Entendiendo la resistencia a Sclerotinia sclerotiorum en Brassica juncea
La investigación se centra en mejorar la resistencia de las plantas contra el hongo dañino Sclerotinia sclerotiorum.
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Tabla de contenidos
- Cómo Sclerotinia sclerotiorum Ataca a las Plantas
- Defensas de las Plantas Contra Sclerotinia sclerotiorum
- La Necesidad de Mayor Resistencia en Brassica juncea
- Métodos para Estudiar la Resistencia de las Plantas
- Hallazgos Clave sobre los Mecanismos de Resistencia de las Plantas
- Conclusión
- Fuente original
- Enlaces de referencia
Sclerotinia Sclerotiorum es un hongo dañino que puede infectar muchos tipos de plantas, más de 600 especies en total. Este hongo causa una enfermedad conocida como pudrición del tallo por Sclerotinia o SSR, que puede provocar pérdidas significativas en los cultivos, especialmente en la agricultura de colza. Cuando la SSR se propaga, los rendimientos de colza pueden caer drásticamente, y la calidad del aceite y las semillas también se ve afectada. Debido a su capacidad para infectar una amplia variedad de plantas y vivir en el suelo durante períodos prolongados, controlar este hongo es un gran desafío.
Cómo Sclerotinia sclerotiorum Ataca a las Plantas
Las investigaciones han mostrado que S. sclerotiorum utiliza varias estrategias para atacar las plantas. Un método es cambiar el entorno circundante, haciéndolo más ácido. Este hongo reduce la actividad de enzimas protectoras importantes en las plantas y produce sustancias dañinas que destruyen las células vegetales. También crea enzimas que descomponen la capa exterior de la planta, lo que provoca la muerte celular y signos visibles de daño.
Además, S. sclerotiorum tiene muchas pequeñas proteínas que le ayudan a evadir las defensas de la planta. Estas proteínas pueden liberarse fuera de la planta o entrar en las células vegetales, interfiriendo con la capacidad de la planta para defenderse y permitiendo que el hongo infecte más fácilmente.
Defensas de las Plantas Contra Sclerotinia sclerotiorum
Cuando S. sclerotiorum ataca, las plantas tienen maneras de responder. En las plantas de colza, conocidas como Brassica napus, se activan ciertos genes para ayudar a defenderse del hongo. Herramientas modernas como la secuenciación de ARN han ayudado a los científicos a aprender sobre diversas señales de defensa. Estas señales incluyen las que son desencadenadas por hormonas vegetales como el ácido giberélico, etileno, jasmonato y ácido salicílico. Muchos de estos moléculas de señalización aumentan su actividad a medida que la planta reacciona al hongo.
Cuando una planta detecta un ataque, puede activar defensas para limitar el crecimiento del hongo. Esto incluye la producción de químicos que combaten a los invasores y la reparación de áreas dañadas. Algunas investigaciones han mostrado que alterar ciertos genes puede mejorar la resistencia de una planta a S. sclerotiorum. Por ejemplo, modificar genes específicos involucrados en la construcción de paredes celulares protectoras puede ayudar a fortalecer sus defensas.
Las plantas de la familia Brassica, que incluye la colza, también producen sustancias naturales llamadas Glucosinolatos que pueden ayudar a repeler a S. sclerotiorum. Se ha demostrado que estos compuestos juegan un papel en la protección de varias plantas Brassica.
La Necesidad de Mayor Resistencia en Brassica juncea
Actualmente, no hay variedades de plantas altamente resistentes que puedan defenderse completamente de S. sclerotiorum. Por lo tanto, es crucial encontrar nuevos recursos genéticos y métodos para crear plantas más resistentes. La mayoría de los estudios se han centrado en Brassica napus y otro pariente cercano, Brassica oleracea. Sin embargo, Brassica juncea es el cuarto cultivo oleaginoso más importante, y la investigación sobre su resistencia a este hongo es limitada.
Para identificar plantas resistentes, los investigadores han utilizado dos enfoques principales: probar las hojas y los tallos de las plantas Brassica. Probar las hojas puede ser más eficiente porque permite una identificación más temprana de la resistencia. Una vez que se encuentran líneas potencialmente resistentes, se pueden confirmar a través de pruebas en tallos.
En este estudio, una línea particular de Brassica juncea, llamada H83, mostró una fuerte resistencia a S. sclerotiorum. Los investigadores analizaron cómo esta línea respondió al hongo en diferentes momentos después de la infección en comparación con una línea menos resistente, L36. El objetivo era entender mejor cómo H83 resiste la enfermedad, lo que podría ayudar a mejorar los programas de mejoramiento destinados a desarrollar plantas más resistentes.
Métodos para Estudiar la Resistencia de las Plantas
Materiales de Plantas e Inoculación del Patógeno
Los investigadores recolectaron múltiples cepas de S. sclerotiorum de varios lugares. Confirmaron que las cepas eran las mismas usando marcadores específicos. Luego usaron una de estas cepas, llamada gz1, para infectar diferentes líneas de Brassica juncea con el fin de screening por resistencia. El hongo se cultivó en un laboratorio, y pequeños trozos se colocaron sobre las hojas de plantas jóvenes para la infección. Se tomaron muestras en diferentes momentos después de la infección para estudiar cómo respondieron las plantas.
Extracción y Secuenciación de ARN
Se extrajo ARN total de las muestras de plantas infectadas. Este ARN se revisó por calidad antes de enviarse para secuenciación. El objetivo era ver cómo cambiaron los niveles de expresión genética a medida que las plantas respondían a la infección con el tiempo.
Análisis de Datos
Los investigadores analizaron los datos de secuenciación de ARN para identificar qué genes se expresaron de manera diferente entre las líneas resistentes y susceptibles. Buscaron genes que mostraran cambios significativos después de la infección y los clasificaron como genes expresados diferencialmente (DEGs). Estos DEGs se estudiaron más para comprender sus roles en la respuesta de la planta al hongo.
Análisis de la Red de Co-Expresión Génica
Para entender las interacciones entre los genes, los investigadores utilizaron un método llamado análisis de red de correlación ponderada (WGCNA). Este enfoque les ayudó a identificar grupos de genes que trabajaban juntos en respuesta al hongo. Buscaron genes clave, que son importantes para regular las defensas de la planta.
Hallazgos Clave sobre los Mecanismos de Resistencia de las Plantas
Identificación de Genes Clave
A través de su análisis, los investigadores identificaron 12 genes clave que jugaron papeles importantes en la resistencia de Brassica juncea a S. sclerotiorum. Algunos de estos genes estaban involucrados en interacciones planta-patógeno, mientras que otros estaban asociados con la producción de glucosinolatos. Las relaciones entre estos genes clave sugieren que trabajan juntos para ayudar a la planta a repeler al hongo.
Validación de Genes Clave
Para asegurar la precisión de sus hallazgos, los investigadores utilizaron PCR en tiempo real cuantitativa para confirmar los niveles de expresión de los genes clave. Observaron que algunos genes eran más activos en la línea resistente (H83) en comparación con la línea susceptible (L36) en momentos específicos después de la infección. Esto demostró aún más el papel de estos genes en el fortalecimiento de las defensas de la planta.
Conclusión
Sclerotinia sclerotiorum es una amenaza significativa para muchos cultivos, especialmente en la familia Brassica. Aunque aún queda mucho trabajo por hacer, la identificación de líneas resistentes y la comprensión de su expresión génica pueden ayudar a dar forma a futuros programas de mejoramiento. El estudio destacó la importancia de Brassica juncea, que ha recibido menos atención, en el contexto del desarrollo de resistencia a S. sclerotiorum.
Al centrarse en recursos genéticos y las vías de señalización involucradas en la defensa de las plantas, los investigadores pueden trabajar hacia la creación de cultivos más resilientes que puedan soportar mejor los desafíos planteados por patógenos como S. sclerotiorum. Los hallazgos de este estudio pueden allanar el camino para nuevas estrategias orientadas a mejorar la resistencia a S. sclerotiorum en varios cultivos de Brassica, beneficiando en última instancia a la agricultura global y la producción de alimentos.
Título: Disease resistance of Brassica juncea to Sclerotinia sclerotiorum is established through the induction of indole glucosinolate biosynthesis
Resumen: Sclerotinia stem rot (SSR), caused by Sclerotinia sclerotiorum, is the main disease threat to oilseeds in Brassiceae, causing significant yield losses and reduction in oil content and quality. The studies on S. sclerotiorum require a great focus and extensive research on B. juncea compared to those on B. napus and B. oleracea. Transcriptome analysis revealed a large number of defense-related genes and response processes in B. napus and B. oleracea. However, similarities and differences in the defense responses to S. sclerotiorum on B. juncea are rarely reported. In the present study, we reported a B. juncea breeding line of H83 with high S. sclerotiorum resistance, which was used for transcriptome analysis compared to L36 with low resistance. A novel regulatory network was proposed to defend against S. sclerotiorum invasion in B. juncea. Upon infection of S. sclerotiorum, a series of auxin and MAPK signaling pathways were initiated within 12 h, and then defenses were activated to restrict the development and spread of S. sclerotiorum by inducing the massive synthesis of indole glucosinolates after 24 h. Twelve hub genes involved in the network were identified by the weighted gene co-expression network (WGCNA), which are involved in plant-pathogen interaction, signaling pathway genes, indole glucosinolate biosynthesis and cell wall formation. The hub genes were further validated by qRT-PCR. The research revealed a new resistant line of H83 against S. sclerotiorum and a different regulatory network in B. juncea, which would be beneficial for the future effective breeding of Sclerotinia-resistant varieties.
Autores: Entang Tian, J. Zhang, X. Yang, Y. Jiang, H. Jin, K. Yu, L. Xiao, Q. Ouyang
Última actualización: 2024-01-31 00:00:00
Idioma: English
Fuente URL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.01.29.577696
Fuente PDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.01.29.577696.full.pdf
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