La minaccia dell'Ostreid Herpesvirus 1 ai molluschi
L'OsHV-1 rappresenta rischi significativi per l'allevamento di molluschi e gli ecosistemi acquatici.
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Indice
L'herpesvirus ostrideo 1, o OsHV-1, è un virus che colpisce invertebrati come capesante, vongole e ostriche. Questo virus rappresenta una minaccia seria per l'acquacoltura, causando alte mortalità in questi animali. Si diffonde facilmente e riesce a sopravvivere nell'ambiente, rendendolo difficile da controllare.
Dal 2012, molte morti nelle vongole arc in Cina sono state collegate a OsHV-1. In Francia, una versione specifica di questo virus è stata responsabile di morti tra le giovani ostriche, causando problemi finanziari e sociali notevoli. Recentemente, gli scienziati hanno trovato altri virus simili nelle acque costiere, suscitando preoccupazioni che potrebbero un giorno infettare anche gli esseri umani.
Per affrontare le sfide poste da OsHV-1, gli scienziati devono saperne di più su come il virus si replica e interagisce con i suoi ospiti. Credono che studiare il comportamento del virus a livello molecolare sia fondamentale per trovare modi per combatterlo. Un metodo efficace è utilizzare varie tecniche avanzate (note come 'omics') per raccogliere dati sul ciclo vitale del virus.
Il Processo di Infezione
I ricercatori hanno studiato come OsHV-1 infetta vongole e ostriche utilizzando metodi di sequenziamento sia vecchi che moderni. Dopo il primo focolaio segnalato in Francia, gli scienziati hanno sequenziato l'intero genoma di OsHV-1 per catalogarlo con altri herpesvirus. Hanno scoperto che è piuttosto diverso da altri herpesvirus noti, portando alla creazione di una nuova famiglia chiamata Malacoherpesviridae, che ora include un altro virus che colpisce le lumache.
Nonostante queste informazioni, il contesto evolutivo di Malacoherpesviridae e il loro legame con virus che infettano i vertebrati è ancora poco chiaro. Studi iniziali utilizzando una mappa genomica a bassa copertura hanno rivelato che il virus ha un array di geni più complesso di quanto si pensasse in precedenza. Recenti progressi nelle tecnologie di sequenziamento a lettura lunga hanno reso più facile studiare genomi virali così complessi.
Per saperne di più su OsHV-1, gli scienziati hanno raccolto campioni di RNA da vongole infette e li hanno sequenziati. Questo studio si è concentrato sulla comprensione dell'attività del virus, incluso come interagisce con le difese antivirali della vongola. I ricercatori hanno trovato vari punti di inizio e fine della trascrizione, suggerendo che il virus ha un modo complesso di comunicare le sue istruzioni genetiche.
Raccolta e Analisi dei Dati
Gli scienziati hanno iniettato tessuti infetti in vongole selvatiche e hanno prelevato campioni in vari momenti per analizzare i livelli di RNA e Proteine virali. Hanno scoperto che l'RNA del virus era quasi impercettibile fino a 24-36 ore dopo l'infezione, dopo di che è aumentato significativamente. Questo tempismo corrisponde all'inizio della morte nelle vongole.
Durante i loro esperimenti, hanno generato milioni di lunghe sequenze di RNA. La maggior parte di queste sequenze è stata categorizzata come rilevante per la vongola o per il virus. I dati della spettrometria di massa hanno poi confermato la presenza di un numero ridotto di proteine virali, indicando la presenza efficace del virus durante le osservazioni cliniche.
L'analisi delle sequenze di RNA ha mostrato che OsHV-1 produce numerosi trascritti. Identificando dove questi trascritti iniziano e finiscono, i ricercatori hanno creato un riferimento completo per studi futuri. Hanno osservato che alcuni trascritti erano più lunghi di altri, indicando un mix di molecole di RNA completo e più corte e incomplete.
Complessità del Trascrittoma
È stato documentato un totale di oltre un milione di sequenze di RNA legate a OsHV-1. Queste sequenze hanno rivelato 292 punti di inizio trascrizione e 201 punti di fine, portando all'identificazione di 2.274 potenziali trascritti. Alcuni di questi sono stati confermati come veri messaggi di RNA, mentre altri sembrano non codificanti. La ricerca ha anche evidenziato che molti trascritti associati a questo virus potrebbero codificare per più proteine contemporaneamente.
Il team ha identificato diversi tipi di molecole di RNA da OsHV-1, comprese quelle che non codificano per proteine. Hanno anche riconosciuto che alcuni geni venivano copiati più volte, producendo vari tipi di RNA dalla stessa regione genetica. Questo sottolinea la capacità del virus di produrre un insieme diversificato di proteine che potrebbero aiutarlo a prosperare in ambienti difficili.
La distribuzione delle lunghezze nelle sequenze di RNA ha indicato una tendenza, con la maggior parte di esse che si raggruppava attorno a dimensioni specifiche. Questo schema ha aiutato i ricercatori a capire quali porzioni del genoma virale venivano trascritte attivamente in diversi momenti durante l'infezione.
Espressione Genica in Fase Precoce e Tardiva
Analizzando i dati di RNA raccolti in diversi momenti, gli scienziati sono stati in grado di vedere quali geni virali erano attivati in diverse fasi dell'infezione. Hanno scoperto che, con il progredire dell'infezione, c'era una chiara differenza nei trascritti più abbondanti.
Durante le fasi iniziali dell'infezione, specifici geni responsabili della costruzione dello strato esterno del virus e della replicazione del genoma virale hanno iniziato a mostrare attività. Tuttavia, molti dei geni espressi in varie fasi non avevano funzioni conosciute, indicando che c'è ancora molto da imparare su come opera il virus.
I ricercatori hanno anche trovato una connessione tra i livelli di espressione dei geni virali e la presenza delle proteine virali identificate tramite spettrometria di massa. I dati suggerivano che alcune delle proteine virali più abbondanti erano cruciali per formare la struttura del virus e facilitare la sua replicazione.
Capside
Comprendere la Formazione delLa formazione del guscio esterno del virus (il capside) è fondamentale per la sua capacità di infettare nuovi ospiti. I ricercatori hanno esaminato diversi geni coinvolti nella costruzione di questa struttura. Hanno scoperto che diversi trascritti erano coinvolti nella codifica di proteine necessarie per l'assemblaggio e la maturazione del capside.
Attraverso i loro studi, hanno notato che le proteine che influenzano la struttura del capside erano presenti in quantità diverse. Questo suggerisce che svolgono ruoli specifici nel ciclo vitale del virus. I ricercatori hanno osservato che i livelli di espressione di alcune di queste proteine variavano notevolmente, indicando un sistema di regolazione complesso che assicura che il virus possa creare efficacemente nuove particelle infettive.
Hanno anche scoperto che alcune proteine importanti erano collegate, il che significa che geni specifici potrebbero lavorare insieme durante il processo di formazione di nuove particelle virali. Questa relazione è importante per capire come il virus riesca ad assemblare e maturare con successo.
Editing Virale e Meccanismi di Difesa
La ricerca si è concentrata anche su come il virus interagisce con la macchina cellulare dell'ospite responsabile dell'editing dell'RNA. Una proteina specifica nelle vongole, nota come ADAR, modifica le molecole di RNA per difendersi dai virus estranei, e ci sono prove che suggeriscono che OsHV-1 potrebbe manipolare questo sistema a suo favore.
I ricercatori hanno identificato numerosi edit fatti all'RNA virale mentre si esprimeva all'interno della vongola. Questo indica che OsHV-1 si è adattato per usare le capacità di editing dell'ospite per alterare il suo RNA, potenzialmente migliorando la sua capacità di eludere le difese dell'ospite.
Hanno scoperto che certe regioni del genoma virale erano molto modificate, mentre altre mostrano cambiamenti più moderati. Questo mix di schemi di editing punta a un'interazione sofisticata tra il virus e la risposta immunitaria della vongola, con il virus capace di modificare il proprio comportamento in base alle difese dell'ospite.
Implicazioni e Ricerca Futura
Le informazioni ottenute dallo studio di OsHV-1 offrono dati preziosi che possono aiutare ad affrontare le sfide delle infezioni virali negli organismi marini. Con la crescita dell'acquacoltura, capire come funzionano e influenzano i virus i loro ospiti è cruciale per sviluppare nuove strategie di gestione.
I dati sottolineano l'importanza di un'esplorazione continua delle interazioni tra i genomi virali e i loro ospiti. Approfondendo la nostra comprensione di queste relazioni, gli scienziati possono elaborare approcci mirati per mitigare gli impatti di virus come OsHV-1 sugli ecosistemi acquatici e le economie.
Studi futuri dovrebbero concentrarsi nel dettagliare i ruoli dei diversi geni identificati, in particolare quelli con funzioni sconosciute. Maggiore ricerca su come OsHV-1 manipola le difese dell'ospite ci avvicinerà alla comprensione di come proteggere le popolazioni marine vulnerabili da focolai così devastanti.
Conclusione
OsHV-1 rappresenta un esempio significativo di un patogeno virale che colpisce invertebrati, specialmente in contesti di acquacoltura. L'ampia ricerca condotta su questo virus rivela la sua complessa composizione genetica e le intricate interazioni che ha con il suo ospite. Gli studi in corso continueranno a far luce sul comportamento virale e sui meccanismi che impiega per sopravvivere e prosperare, aiutando in ultima analisi gli sforzi per salvaguardare le popolazioni marine colpite.
Titolo: Long-read transcriptomics of Ostreid herpesvirus 1 uncovers a conserved expression strategy for the capsid maturation module and pinpoints a mechanism for evasion of the ADAR-based antiviral defence
Estratto: Ostreid herpesvirus 1 (OsHV-1), a member of the family Malacoherpesviridae (order Herpesvirales), is a major pathogen of bivalves. However, the molecular details of the malacoherpesvirus infection cycle and its overall similarity to the replication of mammalian herpesviruses (family Orthoherpesviridae) remain obscure. Here, to gain insights into the OsHV-1 biology, we performed long read sequencing of infected blood clams, Anadara broughtonii, which yielded over one million OsHV-1 long reads. This data enabled the annotation of the viral genome with 78 gene units and 274 transcripts, of which 67 were polycistronic mRNAs, 35 ncRNAs and 20 natural antisense transcripts (NATs). Transcriptomics and proteomics data indicate preferential transcription and independent translation of the capsid scaffold protein as an OsHV-1 capsid maturation protease isoform. The conservation of this transcriptional architecture across Herpesvirales likely indicates its functional importance and ancient origin. Moreover, we traced RNA editing events using short read sequencing and supported the presence of inosine nucleotides in native OsHV-1 RNA, consistent with the activity of ADAR1. Our data suggests that, whereas RNA hyper-editing is concentrated in specific regions of the OsHV-1 genome, single nucleotide editing is more dispersed along OsHV-1 transcripts. In conclusion, we revealed the existence of a conserved pan-Herpesvirales transcriptomic architecture of the capsid maturation module and uncovered a transcription-based viral counter defence mechanism presumably facilitating the evasion of the host ADAR antiviral system. Author SummaryOstreid herpesvirus 1 (OsHV-1, family Malacoherpesviridae) is a major pathogen of bivalve species, causing devasting mortalities and substantial economic losses of aquaculture species. The divergence of OsHV-1 compared to more extensively studied mammalian herpesviruses (family Orthoherpesviridae) hampered the understanding of its biology. We performed a deep characterization of the OsHV-1 transcriptome based on long-read RNA sequencing produced from experimentally infected blood clams (Anadara broughtonii). Owing to the superior power of long read sequencing to disentangle overlapping transcript isoforms, we could reveal the complexity of the OsHV-1 transcriptome, composed of 274 transcripts. Despite the extensive divergence of OsHV-1 from vertebrate herpesviruses, we reported the presence of a pan-Herpesvirales transcriptomic architecture of the capsid maturation module, likely underpinning a conserved functional role in capsid assembly. Furthermore, we revealed the peculiar OsHV-1 transcriptomic patterns, presumably facilitating the evasion of the ADAR anti-viral defence system. In particular, OsHV-1 generates "molecular decoys" by co-expressing sense-antisense transcripts that sequester most ADAR RNA hyper-editing. Both these aspects support the existence of a functional role of "transcriptional architecture" in OsHV-1, contributing to a better understanding of the molecular behaviour of this virus.
Autori: Umberto Rosani, E. Bortoletto, X. Zhang, B.-W. Huang, L.-S. Xin, M. Krupovic, C.-M. Bai
Ultimo aggiornamento: 2024-05-03 00:00:00
Lingua: English
URL di origine: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.05.03.592320
Fonte PDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.05.03.592320.full.pdf
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