L'édition génétique améliore les muscles et la laine chez les moutons
La recherche combine les mutations MSTN et FGF5 pour améliorer les caractéristiques du bétail.
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Table des matières
- Le Rôle de la Myostatine chez Différentes Espèces
- Facteur de Croissance des Fibroblastes 5 (FGF5) et son Impact sur la Croissance des Cheveux
- Combinaison des Mutations MSTN et FGF5 chez les Moutons
- Méthodes pour Produire des Moutons Édités Génétiquement
- Production d'ARNm Cas9 et sgRNA
- Microinjection
- Collecte d'Échantillons de Tissu
- Techniques d'Analyse
- Les Effets des Mutations MSTN et FGF5 sur le Muscle et les Cheveux
- Changements des Fibres Musculaires
- Croissance de la Laine
- Mécanismes Cellulaires Derrière la Croissance et le Développement Musculaire
- Prolifération des Cellules Musculaires
- Processus de Différenciation
- Facteurs Clés Influençant le Comportement Cellulaire
- FOSL1 et Son Rôle
- La Voie MEK-ERK
- Implications pour les Recherches Futures
- Amélioration des Techniques d'Édition Génétique
- Une Meilleure Compréhension du Développement Musculaire
- Applications Possibles en Médecine et Agriculture
- Conclusion
- Source originale
- Liens de référence
La Myostatine (MSTN) est une protéine qui aide à contrôler la croissance musculaire chez les animaux. Quand MSTN est modifiée ou mutée, ça peut mener à une condition connue sous le nom de "double-muscle", où l'animal a plus de muscle que la normale. Cette caractéristique est super précieuse en farming parce que ça peut améliorer la production de viande. Les scientifiques s'y intéressent aussi parce que ça aide à fournir des protéines de qualité pour la consommation humaine.
En plus, MSTN joue un rôle important dans l'atrophie musculaire (perte de muscle), c'est pourquoi elle est étudiée comme cible potentielle pour des thérapies qui combattent la perte musculaire chez les patients souffrant de différentes conditions.
Le Rôle de la Myostatine chez Différentes Espèces
MSTN est présente chez de nombreux mammifères et est cruciale pour le développement musculaire. Les Mutations dans le gène MSTN, qu'elles soient naturelles ou introduites artificiellement, peuvent entraîner une augmentation de la masse musculaire chez diverses espèces. Ça a été observé chez des animaux comme les bovins, les moutons, les cochons, et même chez certains humains.
Cependant, les effets spécifiques des mutations MSTN peuvent varier en fonction de l'endroit où elles se produisent dans le gène. Comprendre comment ces mutations affectent la croissance musculaire est encore un domaine de recherche actif.
Facteur de Croissance des Fibroblastes 5 (FGF5) et son Impact sur la Croissance des Cheveux
Un autre protéine importante est le Facteur de Croissance des Fibroblastes 5 (FGF5), qui est impliqué dans la croissance des cheveux. Des recherches montrent que FGF5 peut ralentir la croissance des cheveux. Quand il est muté, des animaux comme les souris angora montrent une croissance accrue des cheveux. Cet effet a rendu FGF5 intéressant dans les études centrées sur le développement des cheveux.
Combinaison des Mutations MSTN et FGF5 chez les Moutons
Dans des études récentes, des chercheurs ont tenté de produire des moutons avec à la fois des mutations MSTN et FGF5. Ils ont utilisé une méthode appelée CRISPR pour modifier ces gènes, espérant améliorer à la fois la production de viande et de laine chez les animaux. En augmentant la quantité d'ARNm Cas9 (qui aide à faire la modification) avec l'ARN guide (qui dirige le processus de modification), ils ont réussi à créer des moutons avec des mutations spécifiques.
Une mutation clé sur laquelle ils se sont concentrés était MSTNDel273C. Cette mutation a réduit la taille des fibres musculaires et augmenté le nombre de fibres dans une zone donnée. Les chercheurs ont observé que les moutons avec ces mutations présentaient des traits associés au phénotype "double-muscle", ainsi que des changements dans la croissance des cheveux en raison de la mutation FGF5.
Méthodes pour Produire des Moutons Édités Génétiquement
Le processus de création de ces moutons édités implique plusieurs étapes :
Production d'ARNm Cas9 et sgRNA
Les scientifiques ont d'abord conçu des séquences d'ARN spécifiques qui cibleraient les gènes MSTN et FGF5 en utilisant un outil appelé CRISPR. Ces séquences ont ensuite été insérées dans un vecteur pour pouvoir être livrées dans les cellules des moutons.
Microinjection
La prochaine étape a consisté à injecter ces séquences d'ARN dans des embryons. Cela a été fait en utilisant un injecteur spécialisé. Les embryons ont ensuite été implantés dans des brebis pour leur permettre de se développer.
Collecte d'Échantillons de Tissu
Une fois que les moutons ont atteint un certain âge, les chercheurs ont collecté des échantillons de tissu pour analyser les caractéristiques musculaires et confirmer si les mutations avaient été réussies.
Techniques d'Analyse
Différentes techniques de laboratoire ont été utilisées pour analyser les fibres musculaires dans les échantillons collectés. Cela a impliqué de teindre les tissus pour visualiser les fibres musculaires sous un microscope, d'isoler les cellules musculaires, et de vérifier les changements dans l'expression des gènes.
Les Effets des Mutations MSTN et FGF5 sur le Muscle et les Cheveux
Les moutons créés avec la mutation MSTNDel273C et le knockout FGF5 ont montré plusieurs traits intéressants :
Changements des Fibres Musculaires
Ces moutons avaient plus de fibres musculaires par unité de surface, et les fibres individuelles étaient plus petites. Cette combinaison a entraîné une musculature plus dense, ce qui correspond aux attentes d'un phénotype "double-muscle". Les scientifiques ont noté que ce changement n'a pas eu un impact négatif sur la qualité de la viande, ce qui en fait un trait souhaitable pour le bétail.
Croissance de la Laine
La mutation FGF5 a aussi entraîné des changements dans les schémas de croissance des cheveux. Les chercheurs ont observé une densité et une longueur de cheveux accrues chez les moutons affectés. Ça pourrait avoir des implications pour la production de laine dans l'industrie agricole.
Mécanismes Cellulaires Derrière la Croissance et le Développement Musculaire
Pour comprendre comment ces mutations ont impacté la croissance musculaire à un niveau cellulaire, les chercheurs ont examiné les processus qui contrôlent la Prolifération et la différenciation des cellules musculaires.
Prolifération des Cellules Musculaires
Les cellules musculaires grandissent en se divisant et en ajoutant de nouvelles cellules. Les moutons édités ont montré une augmentation du taux de croissance des cellules musculaires, ce qui est essentiel pour construire du muscle.
Processus de Différenciation
Cependant, les mêmes mutations qui ont augmenté la prolifération cellulaire semblaient inhiber le processus de différenciation, où les cellules mûrissent en fibres musculaires fonctionnelles. Ça signifie que, même si le nombre de cellules musculaires a augmenté, leur capacité à former des structures musculaires correctes a été affectée.
Facteurs Clés Influençant le Comportement Cellulaire
Plusieurs protéines et voies clés ont été identifiées comme jouant des rôles cruciaux dans le comportement des cellules musculaires :
FOSL1 et Son Rôle
FOSL1 est une protéine qui influence comment les cellules musculaires croissent et se développent. L'étude a montré que les niveaux de FOSL1 étaient modifiés chez les moutons édités, ce qui le lie aux changements dans le développement des fibres musculaires observés chez les mutants.
La Voie MEK-ERK
Une autre voie de signalisation importante était la voie MEK-ERK. Cette voie est essentielle pour réguler comment les cellules réagissent aux signaux de croissance. Dans le contexte des mutations MSTN et FGF5, cette voie semblait favoriser la prolifération cellulaire tout en inhibant également le processus de différenciation.
Implications pour les Recherches Futures
Les résultats de ces études soulignent plusieurs points importants pour les recherches futures :
Amélioration des Techniques d'Édition Génétique
Les chercheurs ont réussi à augmenter l'efficacité de la création de mutations à double gène. Cela suggère qu'optimiser la livraison des matériaux d'édition génétique peut améliorer les résultats en ingénierie génétique.
Une Meilleure Compréhension du Développement Musculaire
En étudiant ces moutons édités, les scientifiques espèrent acquérir des connaissances plus approfondies sur les spécificités de la croissance et du développement musculaires. Comprendre comment diverses protéines et voies interagissent aidera à développer de futures thérapies et pratiques agricoles.
Applications Possibles en Médecine et Agriculture
Les connaissances tirées de ces mutations pourraient avoir des applications non seulement pour améliorer le bétail, mais aussi pour développer des traitements pour les problèmes de santé liés aux Muscles chez les humains. La recherche reflète une intersection entre innovation agricole et avancées médicales.
Conclusion
La recherche sur la myostatine et les facteurs de croissance des fibroblastes continue de promettre beaucoup. Grâce à une édition génétique soignée, les scientifiques découvrent la biologie complexe de la croissance et du développement musculaire. Les avancées réalisées dans cette étude ouvrent la voie à de futures recherches tant dans les domaines agricole que médical, offrant le potentiel d'améliorer la production de bétail et de développer des thérapies pour l'atrophie musculaire chez les humains. L'exploration de ces processus biologiques sera cruciale pour débloquer d'autres applications et bénéfices.
Titre: A MSTNDel273C mutation with FGF5 knockout sheep by CRISPR/Cas9 promotes skeletal muscle myofiber hyperplasia
Résumé: Mutations in the well-known Myostatin (MSTN) produce a "double-muscle" phenotype, which makes it commercially invaluable for improving livestock meat production and providing high-quality protein for humans. However, mutations at different loci of the MSTN often produce a variety of different phenotypes. In the current study, we increased the delivery ratio of Cas9 mRNA to sgRNA from the traditional 1:2 to 1:10, which improves the efficiency of the homozygous mutation of biallelic gene. Here, a MSTNDel273C mutation with FGF5 knockout sheep, in which the MSTN and FGF5 dual-gene biallelic homozygous mutations were produced via the deletion of 3-base pairs of AGC in the third exon of MSTN, resulting in cysteine-depleted at amino acid position 273, and the FGF5 double allele mutation led to inactivation of FGF5 gene. The MSTNDel273C mutation with FGF5 knockout sheep highlights a dominant "double-muscle" phenotype, which can be stably inherited. Both F0 and F1 generation mutants highlight the excellent trait of high-yield meat with a smaller cross-sectional area and higher number of muscle fibers per unit area. Mechanistically, the MSTNDel273C mutation with FGF5 knockout mediated the activation of FOSL1 via the MEK-ERK-FOSL1 axis. The activated FOSL1 promotes skeletal muscle satellite cell proliferation and inhibits myogenic differentiation by inhibiting the expression of MyoD1, and resulting in smaller myotubes. In addition, activated ERK1/2 may inhibit the secondary fusion of myotubes by Ca2+-dependent CaMKII activation pathway, leading to myoblasts fusion to form smaller myotubes.
Auteurs: Zhengxing Lian, M. Chen, Y. Zhao, X. Xu, X. Zhang, J. Zhang, S. Wu, Z. Liu, Y. Yuan, X. Guo, S. Qi, G. Yi, S. Wang, H. Li, A. Wu, G. Liu, K. Yu, S. Deng, H. Han, F. Lv, Y. Li
Dernière mise à jour: 2024-04-17 00:00:00
Langue: English
Source URL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2023.03.09.531872
Source PDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2023.03.09.531872.full.pdf
Licence: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
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