繊毛の動きにおけるダイニンモーターの役割を調査する
この研究は、ダイニンモーターが繊毛の振動とその効率にどんな影響を与えるかを探るんだ。
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生物的な振動子は、生きた生物の中でリズミカルな動きを作り出すシステムなんだ。ランダムな変動やノイズに対処しながらも、これらの振動子は正確に働く。研究者たちは、これらの生物的リズムの正確さは「ペースメーカー」ユニットのつながり方によって決まり、エネルギーの使い方によって制限されると考えているよ。
生物的な振動子の中でも特に面白いのは分子モーター。これらの小さな機械は振動する動きを作ることができて、いろんな生物的プロセスで見られるんだ。例えば、聴覚細胞での音の検知、筋繊維の動き、細胞分裂時の構造の配置、液体の中を泳ぐための繊毛のリズミカルな動きに役立ってる。
動く繊毛の構造と機能
動く繊毛は真核細胞の表面から伸びた細い突起で、通常は10〜50マイクロメートルの長さがある。特別な構造を持つダイニンモーターが含まれていて、中心のフレームワークである軸糸に沿って配置されている。このフレームワークは、単純な単細胞生物から複雑な植物や動物まで、さまざまな生物の間で一貫した構造を持っている。
ダイニンモーターは協力して微小管をスライドさせて、繊毛の形を変える。これは、繊毛の根元でスライドが制限されるために起こる屈曲運動だ。このモーターの活動は一定ではなく、軸糸がどのように曲がっているかによって変わるから、10〜50Hzの周波数で定期的な振動が起こる。科学者たちはまだこれらのモーターがどのように制御されるかを研究中だけど、制御された変化が繊毛の機能に関する理論モデルに洞察を与えるかもしれないと考えている。
それぞれのダイニンモーターは、ATPの分解と小さな力の適用を結びつけたサイクルで動いている。このサイクルのステップはランダムなので、関与する力は小さなスケールで変動する。ただし、これらの変動は大きなスケールでも観察可能で、光顕微鏡で繊毛の屈曲の変化が見える。
この変動は繊毛の機能に影響を与えることがあるんだ。たとえば、動きの振幅の変化が微小生物の泳ぎをより効率的にすることができるし、タイミングのずれが繊毛のグループ間での同期を妨げることになることもあって、効果的な泳ぎや流体の移動には重要だ。
繊毛のノイズ測定の課題
繊毛のノイズを研究するのは結構複雑なんだ。繊毛の挙動の慢性的な変化は、多くのサイクルを通じて起こるし、細胞内のイオン濃度の変化の影響を受ける。これらの慢性的な変化は、ダイニンモーターによる速くて混沌とした変動と交じり合うから、実験の結果を解釈するのが難しくなる。
さらに、繊毛の中のダイニンモーターの数は固定されていて、遺伝子の変更を除いては実験中に変えられない。
ノイズの測定としてのクオリティファクター
繊毛の動きのノイズを測定する方法の一つがクオリティファクターだ。これは振動のリズムが時間と共にどれだけ変わるかを示す数字だ。シンプルなモデルでは、このクオリティファクターはモーターの数に関連して増加するはずだと示唆されている。
今まで、この理論は研究室の実験で十分にテストされていない。以前の研究では、細胞からダイニンモーターを取り除くと動きの周波数が下がることがわかったけど、変動の変化には焦点が当てられていなかった。
これをさらに調査するために、研究者たちは細胞から分離した後に再活性化された軸糸を使用した。このおかげで、ダイニンの数を操作して、これが軸糸の挙動にどんな影響を与えるかを観察できた。
測定のための軸糸の再活性化
軸糸は、クラミドモナスという緑藻の一種から取り出せる。取り出したら、エネルギーを供給する特別な溶液で再活性化できる。高速度のビデオ録画を使って、研究者たちは軸糸の動きを非常に精密に追跡できる。
これらの軸糸の形と動きは、時間に沿って角度がどのように変化するかを見ることで特徴づけられる。この振動の周波数や振幅を分析することで、ビート振幅やクオリティファクターなどの重要なパラメータを定義することができるよ。
クオリティファクターは、リズミカルな動きがどれだけ一貫性を失うに何サイクルかかるかを反映している。高いクオリティファクターは、より安定して正確な振動子を示してる。
ビート周波数、振幅、クオリティファクターの理解
研究者たちは、異なる数のダイニンモーターでクオリティファクターがどのように変化するかを2つの方法で調べた。一つは、特定のダイニンモーターが欠けている変異体のクラミドモナス株を調べたことと、もう一つは化学抽出プロセスを使ってモーターを取り除いたことだ。
ダイニンモーターの生化学的抽出
繊毛の機能に対するモーターの数の影響を分析するために、研究者たちは軸糸からダイニンモーターを抽出する手法を開発した。ダイニンモーターには内側の腕ダイニン(IAD)と外側の腕ダイニン(OAD)の2つの主なタイプがあり、軸糸の長さに沿って定期的に配置されている。
塩溶液を使うことで、研究者たちは塩の濃度に応じてどちらのタイプのダイニンモーターも抽出できた。抽出後に残るモーターの数を正確に測る技術を使ったんだ。
研究者たちは、塩の濃度を上げるとダイニンモーターの数が減少することを発見した。正常な細胞からの軸糸では、最高の塩濃度で約20%のダイニンモーターが失われたけど、変異体の軸糸では70%の喪失が見られた。
ビート周波数を設定するダイニンモーターの役割
ビート周波数、つまり軸糸が前後に動く速さは、モーターのヘッドの数に関連していることがわかった。抽出なしの場合、正常な軸糸の平均ビート周波数は約70Hz、変異株では約30Hzだった。
ダイニンモーターを取り除くと、ビート周波数はリニアに下がった。両方のタイプのダイニンは、型に関わらずビート周波数の制御に同じように寄与しているようだ。
ビート振幅とダイニンモーターとの関係
ビート振幅は、軸糸が各サイクル中にどれだけ動くかを表す。研究者たちは、この測定が主に内側の腕ダイニンに依存していることを発見した。つまり、外側の腕ダイニンが少なくても振幅は一貫していたということだ。
クオリティファクターとモーターのヘッド数
軸糸の動きの安定性を示すクオリティファクターも測定された。正常な軸糸と変異体の軸糸を比較すると、クオリティファクターはダイニンモーターの総数に伴って増加していった。ただし、変異体の軸糸は常に低いクオリティファクターを示した。
面白いことに、内側の腕ダイニンの数だけに対してプロットすると、明確な傾向が現れた。クオリティファクターは、内側の腕ダイニンが約95%存在するまで大幅に増加した。そのポイントを超えると、外側の腕ダイニンの存在はクオリティファクターをさらに向上させることはなかった。
ATP濃度が繊毛の挙動に与える影響
ATP濃度も、軸糸の動きに影響を与えることがわかった。正常な軸糸では、ATP濃度が下がるとビート周波数とクオリティファクターが減少したけど、振幅はほとんど変わらなかった。
これは、内側の腕ダイニンがATPレベルが低い状態でより効果的に働くことを示唆している。一方、外側の腕ダイニンはATPが下がると最初に遅くなる。
流体力学的出力の測定
ビートする軸糸の出力は、細胞にまだついている繊毛に関する以前の研究からの推定に比べてかなり低い。つまり、孤立した軸糸はあまり効率的ではなく、完全にエネルギーを利用するのではなくアイドルモードで動いている可能性が高い。
研究者たちは正常な軸糸と変異体の平均出力を計算し、周囲の流体中の動きが最小限の力を生成することを示した。
計算された出力は、ATP分解によって放出されたエネルギーのほんの一部しか有用な仕事に変換されず、ほとんどが熱として無駄になることを示している。
エネルギーの限界と振動子の精度
軸糸のような生物的振動子の精度は、使用されるエネルギーの量によって限界がある。理論的な関係が説明するには、振動中にどれだけのエネルギーが散逸するかに依存したクオリティファクターの上限がある。
この関係を使って、研究者たちは実験中に測定されたクオリティファクターが理論的な最大値よりも低いことを見積もった。これは、クオリティファクターが進化によって最適化されていないかもしれないことを示唆している。生物的な必要が最大の精度を要求していない可能性があるからだ。
調査結果のまとめ
この研究は、内側の腕ダイニンの数が増えるにつれて、軸糸の振動のクオリティファクターが増加することを示している。外側の腕ダイニンは、内側の腕ダイニンがある一定の密度に達するまで、この増加に寄与するだけなんだ。
以前の研究では、さまざまなパラメータに関連する繊毛や鞭毛のノイズが指摘されていて、孤立した軸糸で測定されたクオリティファクターは生細胞からの以前の発見と良く関連している。このことは、内側の腕ダイニンが一貫した動きを生成するのに重要で、外側の腕ダイニンは動きのスピードを増すための支援的な役割を果たすことを再確認するものだ。
結論
この発見は、繊毛の振動における内側と外側の腕ダイニンの重要性を強調している。内側の腕ダイニンがビートの主な駆動力を提供し、外側の腕ダイニンが動きを加速する手助けをしている。得られたクオリティファクターは、繊毛の生物的機能やエネルギー効率に対する洞察を提供する。今後の研究は、これらの生物的振動子と生物体の中での役割の理解を深めていくんだ。
タイトル: Active fluctuations of axoneme oscillations scale with number of dynein motors
概要: Fluxes of energy generate active forces in living matter, yet also active fluctuations. As canonical example, collections of molecular motors exhibit spontaneous oscillations with frequency jitter caused by non-equilibrium phase fluctuations. We investigate phase fluctuations in reactivated Chlamydomonas axonemes, which are accessible to direct manipulation. We quantify the precision of axonemal oscillations after controlled chemical removal of dynein motors, providing an experimental test for the theory prediction that the quality factor of motor oscillations should increase with motor number. Our quantification reveals specialized roles of inner and outer arm dynein motors. This supports a model in which inner dyneins serve as master pace-makers, to which outer arm dyneins become entrained, consistent with recent insight provided by structural biology.
著者: Veikko F. Geyer, A. Sharma, B. M. Friedrich
最終更新: 2024-06-25 00:00:00
言語: English
ソースURL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.06.25.600380
ソースPDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.06.25.600380.full.pdf
ライセンス: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
変更点: この要約はAIの助けを借りて作成されており、不正確な場合があります。正確な情報については、ここにリンクされている元のソース文書を参照してください。
オープンアクセスの相互運用性を利用させていただいた biorxiv に感謝します。