ。研究の結果、短い留まる時間は速いけど、画像のセグメンテーションにエラーが出ることが多いことがわかったんだ。一方で、長い留まる時間は正確さが向上するけど、ずっと時間がかかるんだ。

研究者たちは、調べた領域によって画像の質に大きな違いがあることを発見した;短い留まる時間で正確にキャッチできるエリアもあれば、正確な輪郭を得るために長い時間が必要なエリアもあったんだ。目標は、できるだけ短い留まる時間を使いつつ、より難しいエリアには選択的に長い留まる時間を適用する方法を開発することだったんだ。

SmartEMメソッドの実装

SmartEMパイプラインは、最初に全体の画像を迅速にスキャンすることから始まるんだ。この情報を収集した後、ERRNETアルゴリズムを使用してエラーが起こりやすい地域を特定するんだ。次のステップは、詳細な画像のために長い留まる時間でこれらの地域を再スキャンすることなんだ。

すべての画像を収集した後、SmartEMパイプラインは迅速にキャッチした領域とより正確にスキャンした領域を組み合わせるんだ。このマージによって、脳の構造を正確に表現し、エラーを少なくした完全な画像が作成されるんだ。

このパイプラインには、最終画像をより均一に見せるための追加機能も含まれていて、研究者たちがより良く解釈できるように助けるんだ。たとえ生画像が留まる時間の変動によって異なっていても、ポストプロセッシングによって一貫して見えるようになっているんだ。

SmartEMの利点

SmartEMパイプラインは、従来の方法に比べて高品質な脳画像を収集するのにかかる時間を大幅に短縮するんだ。報告によると、スピードが7倍以上改善されたため、SmartEMは研究者たちがコネクトミクスデータを迅速かつ効率的に収集できるようにしているんだ、データの質を犠牲にすることなくね。

コネクトミクス以外の応用

SmartEMの主な焦点はコネクトミクスだけど、その原則は他の多くの分野にも適用できるんだ。たとえば、材料科学では、サンプルの異なる部分が異なる詳細レベルを持つことがあるから、SmartEMメソッドは画像収集の効率を高めることができるんだ。

さらに、SmartEMパイプラインは適応性があるから、異なる研究プロジェクトや機器の特定の要求に応じて変更できるんだ。この柔軟性は、さまざまな分野の研究者たちが新しい機械を必要とせずに、改善されたイメージング技術の恩恵を受けられることを意味するんだ。

SmartEMの未来

機械学習技術が進化し続けるにつれて、SmartEMパイプラインはさらに効果的になる可能性が高いんだ。セグメンテーションやエラー検出に使われるアルゴリズムの改善は、イメージング速度を速め、さらなる正確性をもたらすかもしれないんだ。これは、生物学、材料科学、製造業など、より広い応用の扉を開くことを約束しているんだ。

さらに、技術がよりアクセスしやすくなることで、もっと多くのラボが高品質なデータを収集・分析できるようになり、コネクトミクスや詳細なイメージングが求められる他の分野での研究がさらに進むことになりそうだよ。

結論

SmartEMパイプラインは、電子顕微鏡分野、特にコネクトミクスにおいて重要な進展を示すものなんだ。画像取得プロセスを効率化することで、研究者たちは質の高いデータをより早く集めることができるようになったんだ。この革新は、脳の接続性についての即時の研究を助けるだけでなく、将来の科学のさまざまな分野での飛躍のための舞台を整えているんだ。技術が進むにつれて、イメージング技術と生物システムの構造に対する貴重な洞察の未来は明るいんだ。

オリジナルソース

タイトル: SmartEM: machine-learning guided electron microscopy

概要: Connectomics provides essential nanometer-resolution, synapse-level maps of neural circuits to understand brain activity and behavior. However, few researchers have access to the high-throughput electron microscopes necessary to generate enough data for whole circuit or brain reconstruction. To date, machine-learning methods have been used after the collection of images by electron microscopy (EM) to accelerate and improve neuronal segmentation, synapse reconstruction and other data analysis. With the computational improvements in processing EM images, acquiring EM images has now become the rate-limiting step. Here, in order to speed up EM imaging, we integrate machine-learning into real-time image acquisition in a single-beam scanning electron microscope. This SmartEM approach allows an electron microscope to perform intelligent, data-aware imaging of specimens. SmartEM allocates the proper imaging time for each region of interest - scanning all pixels equally rapidly, then re-scanning small subareas more slowly where a higher quality signal is required to achieve accurate segmentability, in significantly less time. We demonstrate that this pipeline achieves a 7-fold acceleration of image acquisition time for connectomics using a commercial single-beam SEM. We apply SmartEM to reconstruct a portion of mouse cortex with the same accuracy as traditional microscopy but in less time.

著者: Yaron Meirovitch, C. F. Park, L. Mi, P. Potocek, S. Sawmya, Y. Li, I. S. Chandok, T. L. Athey, N. Karlupia, Y. Wu, D. R. Berger, R. Schalek, H. Pfister, R. Schoenmakers, M. Peemen, J. W. Lichtman, A. Samuel, N. Shavit

最終更新: 2024-06-15 00:00:00

言語: English

ソースURL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2023.10.05.561103

ソースPDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2023.10.05.561103.full.pdf

ライセンス: https://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0/

変更点: この要約はAIの助けを借りて作成されており、不正確な場合があります。正確な情報については、ここにリンクされている元のソース文書を参照してください。

オープンアクセスの相互運用性を利用させていただいた biorxiv に感謝します。

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