Alternativas Ecológicas aos Corantes Sintéticos
Pesquisas destacam pigmentos microbianos de resíduos agrícolas como soluções de corantes ecológicos.
Diriba Muleta, B. Zeleke, H. A. Dinka, D. A. Tsegaye, J. Hassen
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Índice
- Materiais e Métodos
- Produtos Químicos, Equipamentos e Reagentes
- Coleta de Amostras e Isolamento de Bactérias
- Cultivo Cultural
- Triagem de Variáveis do Processo Usando PBD
- Otimização de Fatores Significativos Usando RSM
- Teste de Verificação
- Extração de Pigmento
- Caracterização de Pigmento
- Resultados e Discussão
- Isolamento e Identificação de Bactérias Produtoras de Pigmento
- Cultivo Cultural com Extratos de Resíduos Agrícolas
- Triagem de Variáveis do Processo
- Otimização de Fatores Significativos
- Verificação dos Resultados
- Caracterização de Pigmento
- Conclusão
- Fonte original
Tá rolando um interesse crescente por produtos coloridos, o que fez aumentar o uso de corantes sintéticos. Infelizmente, muitos desses corantes são prejudiciais pro meio ambiente. Desde meados do século 19, os corantes sintéticos substituíram os pigmentos naturais porque são mais baratos de produzir. A estimativa é que a cada ano sejam produzidas cerca de 800 mil toneladas de corantes sintéticos no mundo, com mais de 10 mil tipos diferentes sendo usados.
Independentemente das propriedades do corante, as etapas finais da coloração envolvem lavar pra remover qualquer corante excessivo que não fixou no tecido. O uso contínuo de corantes sintéticos e a liberação constante de águas residuais tingidas no meio ambiente não é um problema pequeno. Na verdade, isso representa um grande desafio que afeta ecossistemas e biodiversidade. Isso se deve principalmente à sua resistência à luz, calor, água, detergente e outros produtos químicos, fazendo com que esses poluentes permaneçam no meio ambiente por longos períodos. O crescimento das indústrias que dependem de corantes sintéticos, aliado ao alto consumo de água, impacta negativamente os ecossistemas, podendo reduzir a produtividade e ameaçar a biodiversidade.
Pra lidar com essas preocupações ambientais, rola uma necessidade de encontrar alternativas ecológicas pros corantes sintéticos. Uma solução potencial é usar produtos naturais de micróbios, já que eles podem produzir vários pigmentos através de seus processos biológicos. Esses pigmentos microbianos oferecem muitas aplicações potenciais. Pra viabilizar a produção desses pigmentos economicamente, é importante maximizar o rendimento enquanto minimiza os custos de produção. Uma forma de alcançar isso é por meio da otimização de processos, que pode usar resíduos agrícolas baratos como meio de crescimento pros micróbios.
Os resíduos agrícolas consistem em vários materiais orgânicos, que são uma fonte renovável de nutrientes para o crescimento microbiano. Em experimentos focados na otimização, os pesquisadores visam identificar os fatores que influenciam o rendimento de pigmentos e determinar os melhores valores pra essas variáveis influentes. Um método que pode ajudar nesse processo é conhecido como Plackett-Burman Design (PBD). Essa abordagem permite a triagem eficiente de diferentes variáveis do processo pra identificar as mais significativas que podem afetar a produção de pigmentos.
Outro método útil é a Metodologia de Superfície de Resposta (RSM). Essa técnica ajuda a melhorar a produção de pigmentos reduzindo o número de variáveis envolvidas, além do tempo e dos custos associados ao processo. A RSM pode oferecer insights valiosos sobre como diferentes fatores interagem entre si pra afetar a produção de pigmentos.
Dadas essas abordagens, essa pesquisa tem como objetivo otimizar as condições de cultivo e os componentes do meio pra uma melhor produção de pigmentos a partir de um micróbio específico, Exiguobacterium aurantiacum, enquanto usa extratos de resíduos agrícolas como meio de crescimento.
Materiais e Métodos
Produtos Químicos, Equipamentos e Reagentes
Pra o crescimento das bactérias, foi usado Nutrient Agar (NA). As bactérias foram cultivadas em extratos líquidos criados a partir de resíduos agrícolas. Solventes orgânicos foram utilizados pra extração de pigmentos, obtidos de um laboratório local de pesquisa em saúde. As concentrações dos pigmentos resultantes foram medidas usando fotômetros e espectrofotômetros UV-Vis.
Coleta de Amostras e Isolamento de Bactérias
Amostras de ar foram coletadas usando um método específico que envolveu expor placas de ágar nutriente ao ar por um período determinado. As placas foram então incubadas pra permitir o crescimento bacteriano. Uma vez que as colônias apareceram, culturas puras de bactérias que produziam pigmentos foram isoladas pra estudos posteriores. A identificação dessas bactérias foi feita usando uma técnica de espectrometria de massa que permite identificar com precisão a nível de espécie.
Cultivo Cultural
O crescimento de bactérias potencialmente produtoras de pigmento foi testado usando doze extratos diferentes de resíduos agrícolas, como batata, repolho, tomate e outros. Esses extratos foram escolhidos por seu rico conteúdo nutricional. Os resíduos agrícolas foram limpos, secos, moídos e fervidos pra extrair os nutrientes. A eficácia de cada extrato de resíduos em promover o crescimento bacteriano foi medida ao longo de um período de incubação determinado.
Triagem de Variáveis do Processo Usando PBD
Pra identificar as variáveis mais impactantes no crescimento bacteriano e na produção de pigmentos, nove fatores diferentes foram analisados. Isso incluiu aspectos como temperatura, nível de pH, taxa de agitação e concentrações de nutrientes. O método PBD foi usado pra analisar os efeitos dessas variáveis sobre o crescimento de Exiguobacterium aurantiacum. Os experimentos foram conduzidos em ordem aleatória pra garantir confiabilidade.
Otimização de Fatores Significativos Usando RSM
Após identificar as variáveis mais significativas, a RSM foi aplicada pra otimizar ainda mais seus níveis. Esse método ajudou a criar um modelo matemático que descrevia como os diferentes fatores interagiam entre si. Todas as variáveis que não eram significativas foram mantidas constantes pra focar nos fatores principais de interesse.
Teste de Verificação
Antes da otimização final, o cultivo usando extrato de resíduos de tomate foi realizado pra entender como variáveis significativas afetavam o crescimento bacteriano e a produção de pigmentos. Um experimento de verificação foi então realizado sob condições otimizadas pra avaliar os resultados.
Extração de Pigmento
Os pigmentos extraídos foram obtidos usando um método de extração com solvente. A biomassa colhida foi ressuspendida em vários solventes, e o solvente que melhor dissolveu os pigmentos foi selecionado. Após o tratamento, o pigmento foi filtrado e seco pra análise posterior.
Caracterização de Pigmento
O pigmento extraído passou por vários testes analíticos pra caracterizar sua composição química. Espectroscopia de infravermelho (IR), espectroscopia UV-visível e análises de cromatografia líquida-espectrometria de massa determinaram a presença de diferentes compostos no pigmento.
Resultados e Discussão
Isolamento e Identificação de Bactérias Produtoras de Pigmento
Entre as colônias crescimento a partir de amostras de ar, uma estirpe específica mostrou pigmentação amarelo-alaranjada e foi escolhida pra análise posterior. Esse isolado foi identificado como Exiguobacterium aurantiacum, e foi escolhido pra produção de pigmento com base em suas características promissoras.
Cultivo Cultural com Extratos de Resíduos Agrícolas
Das doze amostras de extratos de resíduos agrícolas testadas, três (banana, beterraba e restos de pão) não suportaram o crescimento bacteriano. Os extratos restantes mostraram níveis variados de eficácia. Entre eles, o extrato de resíduos de tomate resultou no maior crescimento bacteriano.
Triagem de Variáveis do Processo
Através do método PBD, nove variáveis diferentes foram avaliadas. A análise revelou que vários fatores, especificamente agitação cultural, pH inicial, extrato de levedura e concentração de sal, tiveram uma influência significativa no crescimento bacteriano. A análise estatística confirmou que essas variáveis afetaram significativamente o crescimento da cultura.
Otimização de Fatores Significativos
Usando RSM, um entendimento mais detalhado de como os fatores significativos interagiam foi desenvolvido. Isso revelou condições ótimas pra crescimento, incluindo taxa de agitação e nível de pH. Os resultados indicaram que maximizar as condições de crescimento poderia aumentar a produção de pigmentos.
Verificação dos Resultados
Um experimento de verificação confirmou as descobertas da fase de otimização. Os resultados demonstraram que sob as condições otimizadas, a bactéria produziu uma quantidade maior de biomassa e pigmento.
Caracterização de Pigmento
O pigmento extraído foi analisado usando várias técnicas. A espectroscopia IR revelou a presença de grupos funcionais associados a carotenoides. A espectroscopia UV-visível indicou um pico de absorção forte típico de compostos carotenoides. Os resultados do LC-MS confirmaram ainda mais a presença de compostos carotenoides específicos, validando a qualidade dos pigmentos extraídos.
Conclusão
Através da pesquisa, foi estabelecido que Exiguobacterium aurantiacum pode servir como uma fonte eficaz para produzir pigmentos naturais a partir de extratos de resíduos agrícolas. A otimização das condições de crescimento levou a melhorias significativas no rendimento de pigmentos. As análises de caracterização confirmaram a qualidade e a natureza dos pigmentos, com potencial pra várias aplicações em produtos ambientalmente amigáveis.
Esse estudo destaca a importância de utilizar resíduos orgânicos como substratos de crescimento não só como um meio pra produzir pigmentos naturais, mas também como uma estratégia para gerenciamento sustentável de resíduos e conservação ambiental. Os resultados criam uma base pra futuras pesquisas e aplicações comerciais de pigmentos microbianos em diversas indústrias.
À medida que as indústrias buscam cada vez mais reduzir seu impacto ambiental, soluções como essas abrem caminho pra práticas sustentáveis, promovendo o uso de alternativas ecológicas aos corantes sintéticos.
Título: Enhancing pigment production by a chromogenic bacterium (Exiguobacterium aurantiacum) using tomato waste extract: A Statistical approach
Resumo: There is high demand for microbial pigments as promising alternative for synthetic pigments basically for safety and economic reasons. This study aimed at the optimization of yellowish-orange pigment production by Exiguobacterium aurantiacum using agro-waste extract as growth substrate. Air samples were collected using depositional method. Pure cultures of pigment producing bacteria were isolated by subsequent culturing on fresh nutrient agar medium and the potent isolate was identified using MALDI-TOF technique. Culture conditions were screened using Plackett-Burman design and the most three significant variables were optimized by response surface methodology. Fermentation was conducted in 150 mL agro-waste decoctions from which tomato waste extract was selected because of higher optical density of the culture compared to other agro-waste extracts. Pigment was extracted by solvent extraction method and the best solvent was selected based on its ability to dissolve the culture suspension. The pigment was characterized using spectroscopic and chromatographic techniques. Culture agitation rate, initial medium pH and concentration of yeast extract were identified as the most significant (p< 0.0001) variables affecting pigment production. At optimized conditions, 0.96 g/L of pigment was extracted from 4.73 g/L of culture biomass and the extracted pigment under optimized conditions was 1.6 times higher than the pigment extracted under un-optimized conditions. The spectroscopic and chromatographic analyses demonstrated the presence of different functional groups and carotenoids were identified as parts of the molecule responsible for the yellowish-orange pigmentation of the extract. This study demonstrated the potential for optimization of pigment production by bacteria using agro-waste extract as substrate. Hence, the current findings strongly encourage for further study at a large-scale level for industrial production.
Autores: Diriba Muleta, B. Zeleke, H. A. Dinka, D. A. Tsegaye, J. Hassen
Última atualização: 2024-10-17 00:00:00
Idioma: English
Fonte URL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.10.17.618848
Fonte PDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.10.17.618848.full.pdf
Licença: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
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