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Relógios Circadianos: O Tempo Escondido das Interações Planta-Praga

Pesquisas mostram como os relógios circadianos afetam as defesas das plantas contra patógenos.

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Os relógios circadianos são sistemas biológicos dentro dos organismos que ajudam eles a acompanhar o tempo. Esses relógios permitem que plantas e fungos se ajustem a mudanças no ambiente que seguem um ciclo diário, como luz e escuridão. Por exemplo, certos genes que controlam esses relógios circadianos ajudam as plantas a crescer, florescer na hora certa e responder ao estresse de pragas ou mudanças climáticas.

Diferentes organismos, incluindo plantas como Arabidopsis e fungos como Neurospora crassa, usam esses relógios para gerenciar várias funções. Nos vegetais, os ritmos circadianos influenciam o crescimento e o momento da floração. Nos fungos, esses ritmos afetam como eles absorvem nutrientes, crescem e produzem esporos.

Sinais Importantes para os Relógios Circadianos

Os principais sinais externos para regular os relógios circadianos são luz e temperatura. Dentro desses relógios, existem sistemas que criam ciclos de feedback, que se ajustam automaticamente com base no ambiente interno do organismo e nos sinais externos. Esses ciclos ajudam a manter um ciclo de 24 horas, permitindo que o organismo se adapte às condições em mudança ao longo do dia.

Em plantas e fungos, esses relógios podem impactar como eles interagem entre si. Por exemplo, podem influenciar se as relações são benéficas (como ajudar um ao outro a crescer) ou prejudiciais (como a planta sendo infectada por um patógeno). Isso pode levar a várias respostas, dependendo da hora do dia.

Arabidopsis e Seu Patógeno

Arabidopsis é uma planta bem estudada que ajuda a entender melhor esses processos. Suas interações com o patógeno Hyaloperonospora arabidopsidis (Hpa) deram aos pesquisadores insights sobre as defesas das plantas. Pesquisadores isolaram genes específicos em Arabidopsis que ajudam a resistir a infecções por Hpa. Um desses genes, conhecido como RPP4, ajuda a planta a resistir a certas cepas de Hpa.

Estudos recentes indicaram que as defesas fornecidas por esse gene podem estar ligadas ao Relógio Circadiano da planta. Isso levanta questões sobre como o timing das atividades do patógeno é influenciado pelo relógio da planta e se os relógios dos dois organismos podem afetar um ao outro durante a infecção.

Experimentos mostraram que Hpa passa por várias etapas durante a infecção, e essas etapas são sensíveis à luz. Isso indica que Hpa pode também ter seu próprio relógio circadiano, levando os pesquisadores a investigar genes em Hpa que poderiam estar relacionados a essas funções de marcação do tempo.

Genes Chave no Relógio Circadiano

Um dos genes essenciais envolvidos na regulação dos relógios circadianos em diferentes espécies é o gene TIMELESS (TIM). Na mosca da fruta Drosophila, esse gene ajuda o organismo a se adaptar aos ciclos dia-noite, quebrando-se na presença de luz. Essa quebra é fundamental para manter um ritmo saudável alinhado ao ambiente. No entanto, TIM tem funções diferentes em vários organismos, incluindo papéis no crescimento e desenvolvimento celular.

Outro gene importante é o SRR1 (SENSITIVITY TO RED LIGHT REDUCED), que ajuda a regular a expressão gênica durante o ciclo dia-noite em plantas como Arabidopsis. Mutações nesse gene podem causar problemas no crescimento e floração da planta. Em outros organismos, como camundongos e leveduras, genes semelhantes ajudam a controlar a estabilidade e o crescimento celular.

Dado os efeitos conhecidos da luz na capacidade de Hpa de infectar plantas, os pesquisadores acharam útil estudar o papel dos genes do relógio circadiano em Hpa, levando à identificação de HpaTIM e HpaSRR1.

Resultados Experimentais

Usando várias condições de luz durante os experimentos, os pesquisadores descobriram que tanto HpaTIM quanto HpaSRR1 mostraram padrões rítmicos de expressão, o que significa que eles ligavam e desligavam em um ciclo que combinava com os ritmos circadianos da planta. Essa sincronização foi observada junto com os padrões de expressão dos genes de Arabidopsis CCA1 e LHY, que são conhecidos por serem importantes para seu relógio circadiano.

Os pesquisadores também testaram se direcionar os genes HpaTIM e HpaSRR1 com pequenas partes de RNA poderia limitar a capacidade de Hpa de produzir esporos, o que é essencial para seu ciclo de infecção. Os resultados mostraram que direcionar esses genes reduziu significativamente a esporulação, indicando sua importância para a virulência de Hpa.

A Influência da Luz na Expressão

HpaTIM mostrou um padrão rítmico consistente sob condições normais de luz. Quando exposto a luz constante, sua expressão continuou, mas alterou um pouco, mudando para um ciclo de 18 horas em vez das habituais 24 horas. Depois de um tempo, esse ritmo voltou ao normal.

De forma semelhante, experimentos com HpaSRR1 mostraram que também tinha um padrão rítmico, com picos de expressão ocorrendo ao amanhecer. Quando colocado em luz ou escuridão constantes, HpaSRR1 manteve uma expressão rítmica, embora algumas variações nos padrões tenham sido notadas.

Isso sugere que tanto HpaTIM quanto HpaSRR1 estão funcionando com seus próprios relógios internos e que sua atividade pode ser influenciada pelas condições externas de luz.

Sincronização Entre Hospedeiro e Patógeno

A relação próxima entre Arabidopsis e Hpa levanta a questão de se seus relógios circadianos estão sincronizados durante a infecção. Estudos mostraram que a expressão de CCA1 e LHY em Arabidopsis atinge o pico ao amanhecer, enquanto a expressão de TOC1 ocorre ao anoitecer.

Comparando os padrões de expressão desses genes circadianos de Arabidopsis com os de HpaTIM e HpaSRR1, os pesquisadores observaram semelhanças marcantes. Ambos os genes de Hpa atingiram o pico ao amanhecer, espelhando o tempo do relógio da planta. Isso leva à conclusão de que os relógios de ambos os organismos podem influenciar um ao outro durante o processo de infecção.

Impacto das Mutações em Arabidopsis sobre Hpa

Para explorar ainda mais essa sincronização, os pesquisadores examinaram como mutações nos genes circadianos de Arabidopsis afetaram a expressão de HpaTIM e HpaSRR1. Em plantas mutantes com relógios circadianos alterados, os padrões de expressão desses genes de Hpa foram desajustados, indicando que o relógio de Arabidopsis desempenha um papel na regulação dos relógios do patógeno.

Além disso, os pesquisadores realizaram testes com várias linhagens mutantes de Arabidopsis para ver como essas alterações afetariam a capacidade de Hpa de crescer e se reproduzir. Muitos desses mutantes mostraram suscetibilidade alterada a Hpa. Por exemplo, alguns mutantes suportaram menos produção de esporos, enquanto outros resultaram em aumento da esporulação.

Conclusão

Em conclusão, essa pesquisa destaca a relação intrincada entre os relógios circadianos das plantas e os patógenos que interagem com elas. Hpa possui seus próprios genes de relógio circadiano, que são vitais para sua sobrevivência e virulência. Enquanto isso, os ritmos circadianos da planta também desempenham um papel crucial na formação dessas interações.

Os achados sugerem que existe uma conexão entre o timing das defesas da planta e as estratégias de ataque do patógeno, enfatizando a importância de entender esses relógios biológicos no contexto da resistência a doenças das plantas. Estudos futuros explorando essas conexões podem levar a melhores estratégias para gerenciar doenças das plantas e aumentar a resiliência das colheitas.

Fonte original

Título: Synchronization of Circadian Clock Gene Expression in Arabidopsis and Hyaloperonospora arabidopsidis and its Impact on Host-Pathogen Interactions

Resumo: Organisms across all kingdoms have an internal circadian clock running in 24h cycles. This clock affects a variety of processes, including innate immunity in plants. However, the role of pathogen circadian clocks had not been extensively explored. We previously showed that light can influence infection of the oomycete Hyaloperonospora arabidopsidis (Hpa, downy mildew disease) on its natural host Arabidopsis thaliana. Here, we identified Hpa orthologs of known circadian clock genes (CCGs) Drosophila TIMELESS (TIM) and Arabidopsis Sensitive to Red Light Reduced 1 (AtSRR1) genes. Expression of both HpaTIM and HpaSRR1 showed a circadian rhythm when Hpa was exposed to constant light. Contrastingly, these two genes were negatively regulated by constant dark exposure. Furthermore, the expression patterns of HpaTIM and HpaSRR1 correlate with those of AtCCA1 and AtLHY, indicating a synchronisation of biological clock genes between the host and the pathogen. In addition, screening mutants of Arabidopsis Clock Regulated Genes (AtCRGs) with three virulent Hpa isolates revealed that mutations in AtCRGs influenced HpaTIM and HpaSRR1 expression and Hpa development, indicating a functional link between the plant biological clock and virulence. Moreover, sporulation of Hpa was reduced by targeting HpaTIM and HpaSRR1 with short synthesized small interfering RNAs, indicating that the pathogen clock is also relevant to virulence. We propose that plant and pathogen clocks are synchronized during infection and that proper regulation of both clocks are genetically necessary for pathogen virulence.

Autores: Mahmut Tor, O. Telli, D. Gol, W. Jin, B. Cevher-Keskin, Y. Hong, J. McDowell, D. J. Studholme

Última atualização: 2024-03-30 00:00:00

Idioma: English

Fonte URL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.03.27.586998

Fonte PDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.03.27.586998.full.pdf

Licença: https://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0/

Alterações: Este resumo foi elaborado com a assistência da AI e pode conter imprecisões. Para obter informações exactas, consulte os documentos originais ligados aqui.

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