Le rôle du riboswitch Guanidine-IV dans la régulation des gènes
Les riboswitches guanidine-IV régulent l'expression des gènes en changeant de forme en réponse à la guanidine.
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Table des matières
- Structure des Riboswitches
- Types de Riboswitches
- Comment Fonctionne le Riboswitch Guanidine-IV
- Importance des Changements Conformationnels
- Investigation du Riboswitch Guanidine-IV
- Structure du Riboswitch Guanidine-IV
- Technique smFRET
- Influence des Changements Conformationnels
- Observation des Riboswitches Pendant la Transcription
- Régulation du Riboswitch à Travers la Transcription
- Conclusion
- Source originale
Les Riboswitches sont des parties spéciales de l'ARN qui aident à contrôler comment les gènes sont activés ou désactivés. On les trouve généralement au début de l'ARN qui transporte l'information génétique. Ces riboswitches peuvent changer de forme en se liant à de petites molécules spécifiques, ce qui leur permet de réguler l'Expression génique.
Structure des Riboswitches
Un riboswitch typique a deux parties principales : l'aptamère et la plateforme d'expression. L'aptamère est la partie qui se lie à une petite molécule spécifique, tandis que la plateforme d'expression est chargée d'affecter l'activité du gène. Quand l'aptamère se lie à sa molécule cible, ça provoque un changement dans la structure globale du riboswitch. Ce changement peut soit activer, soit éteindre l'expression du gène.
Types de Riboswitches
Les scientifiques ont découvert plein de types différents de riboswitches-plus de 55 classes jusqu'à présent. Ces riboswitches peuvent reconnaître une grande variété de petites molécules, comme des acides aminés, des ions et d'autres métabolites. Certains riboswitches réagissent aux mêmes molécules mais peuvent avoir des résultats et des formes différents.
Par exemple, il y a quatre types de riboswitches qui répondent à la guanidine, une petite molécule. Les différents types de riboswitches guanidine peuvent avoir des fonctions et des Structures variées. Le riboswitch guanidine-IV est unique parce qu'il peut promouvoir la production d'une protéine spécifique quand la guanidine est présente, aidant la cellule à gérer les niveaux de guanidine et à éviter la toxicité.
Comment Fonctionne le Riboswitch Guanidine-IV
Le riboswitch guanidine-IV peut changer de forme lorsqu'il se lie à la guanidine. Cette liaison lui permet de créer une structure qui soutient la production d'une protéine spécifique. Cette protéine aide à gérer les niveaux de guanidine à l'intérieur de la cellule, faisant du riboswitch guanidine-IV une cible potentielle pour développer de nouveaux antibiotiques.
Même si les chercheurs n'ont pas encore déterminé la structure atomique exacte du riboswitch guanidine-IV, ils pensent qu'une partie spécifique de celui-ci, appelée boucle de baisers, se forme quand la guanidine se lie. Cette boucle de baisers aide à libérer une structure qui arrête généralement la production de gènes, permettant au gène d'être exprimé à la place.
Importance des Changements Conformationnels
La manière dont l'ARN se plie pendant sa fabrication est super importante pour sa fonction, surtout dans les riboswitches qui aident à contrôler l'action des gènes. Les chercheurs ont regardé de près comment divers riboswitches se plient en utilisant différentes méthodes. Par exemple, certaines études ont utilisé des outils spéciaux pour observer comment un riboswitch d'adénine se plie à un niveau de molécule unique.
D'autres études ont utilisé des méthodes comme la résonance magnétique nucléaire (RMN) pour explorer le pliage de différents riboswitches à un niveau plus détaillé. Ils ont découvert que les structures de riboswitches peuvent changer en fonction des conditions ou des molécules présentes.
Malgré ces découvertes, il reste encore beaucoup à apprendre sur comment le riboswitch guanidine-IV change de forme pendant le processus de fabrication de l'ARN.
Investigation du Riboswitch Guanidine-IV
Dans des recherches récentes, les scientifiques ont utilisé une méthode appelée étiquetage spécifique à la position pour étudier le riboswitch guanidine-IV. Ils ont étiqueté des parties spécifiques du riboswitch avec des marqueurs fluorescents pour observer comment il change de forme lorsqu'il est exposé à la guanidine et aux ions de magnésium.
Les résultats ont montré que la guanidine et le magnésium aident le riboswitch à former une structure spécifique qui est importante pour sa fonction. Cependant, l'effet de ces molécules sur différentes parties du riboswitch variait. Par exemple, alors que la partie aptamère du riboswitch réagissait bien à la guanidine et au magnésium, les autres parties montraient moins de sensibilité.
Structure du Riboswitch Guanidine-IV
Les chercheurs se sont concentrés sur le riboswitch guanidine-IV trouvé dans un type de bactérie appelé Clostridium botulinum. Ils ont étudié comment ses parties sont arrangées en l'absence et en présence de guanidine. Sans guanidine, le riboswitch présente une structure conçue pour arrêter la production d'ARN. Cependant, quand la guanidine est présente, le riboswitch change de forme pour permettre la production d'ARN à la place.
Avec leurs méthodes, les scientifiques ont noté à quel point la réponse du riboswitch était sensible aux changements de concentrations de guanidine, observant comment cela affectait l'efficacité de la Transcription.
Technique smFRET
Pour étudier le riboswitch guanidine-IV à un niveau de molécule unique, l'équipe de recherche a utilisé une technique appelée transfert d'énergie de résonance de fluorescence à molécule unique (smFRET). Cette méthode permet aux chercheurs de voir comment le riboswitch change de forme et se comporte sous différentes conditions.
Lorsque les parties du riboswitch étaient observées avec smFRET, des motifs distincts ont été notés. Au départ, sans magnésium et guanidine, le riboswitch était dans un état déplié. L'ajout de magnésium a changé cela, permettant la formation de structures plus compactes.
À des concentrations élevées de magnésium, presque tous les riboswitches sont passés à un état replié. Cependant, si la concentration de magnésium était trop élevée, cela pouvait rendre le riboswitch moins stable.
L'étude a également montré que la guanidine pouvait induire un état replié dans le riboswitch, bien que son efficacité soit inférieure à celle du magnésium.
Influence des Changements Conformationnels
La recherche a montré que le riboswitch guanidine-IV subit des changements dynamiques qui peuvent influencer comment il contrôle l'expression génique. Les changements de structure ont un impact considérable sur le fonctionnement du riboswitch pendant la transcription.
En examinant les temps de séjour de divers états que le riboswitch pouvait adopter, les chercheurs ont découvert que la présence de guanidine affectait la facilité avec laquelle le riboswitch changeait de conformation.
Dans certaines conditions, quand la guanidine était présente, le riboswitch offrait des conditions plus favorables à la production de protéines. En revanche, sans guanidine, le riboswitch agit surtout pour stopper la production.
Observation des Riboswitches Pendant la Transcription
Pour observer comment le riboswitch réagissait pendant la transcription, les scientifiques ont créé diverses séquences d'ARN de différentes longueurs qui imitaient les riboswitches. Ils ont constaté que le riboswitch guanidine-IV réagissait le mieux quand l'ARN faisait environ 88 nucléotides de long.
Cette longueur semblait critique, car la forme du riboswitch permettait une liaison efficace à la guanidine. Si le riboswitch dépassait ce point, sa capacité à se lier à la guanidine et à réagir efficacement diminuait. À des longueurs supérieures à 88 nucléotides, le riboswitch montrait des signes de devenir plus stable, renforçant l'arrêt de la production d'ARN.
Régulation du Riboswitch à Travers la Transcription
L'étude a également révélé comment la transcription affecte le comportement du riboswitch. Au fur et à mesure que le riboswitch est fabriqué, l'ajout de guanidine peut promouvoir des changements de structure qui mènent à des résultats différents pour l'expression génique.
Quand le riboswitch fait moins de 88 nucléotides, il reste sensible à la guanidine. Cependant, à mesure que la transcription progresse et que le riboswitch devient plus long, il devient moins réceptif à la guanidine. Cette observation met en lumière les interactions précises qui se déroulent entre le riboswitch et la guanidine pendant les premières étapes de la transcription.
Conclusion
Le riboswitch guanidine-IV représente un système complexe et dynamique qui repose à la fois sur des changements structurels et des molécules spécifiques pour contrôler l'expression génique. Comprendre comment les riboswitches comme celui-ci fonctionnent peut donner des idées sur de nouvelles façons de cibler les infections bactériennes en perturbant leur capacité à réguler des processus critiques.
Grâce à l'utilisation de techniques avancées comme smFRET, les chercheurs peuvent continuer à explorer les comportements complexes des riboswitches, menant à une compréhension plus approfondie de leurs rôles en biologie et de leur potentiel dans la découverte de médicaments.
Titre: Ligand Response of Guanidine-IV riboswitch at Single-molecule Level
Résumé: Riboswitches represent a class of non-coding RNA that possess the unique ability to specifically bind ligands and, in response, regulate gene expression. A recent report unveiled a type of riboswitch, known as the guanidine-IV riboswitch, which responds to guanidine levels to regulate downstream genetic transcription. However, the precise molecular mechanism through which the riboswitch senses its target ligand and undergoes conformational changes remain elusive. This gap in understanding has impeded the potential applications of this riboswitch. To bridge this knowledge gap, our study investigated the conformational dynamics of the guanidine-IV riboswitch RNA upon ligand binding. We employed single-molecule fluorescence resonance energy transfer (smFRET) to dissect the behaviors of the aptamer, terminator, and full-length riboswitch. Our findings indicated that the aptamer portion exhibited higher sensitivity to guanidine compared to the terminator and full-length constructs. Additionally, we utilized Position-specific Labelling of RNA (PLOR) combined with smFRET to observe, at the single-nucleotide and single-molecule level, the structural transitions experienced by the guanidine-IV riboswitch during transcription. Notably, we discovered that the influence of guanidine on the riboswitch RNAs conformations was significantly reduced after the transcription of 88 nucleotides. Furthermore, we proposed a folding model for the guanidine-IV riboswitch in the absence and presence of guanidine, thereby providing insights into its ligand-response mechanism. Impact statementThe aptamer domain of the guanidine-IV riboswitch exhibits a greater sensitivity to guanidine, surpassing that observed in both the terminator and full-length riboswitch. A finely-tuned transcriptional window of the guanidine-IV riboswitch was detected to be responsive to ligand binding. Furthermore, a folding-function model for the guanidine-IV riboswitch under both guanidine-free and guanidine-present conditions offers valuable insights into its regulatory mechanism.
Auteurs: Yu Liu, L. Gao, D. Chen
Dernière mise à jour: 2024-04-10 00:00:00
Langue: English
Source URL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2023.12.05.570130
Source PDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2023.12.05.570130.full.pdf
Licence: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
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