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Un composto naturale mostra potenziale contro i batteri resistenti ai farmaci

La ricerca evidenzia il potenziale dell'acido protocatechuico nel combattere le infezioni da Klebsiella pneumoniae resistenti.

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Klebsiella Pneumoniae è un tipo di batterio che si trova in diverse parti del corpo, come la pelle, i polmoni e il sistema digestivo. È presente anche nell'ambiente. Questo batterio può causare seri problemi di salute, soprattutto nelle persone con sistemi immunitari deboli. Alcune delle malattie che può provocare includono polmonite, infezioni nel sangue, infezioni del tratto urinario e meningite.

Questo batterio può essere trasmesso dagli animali agli esseri umani tramite il cibo o il contatto diretto, rendendolo una preoccupazione sia per la salute pubblica che per l'agricoltura. Purtroppo, Klebsiella pneumoniae è diventata resistente a molti Antibiotici a causa del loro uso eccessivo. Questa resistenza, soprattutto a un gruppo di potenti antibiotici chiamati carbapenemi, rende molto difficile il trattamento delle infezioni.

Recentemente è stato identificato un nuovo e pericoloso tipo di Klebsiella pneumoniae. Questo tipo non solo resiste ai carbapenemi, ma è anche molto virulento, il che significa che può causare malattie più gravi. Questo tipo di batterio è ora visto come una seria nuova minaccia per la salute pubblica.

La necessità di nuovi trattamenti

A causa del crescente problema della resistenza agli antibiotici, c'è un bisogno urgente di trovare nuovi trattamenti per affrontare le infezioni causate da questo batterio resistente. Una delle aree promettenti riguarda l'uso di sostanze naturali estratte dalle piante come agenti antibatterici.

I composti vegetali naturali possono essere sicuri ed efficaci e spesso hanno meno effetti collaterali rispetto agli antibiotici tradizionali. Alcuni di questi composti naturali includono flavonoidi, acidi fenolici, tannini e antociani. Queste sostanze possono influenzare i batteri in vari modi, come danneggiando le loro pareti cellulari e disturbando la loro produzione di energia.

Introduzione all'acido protocatechuico

Uno di questi composti è l'acido protocatechuico (PCA). Questo è un acido fenolico che si può trovare in vari frutti e verdure, come more, fragole e tè. Il PCA è noto per i suoi molti benefici per la salute, tra cui la riduzione dell'infiammazione e la lotta contro il cancro. Mostra anche alcune caratteristiche antibatteriche e può inibire la crescita di diversi tipi di batteri.

È stato dimostrato che il PCA ferma la formazione di Biofilm in Klebsiella pneumoniae, il che significa che può prevenire i batteri dall’attaccarsi insieme e formare strati protettivi che li rendono più difficili da uccidere. Tuttavia, l'efficacia del PCA contro i tipi di Klebsiella pneumoniae più resistenti e il modo in cui funziona non è ancora completamente compresa.

Il focus dello studio

Questo studio ha esaminato come il PCA influisce sulla crescita e sul comportamento di Klebsiella pneumoniae. L'obiettivo era vedere se il PCA potesse interrompere le normali funzioni di questo batterio e lavorare con gli antibiotici per eliminare queste infezioni resistenti.

I ricercatori hanno utilizzato due ceppi di Klebsiella pneumoniae resistenti ai carbapenemi. Hanno controllato come il PCA influenzava la capacità dei batteri di crescere e sopravvivere in diverse condizioni. Hanno anche esaminato come il PCA interagisce con le funzioni chiave dei batteri, come la formazione di biofilm e la stabilità della membrana cellulare.

Testare le proprietà antibatteriche del PCA

I ricercatori hanno testato diverse concentrazioni di PCA per scoprire come influisce sulla crescita dei batteri. Hanno misurato la quantità minima di PCA necessaria per fermare la crescita dei batteri, chiamata concentrazione minima inibitoria (MIC). Hanno trovato che il PCA poteva inibire significativamente la crescita dei batteri a concentrazioni più basse.

Per vedere come il PCA funzionasse nel tempo, hanno misurato la crescita batterica in diversi momenti dopo il trattamento. I risultati hanno mostrato che concentrazioni più elevate di PCA portavano a una maggiore riduzione della crescita batterica.

Hanno anche utilizzato un metodo di colorazione speciale per osservare la struttura dei batteri. I risultati hanno indicato che il PCA causava danni al DNA dei batteri, poiché la fluorescenza (o luminosità) mostrava irregolarità che indicavano un’integrità del DNA compromessa.

Valutare la sicurezza

Per valutare la sicurezza del PCA sui tessuti umani, gli scienziati hanno condotto un test di emolisi. Questo test determina come il PCA influisce sui globuli rossi. Hanno scoperto che il PCA sembra essere sicuro alle concentrazioni efficaci contro i batteri, poiché non ha danneggiato i globuli rossi.

Valutare lo sviluppo della resistenza

Lo studio ha ulteriormente testato se Klebsiella pneumoniae avrebbe sviluppato resistenza al PCA nel tempo. Hanno scoperto che, a differenza degli antibiotici tradizionali che portano spesso alla resistenza, il PCA non sembrava indurre alcuna resistenza significativa nei batteri dopo molte generazioni di esposizione.

Effetti sinergici con gli antibiotici

Poiché il PCA ha mostrato potenziale come agente antibatterico, i ricercatori hanno anche indagato se il PCA potesse aumentare l'efficacia degli antibiotici esistenti, in particolare il meropenem. I risultati hanno indicato che il PCA poteva ridurre significativamente la MIC per il meropenem, suggerendo un forte effetto sinergico quando entrambe le sostanze venivano utilizzate insieme.

Inibizione della formazione di biofilm

I biofilm batterici sono spesse strati di batteri che si attaccano alle superfici, rendendoli difficili da trattare. Lo studio ha valutato come il PCA influenzasse la formazione di biofilm in Klebsiella pneumoniae. Utilizzando test specifici, hanno determinato che il PCA riduceva significativamente la capacità dei batteri di formare biofilm.

Attraverso una serie di test aggiuntivi, i ricercatori hanno scoperto che il PCA causava livelli più bassi di sostanze polimeriche extracellulari (le sostanze zuccherine che compongono i biofilm). Questa riduzione indica che il PCA può interferire con il modo in cui i batteri si attaccano tra loro.

Effetti sulla membrana batterica

La membrana cellulare batterica è fondamentale per la sua sopravvivenza e funzionamento. È stato riscontrato che il PCA alterava la struttura della membrana cellulare dei batteri, rendendola ruvida e irregolare. Questo cambiamento strutturale può portare a un aumento della permeabilità della membrana, consentendo a più sostanze di entrare o uscire dai batteri.

I ricercatori hanno testato l'impatto del PCA sia sulle membrane interne che su quelle esterne. Hanno scoperto che il PCA aumentava la permeabilità di entrambe le membrane, indicativo del fatto che la barriera protettiva dei batteri era compromessa. Questo cambiamento può influenzare il modo in cui i batteri funzionano e come rispondono ai trattamenti.

Impatto sul Metabolismo

Il PCA non solo influisce sulla struttura ma anche sul metabolismo di Klebsiella pneumoniae. I processi metabolici sono importanti per la produzione di energia e il funzionamento generale dei batteri. Dopo aver trattato i batteri con il PCA, i ricercatori hanno riscontrato cambiamenti in alcune vie metaboliche chiave.

Lo studio ha evidenziato cambiamenti significativi in due principali vie metaboliche: la via del fosfato pentoso (PPP) e la glicolisi. Entrambe le vie sono fondamentali per generare energia e altre sostanze necessarie.

Il trattamento con PCA ha ridotto l'attività di enzimi critici in queste vie. Questa riduzione porta a uno squilibrio nello stato redox dei batteri, che è essenziale per un corretto funzionamento cellulare. Quando l'equilibrio è disturbato, i batteri possono diventare più suscettibili allo stress ossidativo, il che significa che sono più vulnerabili ai danni da specie reattive dell'ossigeno (ROS).

Indurre stress ossidativo

La via del fosfato pentoso è vitale per la produzione di NADPH, una molecola che aiuta a contrastare lo stress ossidativo. Lo studio ha scoperto che il trattamento con PCA abbassava i livelli di NADPH in Klebsiella pneumoniae, rendendo i batteri più soggetti ai danni da ROS.

Di conseguenza, i ricercatori hanno notato un aumento dei livelli di ROS e un aumento del malondialdeide (MDA), che indica danni ossidativi all'interno delle cellule batteriche. Maggiore è il danno subito dai batteri, minori sono le probabilità che sopravvivano e si riproducano.

Inoltre, il trattamento con PCA ha causato una diminuzione dei livelli di ATP intracellulari. L'ATP è la valuta energetica della cellula, e livelli più bassi indicano che i batteri stanno facendo fatica a mantenere le loro funzioni essenziali.

Conclusione

Questo studio suggerisce che l'acido protocatechuico (PCA) è un candidato promettente nella lotta contro Klebsiella pneumoniae resistente ai farmaci. Il PCA non solo inibisce la crescita di questo batterio persistente, ma mostra anche il potenziale di potenziare gli effetti degli antibiotici esistenti.

La capacità del PCA di interrompere la formazione di biofilm e alterare i processi metabolici e la membrana cellulare dei batteri potrebbe offrire nuove strategie per trattare infezioni che sono diventate difficili a causa della resistenza agli antibiotici.

Con le crescenti preoccupazioni riguardo ai batteri resistenti ai farmaci, l'uso di composti naturali come il PCA potrebbe aprire la strada a trattamenti più sicuri ed efficaci. La ricerca continua su agenti antibatterici naturali rimane fondamentale per affrontare le sfide in evoluzione nella gestione delle malattie infettive.

Man mano che gli scienziati apprendono di più sul PCA e sui suoi meccanismi d'azione, c'è speranza per lo sviluppo di nuove terapie in grado di combattere con successo i batteri resistenti agli antibiotici e migliorare i risultati per i pazienti.

Fonte originale

Titolo: Protocatechuic acid induces endogenous oxidative stress in CR-hvKP by regulating the EMP-PPP pathway

Estratto: BackgroundKlebsiella pneumoniae is an important opportunistic pathogen and zoonotic pathogen. The widespread use of antibiotics has led to the emergence of a large number of multidrug-resistant Klebsiella pneumoniae in clinical animal husbandry, posing a serious threat to global health security. Protocatechuic acid (PCA) is a phenolic acid substance naturally present in many vegetables and fruits. It is a safe and highly developed new type of antibacterial synergist. PurposeThis study explored the antibacterial and synergistic mechanisms of PCA against Carbapenem-resistant hypervirulent Klebsiella pneumoniae. Study designMetabolomic analysis using PCA to investigate the metabolic effects of CR-hvKP and further explore the antibacterial mechanisms resulting from this metabolic regulation. MethodsThe MIC of PCA was measured by microdilution, and its bactericidal effect was observed by DAPI staining. Resistance and hemolysis tests were performed to ensure safety. The synergy of PCA and meropenem was tested by checkerboard assay. The biofilm inhibition was assessed by crystal violet and EPS assays. The membrane morphology, permeability, and potential were examined by SEM, PI, NPN, and DiSC3(5). The metabolic changes were evaluated by AlamarBlue, metabolomics, enzyme activity, ELISA, molecular docking, and qRT-PCR. The oxidative stress and metabolic disorders were verified by NADP(H), ROS, MDA, and ATP assays. ResultsThe results showed that PCA can synergize with antibiotics and inhibit the biofilm and membrane functions of CR-hvKP at low concentrations. Metabolomics revealed that PCA affects the EMP and PPP pathways of CR-hvKP, causing oxidative stress. This involves the binding of PGAM and the downregulation of BPGM, leading to the accumulation of glycerate-3P. This results in the inhibition of G6PDH and the imbalance of NADPH/NADP+, disrupting the energy metabolism and increasing the oxidative stress, which impair the biofilm and membrane functions and enhance the antibiotic efficacy. ConclusionThe results demonstrate that PCA regulates the EMP-linked PPP pathway of CR-hvKP, inhibits biofilm and membrane functions, and synergizes with antibiotics to kill bacteria, providing new insights and candidates for natural antibacterial enhancers. Author SummaryKlebsiella pneumoniae is a common pathogenic bacterium that can infect both humans and animals, causing serious diseases such as pneumonia, meningitis, and sepsis. Due to the overuse of antibiotics, this bacterium has developed resistance to many drugs, posing a significant threat to global health security. Through our research, we have discovered a natural substance called protocatechuic acid (PCA) that can enhance the effectiveness of antibiotics against this bacterium. PCA is found in many vegetables and fruits and is a safe and non-toxic antibacterial adjuvant. Our analysis of the metabolomics of PCA on Klebsiella pneumoniae has revealed its antibacterial and synergistic mechanisms. The study found that PCA can affect the bacteriums sugar metabolism pathway, leading to the generation of endogenous oxidative stress. This disrupts their energy metabolism, damages their cell membranes and biofilms, making them more susceptible to being killed by antibiotics. Through this mechanism, PCA can synergize with common antibiotics such as meropenem, enhancing their bactericidal ability. Our research has demonstrated that PCA is an effective antibacterial adjuvant, providing new candidates and insights for the development of natural antibacterial agents. Graphical abstract O_FIG O_LINKSMALLFIG WIDTH=200 HEIGHT=104 SRC="FIGDIR/small/583678v1_ufig1.gif" ALT="Figure 1"> View larger version (27K): [email protected]@9f3c51org.highwire.dtl.DTLVardef@3125a8org.highwire.dtl.DTLVardef@9f39b7_HPS_FORMAT_FIGEXP M_FIG C_FIG

Autori: Hong-Bin Si, Y. Zhong, Y. Cheng, S. Xing, X. Zhang, S. Luo, X. Shi, Y. He, H. Liu, M. Yang

Ultimo aggiornamento: 2024-03-07 00:00:00

Lingua: English

URL di origine: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.03.06.583678

Fonte PDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.03.06.583678.full.pdf

Licenza: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/

Modifiche: Questa sintesi è stata creata con l'assistenza di AI e potrebbe presentare delle imprecisioni. Per informazioni accurate, consultare i documenti originali collegati qui.

Si ringrazia biorxiv per l'utilizzo della sua interoperabilità ad accesso aperto.

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