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Il Ruolo dei Batteri nella Produzione di Polisaccaridi

I batteri creano polisaccaridi che svolgono funzioni vitali nella natura e nell'industria.

Luca Blöcher, Johannes Schwabe, Timo Glatter, Lotte Søgaard-Andersen

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Batteri: Maestri dei Batteri: Maestri dei Polisaccaridi applicazioni. polisaccaridi essenziali per varie I batteri producono in modo efficiente
Indice

I batteri sono piccole cose viventi che ci circondano e svolgono tanti ruoli nelle nostre vite. Alcuni tipi di batteri producono sostanze zuccherine speciali chiamate Polisaccaridi. Questi polisaccaridi sono molto importanti per diverse funzioni biologiche. Aiutano i batteri ad attaccarsi alle superfici, a formare strati protettivi chiamati Biofilm e persino a sfuggire ai virus. Alcuni batteri usano queste sostanze per interagire con gli ospiti, come esseri umani o piante, e possono anche rendersi più dannosi.

Curiosamente, questi polisaccaridi non sono utili solo per i batteri; possono anche essere utilizzati nel cibo che mangiamo, nella medicina e in altri prodotti. Così, mentre i batteri possono farci pensare a germi e malattie, sono anche coinvolti nella produzione di cose che possono essere molto utili!

Come i Batteri Producono Polisaccaridi

I batteri producono e trasportano polisaccaridi attraverso tre principali percorsi. Pensa a questi percorsi come a diverse autostrade che i batteri usano per portare il loro carico zuccherato a destinazione. Le tre autostrade si chiamano:

  1. Percorso dipendente da Wzx/Wzy
  2. Percorso dipendente da ABC transporter
  3. Percorso dipendente da sintasi

Nel percorso dipendente da Wzx/Wzy, che è il più comune, il processo inizia nella parte interna della membrana cellulare del batterio. Un enzima speciale chiamato fosfoglicosiltransferasi (lo chiameremo PGT per abbreviare) prende una molecola di zucchero da un nucleotide e la aggiunge a un'altra molecola chiamata Und-P. Questo crea una nuova molecola che combina entrambi i pezzi.

Poi, altri enzimi chiamati glicosiltransferasi (o GT per abbreviare) aggiungono più pezzi di zucchero per creare una catena. Questa catena viene poi girata dall'altro lato della membrana, dove un altro enzima chiamato Wzy interviene per aiutare a unire queste catene di zucchero in una grande e lunga struttura.

Per assistere a tutti questi processi, un'altra proteina integrale lavora insieme all'enzima Wzy. Questa proteina è conosciuta come polisaccaride co-polimerasi (PCP). Anche se gli scienziati stanno ancora cercando di capire come esattamente il PCP aiuti, sembra lavorare a stretto contatto con Wzy.

Una volta che la catena di polisaccaridi è pronta, viaggia attraverso un'altra parte della membrana per uscire dalla cellula batterica. Questa parte può usare o una proteina di esportazione speciale o una combinazione di due diverse proteine per trasportare il polisaccaride.

Il Ruolo delle Proteine Chiave nella Produzione di Polisaccaridi

In questo processo, le proteine PCP sono importanti. Ci sono due tipi di queste proteine, conosciute come PCP-1 e PCP-2. I tipi PCP-1 sono responsabili dei percorsi che producono polisaccaridi specifici, come quelli presenti in alcuni batteri. Hanno una struttura unica che consente loro di formare complessi ottamerici-pensa a un gruppo di otto proteine che lavorano insieme.

D'altra parte, le proteine PCP-2 sono coinvolte nella creazione di polisaccaridi capsulari e secreti. Condividono anche una struttura simile con due parti trasmembrana e un dominio più grande che si sporge nello spazio tra le membrane.

Curiosamente, le proteine PCP-2 hanno un dominio enzima speciale chiamato tirosin-chinasi batterica (BYK), che è essenziale per il loro lavoro. La maggior parte delle PCP-2 nei batteri è una combinazione della parte PCP e della parte BYK tutte in un pezzo. Tuttavia, alcune altre sono separate, e questa separazione è un po' più comune in batteri diversi.

L'Esempio di E. coli

Per illustrare come funzionano queste proteine, diamo un'occhiata a uno dei batteri più studiati: Escherichia coli, o E. coli per abbreviare. La proteina Wzc in E. coli è fondamentale per fare e muovere i polisaccaridi. Questa proteina si riunisce in forme ottameriche quando solo alcune delle sue sezioni importanti sono modificate.

In questi complessi, le parti BYK degli ottameri sono disposte in modo circolare, creando una struttura che consente interazioni tra le singole proteine. Se si verificano troppe modifiche, la struttura ottamerica si rompe, il che non è ideale per i batteri.

In risposta a questo, una speciale proteina fosfatasi aiuta a resettare le modifiche, permettendo all'ottamero di riformarsi.

Come Altri Batteri Producono Polisaccaridi

Un altro esempio interessante è Staphylococcus aureus, noto per il suo ruolo nelle infezioni umane. Le proteine CapA e CapB sono essenziali per produrre la sua capsula protettiva, e interagiscono strettamente come una coppia di ballo. Quando una parte non funziona, l'altra non può funzionare correttamente.

D'altra parte, Myxococcus xanthus è un batterio affascinante che produce un esopolisaccaride (EPS), cruciale per molti dei suoi comportamenti, come movimento e formazione di colonie. Il processo di produzione dell'EPS assomiglia a quello di E. coli, ma ci sono anche proteine uniche coinvolte qui.

Scoprendo EcpK

Recenti studi hanno introdotto un nuovo personaggio nella storia della produzione di polisaccaridi: EcpK. Si pensa che questa proteina giochi un ruolo nel percorso di biosintesi dell'EPS di Myxococcus xanthus. I ricercatori credono che EcpK agisca come un partner della proteina EpsV precedentemente menzionata, aiutandola a funzionare correttamente.

A differenza della maggior parte delle chinasi, EcpK non ha i componenti usuali necessari per agire come un enzima attivo. Invece, sembra comportarsi più come un aiuto o un'impalcatura, assicurandosi che tutto funzioni senza dover svolgere le attività tipiche delle chinasi. Ha una struttura speciale che le consente di adattarsi bene con EpsV.

L'Interazione Tra EcpK e EpsV

La relazione tra EcpK ed EpsV sembra essere di mutuo supporto. Sembrano stabilizzarsi a vicenda, il che significa che se uno manca, l'altro non funziona altrettanto bene. Questo è stato dimostrato in vari esperimenti che misurano i livelli di proteine nelle cellule batteriche.

Quando i ricercatori hanno disattivato la funzione di EcpK, hanno scoperto che i livelli di EpsV diminuivano notevolmente. Al contrario, i livelli di EcpK diminuivano quando EpsV veniva rimosso. Si aiutano a vicenda, il che è davvero una partnership impressionante!

Quando Le Cose Vanno Storte

Per vedere come EcpK influisce sulla produzione di EPS, i ricercatori hanno creato una versione di Myxococcus xanthus priva di EcpK. Questo ceppo mutante ha avuto difficoltà a produrre EPS, portando a differenze evidenti nel modo in cui si muoveva e cresceva.

I ricercatori hanno anche testato il movimento del ceppo su diversi tipi di superfici, rivelando che l'assenza di EcpK ha portato agli stessi problemi di motilità della rimozione di altre proteine essenziali nella macchina di produzione di EPS.

Tuttavia, quando hanno reinserito EcpK nel mix, tutto è tornato alla normalità. Questo ha confermato che EcpK gioca un ruolo cruciale nella produzione di EPS e nel comportamento generale del batterio.

Come EcpK ed EpsV Si Uniscono

Il team scientifico ha esaminato come EcpK ed EpsV possano interagire fisicamente. Hanno usato modelli al computer per visualizzare le loro possibili connessioni, proponendo una struttura in cui EcpK si avvolge attorno al C-terminale di EpsV. Questa interazione sembra aiutare a rafforzare la loro funzionalità insieme.

Quando il team ha simulato il duo EcpK ed EpsV in laboratorio, è stato in grado di vedere come potessero creare una partnership stabile attraverso le attrazioni nelle loro strutture.

Lezioni Apprese e Direzioni Future

Questa ricerca sta aprendo la strada per comprendere come alcuni batteri funzionino a livello molecolare. La storia di EcpK ed EpsV mette in evidenza come i batteri possano utilizzare metodi innovativi per fare sostanze importanti senza utilizzare tipi di proteine o meccanismi standard.

Riconoscendo come queste proteine funzionano insieme, gli scienziati possono pianificare studi futuri per esplorare meccanismi simili in altri batteri. Questo include capire cosa succede non solo in Myxococcus xanthus ma anche in vari altri batteri che producono polisaccaridi.

Quindi, mentre i batteri potrebbero non essere gli organismi più glamour là fuori, sanno sicuramente come lavorare insieme e creare sostanze essenziali che rendono possibile la vita sulla Terra! E chissà, magari la prossima volta che penserai ai batteri, li immaginerai come piccole fabbriche di zucchero che lavorano sodo dietro le quinte.

Fonte originale

Titolo: Identification of EcpK, a bacterial tyrosine pseudokinase important for exopolysaccharide biosynthesis in Myxococcus xanthus

Estratto: Bacteria synthesize and export chemically diverse polysaccharides that function in many physiological processes and are widely used in industrial applications. In the ubiquitous Wzx/Wzy-dependent biosynthetic pathways for these polysaccharides, the polysaccharide co-polymerase (PCP) facilitates the polymerization of repeat units in the periplasm, and in Gram-negative bacteria, also polysaccharide translocation across the outer membrane. These PCPs are integral inner membrane proteins with extended periplasmic domains, and functionally depend on alternating between different oligomeric states. The oligomeric state, in turn, is determined by a cognate cytoplasmic bacterial tyrosine kinase (BYK), which is either part of the PCP or a stand-alone protein. Interestingly, BYK-like proteins, which lack key catalytic residues and/or the phosphorylated Tyr residues, have been described. In Myxococcus xanthus, the exopolysaccharide (EPS) is synthesized and exported via the Wzx/Wzy-dependent EPS pathway in which EpsV serves as the PCP. Here, we confirm that EpsV lacks the BYK domain. Using phylogenomics, experiments and computational structural biology, we identify EcpK as important for EPS biosynthesis and show that it structurally resembles canonical BYKs but lacks residues important for catalysis and Tyr phosphorylation. Using proteomic analyses, two-hybrid assays and structural modeling, we demonstrate that EcpK directly interacts with EpsV. Based on these findings, we suggest that EcpK is a BY pseudokinase and functions as a scaffold, which by direct protein-protein interactions, rather than by Tyr phosphorylation, facilitates EpsV function. EcpK and EpsV homologs are present in other bacteria, suggesting a broad conservation of this mechanism. ImportanceBacteria produce a variety of polysaccharides with important biological functions. In Wzx/Wzy-dependent pathways for the biosynthesis of secreted and capsular polysaccharides in Gram-negative bacteria, the polysaccharide co-polymerase (PCP) is a key protein that facilitates repeat unit polymerization and polysaccharide translocation across the outer membrane. PCP function depends on assembly/disassembly cycles that are determined by the phosphorylation/dephosphorylation cycles of an associated bacterial tyrosine kinase (BYK). Here, we identify the BY pseudokinase EcpK as essential for exopolysaccharide biosynthesis in Myxococcus xanthus. Based on experiments and computational structural biology, we suggest that EcpK is a scaffold protein, guiding the assembly/disassembly cycles of the partner PCP via binding/unbinding cycles independently of Tyr phosphorylation/dephosphorylation cycles. We suggest that this novel mechanism is broadly conserved.

Autori: Luca Blöcher, Johannes Schwabe, Timo Glatter, Lotte Søgaard-Andersen

Ultimo aggiornamento: 2024-11-26 00:00:00

Lingua: English

URL di origine: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.11.26.625375

Fonte PDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.11.26.625375.full.pdf

Licenza: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/

Modifiche: Questa sintesi è stata creata con l'assistenza di AI e potrebbe presentare delle imprecisioni. Per informazioni accurate, consultare i documenti originali collegati qui.

Si ringrazia biorxiv per l'utilizzo della sua interoperabilità ad accesso aperto.

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