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# Biologie# Genomik

Genomische Einblicke in Rhodamnia argentea und Myrtenrost

Studie zeigt, dass genomische Daten entscheidend für den Pflanzenschutz gegen Myrtenrost sind.

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In den letzten Jahren haben Fortschritte in der Technologie zur DNA-Sequenzierung es einfacher und günstiger gemacht, die Genome verschiedener Organismen zu studieren. Das hat zu einem Anstieg bei der Erstellung genetischer Informationen von Pflanzen und Tieren geführt, die nicht so bekannt sind. Ein grosses Problem, mit dem Wissenschaftler konfrontiert sind, ist jedoch die Kontamination in den Sequenzdaten. Kontamination kann auftreten, wenn DNA von anderen Organismen sich mit der Zielprobe vermischt, was die Ergebnisse verfälschen und zu Missverständnissen über den untersuchten Organismus führen kann.

Die Bedeutung von präziser Genom-Sequenzierung

Eine genaue Genom-Sequenzierung ist entscheidend für das Studium der genetischen Zusammensetzung von Arten, insbesondere bei gefährdeten oder von Krankheiten betroffenen Arten. Saubere und zuverlässige Daten helfen Wissenschaftlern und Naturschützern, informierte Entscheidungen zu treffen, wie man mit diesen Arten umgehen und sie schützen kann. Wenn Sequenzdaten Kontamination enthalten, kann das die Bemühungen behindern, genetische Vielfalt und die Beziehungen zwischen verschiedenen Arten zu verstehen.

Es gibt verschiedene Werkzeuge, um die Qualität von Sequenzdaten zu überprüfen und Kontaminanten zu identifizieren und zu entfernen. Ein solches Werkzeug ist der NCBI Foreign Contamination Screen, der hilft, fremde DNA in Genomsequenzen zu identifizieren. In einer Untersuchung einer riesigen Anzahl von Genomproben wurden in einem bemerkenswerten Prozentsatz Kontaminanten gefunden. Das zeigt, dass Kontamination ein weit verbreitetes Problem in der Sequenzierung ist.

Genomik im Pflanzenschutz

Der Einsatz von genomischen Daten hat zugenommen, um gefährdete Pflanzenarten, einschliesslich solcher, die von invasiven Arten und Krankheiten bedroht sind, zu schützen. Das Wissen über das Genom einer Pflanze kann wertvolle Einblicke in ihre genetische Vielfalt und Geschichte bieten, die für Naturschutzstrategien wichtig sein können. Zum Beispiel kann das Verständnis darüber, wie Pflanzen sich an ihre Umgebung anpassen, den Verantwortlichen im Naturschutz helfen, bessere Entscheidungen zur Erhaltung der genetischen Vielfalt zu treffen.

Ein wichtiges Anliegen ist Myrtenrost, eine Pilzerkrankung, die viele Pflanzen der Familie Myrtaceae betrifft. Die Krankheit hat sich in Australien rasch ausgebreitet und stellt eine grosse Bedrohung für einheimische Arten dar. Daher konzentrieren sich Forscher darauf, genomische Ressourcen für diese Pflanzen zu entwickeln, um die Naturschutzbemühungen zu unterstützen.

Der Fall Myrtenrost

Myrtenrost, verursacht durch einen Pilz namens Austropuccinia psidii, hat eine Vielzahl von Wirtsarten innerhalb der Familie Myrtaceae, zu der viele wichtige Pflanzen gehören. Die Krankheit wurde 2010 erstmals in Australien eingeführt und hat zu erheblichen Rückgängen bei einheimischen Arten geführt. Forscher sind daran interessiert, die Genetik der von Myrtenrost betroffenen Pflanzen besser zu verstehen, um die Naturschutzbemühungen zu unterstützen.

Mehrere Genome kommerziell bedeutender Myrtaceae-Arten wurden bereits sequenziert. Es ist jedoch noch mehr Arbeit nötig, insbesondere für australische einheimische Arten, die anfällig für Myrtenrost sind. Es gibt Lücken in den genomischen Daten, insbesondere für Arten wie Rhodamnia, die unter der Krankheit leiden.

Herausforderungen mit Kontaminanten in der Sequenzierung

Ein grosses Problem während des Sequenzierungsprozesses ist die Kontamination durch verschiedene Schädlinge und Erreger. Organismen wie Milben sind so klein, dass sie bei der Sammlung möglicherweise nicht gesehen werden, was es einfach macht, sie in die DNA-Probe zu bekommen. Das kann zu irreführenden Ergebnissen führen, wenn Wissenschaftler die sequenzierten Daten analysieren.

Zum Beispiel wurde Kontamination entdeckt, selbst als Forscher eine räuberische Milbe sequenzierten, die DNA von ihrer Beute aufgenommen hatte. Genauso können Kontaminanten sich mit Pflanzen-DNA vermischen und die Analyse komplizieren.

Fortschritte in der Milben-Genomik

Eriophyoid-Milben, die winzige Kreaturen sind, die sich von Pflanzen ernähren, standen kürzlich im Fokus genomischer Studien. Trotz ihrer Grösse können sie als landwirtschaftliche Schädlinge erhebliche Auswirkungen haben. Die Bemühungen, ihr genetisches Makeup zu verstehen, haben zugenommen, was zu einem besseren Wissen über ihr Verhalten und ihre Interaktionen mit Pflanzen geführt hat.

Das erste vollständige Genom einer eriophyoid-Milbe wurde kürzlich sequenziert, was Einblicke in ihre Biologie bietet. Weitere Forschungen zu den genomischen Daten dieser Milben können bei Strategien zur Schädlingsbekämpfung helfen, um ihre schädlichen Auswirkungen zu verringern.

Die Ziele der Studie

Ziel dieser Studie war es, ein hochwertiges Genom für den Rhodamnia argentea-Baum zu erstellen, der teilweise resistent gegen Myrtenrost ist. Die Forscher verwendeten fortschrittliche Sequenzierungstechniken, um das Genom zusammenzustellen. Sie betonten auch die Bedeutung der Kontaminationsprüfung während der Genom-Sequenzierung und zeigten, wie Kontaminanten in einem separaten Milben-Genom identifiziert und behandelt wurden.

Probenahme und Sequenzierungsprozess

Junge Blätter von Rhodamnia argentea wurden zur Analyse gesammelt. Die Blätter wurden sorgfältig aufbewahrt, um ihre Qualität zu erhalten, bis sie verarbeitet werden konnten. Es wurden mehrere Methoden angewendet, um DNA zu extrahieren und gleichzeitig sicherzustellen, dass die Proben unbeeinträchtigt blieben.

Der Sequenzierungsprozess umfasste mehrere Schritte, beginnend mit der Extraktion von hochwertiger DNA. Verschiedene Technologien, einschliesslich Long-Read-Sequenzierung und Linked-Read-Sequenzierung, wurden eingesetzt, um so viele Daten wie möglich zu sammeln. Die Rohdaten wurden dann bereinigt und gefiltert, um sicherzustellen, dass nur hochwertige Sequenzen erhalten blieben.

Genomzusammenstellung und Kontaminationsentfernung

Der Prozess der Genomzusammenstellung umfasste das Zusammenstellen von Daten aus verschiedenen Sequenzierungsmethoden. Zuerst erstellten die Forscher eine Entwurfsgenomzusammenstellung und identifizierten Bereiche, die Anzeichen von Kontamination zeigten. Mit Hilfe zusätzlicher Sequenzierungsdaten verfeinerten sie die Zusammenstellung, um Kontaminanten zu beseitigen.

Es wurde erheblicher Aufwand betrieben, um sicherzustellen, dass das endgültige Genom genau war. Es gab mehrere Runden der Verfeinerung und Qualitätskontrollen, um Kontaminanten auszuschliessen. Dieser gründliche Ansatz ermöglichte eine vertrauenswürdigere Darstellung des Rhodamnia argentea-Genoms.

Qualitätsprüfung und Genomgrösse

Um die Qualität des zusammengebauten Genoms zu messen, verwendeten die Forscher spezialisierte Software, die überprüft, wie vollständig das Genom ist. Das Entwurfsgenom zeigte einen hohen Grad an Vollständigkeit, was bestätigt, dass die Zusammenstellung zuverlässig war.

Das zusammengebaute Genom von Rhodamnia argentea bestand aus mehreren Scaffolds, und die Gesamtgrösse stimmte mit den Erwartungen überein. Das ermöglichte es den Forschern zu folgern, dass das Genom gut charakterisiert und geeignet für weitere Forschungen war.

Genomannotation

Nachdem das Genom zusammengestellt war, war der nächste Schritt die Annotation, bei der Gene und deren Funktionen im Genom identifiziert werden. Eine Vielzahl von Software-Tools wurde verwendet, um die Anzahl der Protein-kodierenden Gene vorherzusagen sowie ribosomale RNA- und Transfer-RNA-Gene zu identifizieren.

Der Annotierungsprozess lieferte eine Fülle von Informationen über die genetischen Fähigkeiten von Rhodamnia argentea. Die Forscher konnten Daten über Genanzahlen und deren potenzielle Rollen sammeln, die entscheidend für das Verständnis der Biologie der Art und ihrer Reaktion auf Myrtenrost sind.

Milben-Phylogenetik und vergleichende Genomik

Um das Milben-Genom in den Kontext zu setzen, verglichen die Forscher es mit verfügbaren Milben-Genomen. Durch vergleichende Analysen lernten sie mehr über die evolutionären Beziehungen zwischen verschiedenen Milbenarten.

Die phylogenetische Analyse half, die Position der neu sequenzierten Milbe innerhalb ihrer Überfamilie zu klären, und zeigte, wie sie sich mit anderen Milben vergleicht und wie vielfältig ihre Gene sind. Diese Informationen können für zukünftige Studien zur Populationsverwaltung und Schädlingsbekämpfung entscheidend sein.

Identifizierung von Kontamination in der Zusammenstellung

Die Studie hob die Herausforderung der Kontamination während der Sequenzierungs- und Zusammenstellungsprozesse hervor. Kontaminanten komplizieren die Daten und erschweren es, klare Ergebnisse zu erhalten. Die Forscher betonten die Notwendigkeit einer sorgfältigen Überprüfung, um kontaminierende Sequenzen zu identifizieren und zu entfernen.

Die Verbesserung von Erkennungs- und Screening-Techniken spielt eine entscheidende Rolle bei der Genomzusammenstellung. Neue Werkzeuge sind aufgetaucht, um den Erkennungsprozess zu optimieren und den Forschern zu helfen, Kontaminanten effektiver zu identifizieren.

Extraktions- und Sequenzierungsstrategien

Die Methoden, die zur DNA-Extraktion und Sequenzierung verwendet werden, können das Vorhandensein von Kontamination stark beeinflussen. Long-Read-Sequenzierungstechnologien führen im Allgemeinen zu weniger Fehlern bei der Zusammenstellung im Vergleich zu Short-Read-Methoden. Ein hochwertiges Sample sicherzustellen, ist ein wichtiger Schritt zur Reduzierung von Kontamination.

Bei Nicht-Modellorganismen wie Rhodamnia kann das Finden effektiver Extraktionsprotokolle entscheidend sein, um reine Proben zu erhalten. Die Forscher haben festgestellt, dass der Austausch erfolgreicher Techniken unter Wissenschaftlern das Feld voranbringen und die Ergebnisse zukünftiger Studien verbessern kann.

Telomere-zu-Telomere-Milben-Genom

Die Studie erreichte auch einen bedeutenden Meilenstein, indem sie eine vollständige Zusammenstellung eines Milben-Genoms von Ende zu Ende produzierte. Die Chromosomen wurden mit identifizierbaren Telomer-Sequenzen abgeschlossen, was zu einer genaueren Darstellung des Genoms des Organismus führte.

Diese Erkenntnisse könnten breitere Anwendungen im Verständnis genetischer Merkmale bei anderen Milbenarten haben. Durch das Studium der Telomere von eriophyoiden Milben könnten Forscher Einblicke in ihre Biologie und Verhalten gewinnen, um bessere Strategien zur Schädlingsbekämpfung zu entwickeln.

Zukünftige Richtungen und Integrationsmöglichkeiten

Die Forschung deutet auf eine vielversprechende Zukunft für genomische Studien in den Interaktionen zwischen Pflanzen und Schädlingen hin. Ein integrativer Ansatz könnte es ermöglichen, sowohl Pflanzenwirte als auch ihre Schädlinge gleichzeitig zu sequenzieren und Einblicke in deren Beziehungen zu gewinnen. Dies könnte zu besseren Strategien zur Bekämpfung von Krankheiten und Schädlingen führen, die die Gesundheit von Pflanzen bedrohen.

Indem Forscher die Genome sowohl der Pflanzen als auch der Schädlinge untersuchen, die sie betreffen, können sie ihr Verständnis der zugrunde liegenden Biologie, die diese Interaktionen antreibt, vertiefen. Dieses Wissen ist entscheidend für die Entwicklung wirksamer Naturschutz- und Managementtechniken in der Landwirtschaft und Ökologie.

Fazit

Die Bemühungen, das Genom von Rhodamnia argentea zu sequenzieren und zu verstehen, bieten wertvolle Ressourcen für Naturschützer und Wissenschaftler. Wenn sich die Technologie weiter verbessert, werden die Wissenschaftler besser gerüstet sein, um die Herausforderungen der Kontamination zu bewältigen und kritische genetische Informationen für Pflanzen und ihre verbundenen Schädlinge zu entschlüsseln. Das aus dieser Studie gewonnene Wissen wird dazu beitragen, zukünftige Forschungs- und Naturschutzstrategien für die Myrtaceae-Familie zu informieren, insbesondere angesichts von Bedrohungen wie Myrtenrost. Die Bedeutung fortlaufender Untersuchungen zur genetischen Zusammensetzung sowohl von Pflanzen als auch von Schädlingen wird eine Schlüsselrolle bei den Bemühungen um den Erhalt der biologischen Vielfalt in Zukunft spielen.

Originalquelle

Titel: Small but mitey: long-read assembly of a streamlined mite genome from contaminated host plant sequencing data

Zusammenfassung: Technological advances have propelled DNA sequencing of non-model organisms, making sequencing more accessible and cost effective, which has also increased the availability of raw data in public repositories. However, contamination is a significant concern, and the use and reuse of sequencing data requires quality control and curation. A reference genome for the Australian native rainforest tree Rhodamnia argentea Benth. (malletwood) was assembled from Oxford Nanopore Technologies (ONT) long-reads, 10x Genomics Chromium linked-reads, and Hi-C data (N50 = 32.3 Mbp and BUSCO completeness 98.0%) with 99.0% of the 347 Mbp assembly anchored to 11 chromosomes (2n = 22). The R. argentea genome will inform conservation efforts for Myrtaceae species threatened by the global spread of the fungal disease myrtle rust. We observed contamination in the sequencing data and further investigation revealed an arthropod source. Here, we demonstrate the feasibility of assembling a high-quality gapless telomere-to-telomere mite genome using contaminated host plant sequencing data. The mite exhibits genome streamlining and has a 35 Mbp genome (68.6% BUSCO completeness) on two chromosomes, capped with a novel TTTGG telomere sequence. Phylogenomic analysis suggests that it is a previously unsequenced eriophyoid mite. Despite its unknown identity, this complete nuclear genome provides a valuable resource to investigate invertebrate genome reduction. This study emphasises the importance of checking sequencing data for contamination, especially when working with non-model organisms. It also enhances our understanding of two species, including a tree that faces substantial conservation challenges, contributing to broader biodiversity initiatives. SignificanceThe genomes of Rhodamnia argentea and an associated eriophyoid mite, which contaminated the tree raw sequencing data, were assembled for the first time. We generated valuable chromosome-level genomic resources for the conservation of myrtle rust impacted tree species, pest genomics, and understanding genome streamlining. The research underscores the growing prevalence of sequencing experiments in non-model organisms while emphasising the importance of quality control and curation of sequencing data.

Autoren: Richard J Edwards, S. H. Chen, A. Jones, P. Lu-Irving, J.-Y. S. Yap, M. van der Merwe, J. G. Bragg

Letzte Aktualisierung: 2024-05-20 00:00:00

Sprache: English

Quell-URL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.05.17.594625

Quell-PDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.05.17.594625.full.pdf

Lizenz: https://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0/

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