ccAFv2を使った細胞周期ステージの分類の進展
研究者たちが新しいccAFv2モデルを使って細胞周期の分類を改善したよ。
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目次
単一細胞RNAシーケンシング(scRNA-seq)は、科学者たちが個々の細胞の行動や特性を研究するための方法なんだ。この技術は、細胞が異なる条件にどのように反応するかや、その遺伝子活性がどのように変化するかを見るのを助けてくれる。細胞の状態は、細胞の種類やライフサイクルのどの段階にいるかといったさまざまな要因に影響を受けるんだ。
細胞周期
細胞周期は、細胞が成長し、2つの新しい細胞に分裂するプロセスだ。休止期のような、細胞が活発に分裂していない段階や、分裂の準備をしている活発な段階など、いくつかのステージがある。成人幹細胞は通常、細胞周期の外で休止状態にあり、適切な信号を受け取るまで分裂を始めない。
現在の方法と制限
科学者たちは、細胞の遺伝子活性を分析して、細胞がどの細胞周期の段階にいるかを予測するための高度な方法を使っている。でも、多くの方法は休止状態の細胞と活発な段階の細胞を区別せず、一緒くたにしてしまっている。このグルーピングでは、これらの細胞が遺伝子をどのように発現するかの重要な違いを見逃してしまう。
細胞周期の分類の改善
細胞周期の異なる段階をより良く分類するために、研究者たちは以前の研究を基にした新しい方法を開発した。この改善された分類システム、ccAFv2と呼ばれるものは、人工ニューラルネットワーク(ANN)というモデルを使っている。ANNはデータから学び、時間と共に予測を改善するように設計されている。ccAFv2モデルは、実験室で育てられた特定のヒト神経幹細胞に基づいて訓練された。
ccAFv2分類器の訓練
ccAFv2の訓練データは、管理された条件下で分離されて育てられたヒト神経幹細胞から取得された。このデータによって、モデルは細胞周期の異なる段階を学ぶことができた。研究チームは、モデルを訓練する前にデータが高品質であることを確認するために最新の技術も使用した。
他の方法とのテストと比較
ccAFv2モデルが訓練された後、他の既存の方法と比較して、どれくらいの性能を発揮するかをテストした。異なる統計的指標を使用して精度を確認したところ、ccAFv2はさまざまな段階を分類する際に古い方法よりも良い結果を示し、特にG0細胞の独特の休止状態を特定するのが得意だった。
遺伝子データが欠けている場合の影響
scRNA-seqデータを使用する際の一つの課題は、特定の遺伝子情報が欠けていることがあることだ。研究者たちは、データの一部を除去した際のccAFv2モデルの性能を調べて、実際の実験で何が起こるかをシミュレーションした。彼らは、欠けた遺伝子があってもモデルが信頼できる予測を行うことができることを発見したが、欠損情報の割合が大きくなると精度が下がることもわかった。
成長因子の役割
成長因子は、細胞の成長や分裂を促進する物質だ。研究者たちは、これらの因子がある場合とない場合に育てられた神経腫瘍細胞にccAFv2モデルをテストした。成長因子が細胞の行動に影響を与えることを強調するために、細胞周期の予測された段階に違いが見られた。成長因子がある細胞は明確な分類を示し、ない細胞はより不確実性を示した。
データから細胞周期の影響を除く
細胞周期は、他の重要な信号を覆い隠してしまうような強いパターンを遺伝子活性に生み出すことがある。これらの他の信号をよりよく理解するために、研究者たちはデータから細胞周期の影響を除去する方法を適用できる。ccAFv2分類器を使えば、この除去が可能で、科学者たちが他の細胞プロセスに焦点を当てる手助けができる。
ccAFv2の応用
ccAFv2モデルは広範囲に応用できて、ヒトやマウスなどさまざまな生物からのデータを分析するのに使える。研究者たちは脳や脊髄の発生に関するデータセットを含む複数のデータセットでテストした。結果は、ccAFv2がさまざまな細胞タイプで細胞周期のステージを正確に分類できることを示した。
異なる生物からの細胞の分類
ccAFv2分類器を使用することで、研究者たちはヒトとマウスの細胞タイプを比較でき、細胞周期の行動における類似点や違いを明らかにした。特に神経細胞をサポートするグリア細胞において、休止G0状態を特定するのに効果的だった。
休止状態の重要性
休止状態、つまりG0は、特定の細胞がどのように非活性でありながら環境の変化に応じて準備ができているかを理解するのに重要なんだ。この状態は、幹細胞にとって特に重要で、非活性であることと活発に分裂することのバランスを取る必要がある。これらの状態の正確な分類は、健康や病気における細胞プロセスの理解を明確にする手助けになる。
ニューロンや他の細胞タイプの分析
ccAFv2分類器は、幹細胞だけでなく、ヒトの脳や脊髄からのニューロンや他の細胞タイプの研究にも適用された。研究者たちは、異なるタイプの細胞がどのようにステージを循環するかにパターンを発見し、発生中の役割や成人脳における機能についてより深い洞察を得た。
空間トランスクリプトミクスの使用
空間トランスクリプトミクスは、遺伝子発現データと細胞が組織内のどこに位置しているかに関する情報を組み合わせた高度な技術。ccAFv2分類器をこの方法に適用することで、研究者たちは異なる細胞周期の段階が組織全体でどのように分布しているかを視覚化し、マッピングすることができた。この空間的視点は、細胞が自然環境でどのように相互作用するかを理解するのに不可欠だ。
結論:ccAFv2と細胞周期研究の未来
ccAFv2分類器は、さまざまな生物学的コンテキストにおける細胞周期の分析において大きな前進を表している。休止状態を含む異なる段階に細胞を正確に分類する能力は、細胞の行動を探るための貴重なツールを提供する。この研究の影響は基本的な科学を超え、発生や健康維持、癌などの病気に対する理解に影響を与える。
研究者たちは、様々な研究でccAFv2を適用し続ける中で、細胞周期と休止状態が生物学において重要な役割を果たすことをさらに発見できることを期待している。そして、これは将来的な医療戦略への革新的な手段につながるかもしれない。このモデルの柔軟性は、新しいデータタイプや応用に適応できることを意味しており、進行中の科学的探求においてその関連性が保証される。
要するに、ccAFv2分類器は細胞プロセスの理解を深め、細胞が成長、分裂、または非活性でいることを選ぶ複雑さを明らかにするのに役立つ。それが新しい細胞生物学や医学の発見への道を開くかもしれない。
タイトル: Classifying cell cycle states and a quiescent-like G0 state using single-cell transcriptomics
概要: Single-cell transcriptomics has unveiled a vast landscape of cellular heterogeneity in which the cell cycle is a significant component. We trained a high-resolution cell cycle classifier (ccAFv2) using single cell RNA-seq (scRNA-seq) characterized human neural stem cells. The ccAFv2 classifies six cell cycle states (G1, Late G1, S, S/G2, G2/M, and M/Early G1) and a quiescent-like G0 state (qG0), and it incorporates a tunable parameter to filter out less certain classifications. The ccAFv2 classifier performed better than or equivalent to other state-of-the-art methods even while classifying more cell cycle states, including G0. We demonstrate that the ccAFv2 classifier is generalizable across cell types and all three germ layers by applying it to developing fetal cells. We showcased the versatility of ccAFv2 by successfully applying it to classify cells, nuclei, and spatial transcriptomics data in humans and mice, using various normalization methods and gene identifiers. We provide methods to regress the cell cycle expression patterns out of single cell or nuclei data to uncover underlying biological signals. The classifier can be used either as an R package integrated with Seurat or a PyPI package integrated with scanpy. We proved that ccAFv2 has enhanced accuracy, flexibility, and adaptability across various experimental conditions, establishing ccAFv2 as a powerful tool for dissecting complex biological systems, unraveling cellular heterogeneity, and deciphering the molecular mechanisms by which proliferation and quiescence affect cellular processes.
著者: Christopher L Plaisier, S. A. O'Connor, L. Garcia, A. P. Patel, B. B. Bartelle, J.-P. Hugnot, P. PADDISON
最終更新: 2024-09-22 00:00:00
言語: English
ソースURL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.04.16.589816
ソースPDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.04.16.589816.full.pdf
ライセンス: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
変更点: この要約はAIの助けを借りて作成されており、不正確な場合があります。正確な情報については、ここにリンクされている元のソース文書を参照してください。
オープンアクセスの相互運用性を利用させていただいた biorxiv に感謝します。
参照リンク
- https://github.com/plaisier-lab/ccafv2_R
- https://pypi.org/project/ccAF/
- https://doi.org/10.5281/zenodo.10963137
- https://github.com/plaisier-lab/ccAFv2
- https://hub.docker.com/r/cplaisier/ccafv2_extra
- https://hub.docker.com/r/cplaisier/ccnn
- https://pypi.org/project/ccAFv2/
- https://github.com/plaisier-lab/ccAFv2_py
- https://hub.docker.com/r/cplaisier/ccafv2_seurat4
- https://hub.docker.com/r/cplaisier/ccafv2_seurat5
- https://hub.docker.com/r/cplaisier/ccafv2_py