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Vigilância de Esgoto: Rastreando Variantes Ocultas

Cientistas usam água residuária pra descobrir linhagens e mutações de vírus que tão escondidas.

Reinier Suarez, Devon A. Gregory, David A. Baker, Clayton Rushford, Torin Hunter, Nicholas R. Minor, Clayton Russ, Emma Copen, David H. O’Connor, Marc C. Johnson

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A vigilância de Águas residuais virou um método comum pra monitorar germes e químicos no nosso ambiente. É tipo aquele vizinho curioso espiando os quintais alheios - só que, nesse caso, são os cientistas analisando o esgoto pra entender o que tá rolando. Esse método ficou famoso durante a pandemia de SARS-CoV-2, ajudando os especialistas a acompanharem várias variantes do vírus, que é basicamente como acompanhar a pontuação em um jogo de pega-pega super intenso.

As Linhagens Crípticas

No começo de 2021, os pesquisadores começaram a rastrear o vírus SARS-CoV-2 nas águas residuais. Em março do mesmo ano, eles descobriram uma versão do vírus que parecia ter evoluído mais rápido do que as outras. Eles deram o nome de "linhagem críptica" pra essa variante safada. Essas linhagens crípticas se mostraram como a seção VIP das Mutações da COVID-19, aparecendo frequentemente nas águas residuais, mas nem sempre reconhecidas nas infecções humanas.

Conforme a pandemia avançava, cientistas de várias partes do mundo começaram a reportar sobre essas variantes camufladas. Alguns estudos apontaram semelhanças entre essas linhagens crípticas e infecções persistentes em pessoas com sistemas imunológicos fracos. Poderia-se dizer que essas linhagens crípticas estavam escondidas nos corpos dessas pessoas, tranquilas, enquanto o resto do mundo lidava freneticamente com a pandemia.

Curiosamente, algumas dessas linhagens foram rastreadas até lugares onde o vírus supostamente havia parado de circular. Por exemplo, uma linhagem críptica foi encontrada em um prédio comercial no final de 2022, mesmo com a linhagem original já tendo sumido desde o início de 2021. É como achar uma meia na lavanderia do ano passado.

Mutações e Variantes

Uma coisa fascinante sobre linhagens crípticas é a habilidade delas de dar pistas sobre futuras mutações. Pense nelas como trailers de filmes - as variantes futuras. Algumas mutações do vírus, como N440K e E484A, foram vistas nessas linhagens muito antes de aparecerem em variantes mais conhecidas como a Omicron.

Essa semelhança sugere que as linhagens crípticas podem enfrentar desafios e pressões similares às variantes conhecidas que estão circulando. Mesmo que muitas mutações vistas nas linhagens crípticas ainda não tenham chegado às variantes mainstream, a pergunta que fica é: elas algum dia verão a luz do dia? É como perguntar se aquela pizza sobrou na geladeira vai ser comida.

Coleta de Dados de Águas Residuais

Governos e organizações ao redor do mundo começaram a usar sequenciamento de genoma inteiro (WGS) pra acompanhar as variantes de SARS-CoV-2 nas águas residuais. Esses dados costumam acabar em grandes bancos de dados. Recentemente, pesquisadores examinaram mais de 135.000 amostras de águas residuais de mais de 2.000 locais em 45 países diferentes. Pode-se dizer que eles estavam bem ocupados.

Usando um conjunto específico de mutações, eles identificaram mais de 20 linhagens crípticas. Eles compilaram uma lista detalhada dessas mutações e chamaram de "substituições de aminoácidos que definem linhagens crípticas." Esse nome pode soar sofisticado, mas se refere apenas às mudanças genéticas únicas encontradas nessas versões mais espertas do vírus.

Buscando Linhagens Crípticas

Ao usar o termo "SARS-CoV-2 águas residuais", os pesquisadores começaram a baixar dados de sequências de um banco de dados público, com o objetivo de pegar essas linhagens crípticas no ato. Eles focaram em amostras coletadas antes de 31 de outubro de 2023, o que significa que estavam procurando as versões mais antigas do vírus que ainda poderiam estar escondidas nos esgotos.

Eles analisaram as sequências de leituras identificáveis que tinham várias das mutações do interesse deles. Esse trabalho minucioso levou à descoberta de 18 linhagens crípticas independentes. Algumas já tinham sido reportadas, enquanto outras eram novidade. O tempo que essas linhagens foram detectadas variou bastante, o que é como comparar a duração de uma amizade - algumas podem ser passageiras, enquanto outras suportam a prova do tempo.

Comparando Linhagens

Depois que os pesquisadores identificaram as linhagens crípticas com base em suas sequências, eles as compararam com dados de sistemas de esgoto próximos que não tinham essas variantes malandras. Ao analisar as mutações únicas que apareciam mais frequentemente nas linhagens crípticas, eles desenvolveram uma imagem mais clara do que estava rolando. Por exemplo, se uma mutação específica era encontrada em uma linhagem críptica muito mais do que em sistemas vizinhos, era marcada como uma "mutação específica críptica."

Essa análise aprofundada foi repetida em todas as linhagens identificadas, permitindo que os cientistas juntassem os pedaços genéticos que tornavam cada linhagem única. Não era sempre fácil, já que algumas linhagens tinham mais dados disponíveis do que outras, mas eles estavam determinados.

Árvores Filogenéticas e Ancestrais Comuns

Pra visualizar suas descobertas, os pesquisadores criaram árvores filogenéticas, que são como árvores genealógicas de vírus. Essas árvores mostraram as relações entre as linhagens crípticas, revelando que todas descendem de versões mais antigas do vírus que desapareceram há muito tempo.

Curiosamente, ao mapear essas linhagens, os cientistas perceberam que algumas mutações apareceram em várias linhagens independentes. Isso sugere que essas linhagens podem estar respondendo a pressões comuns, muito parecido com irmãos que desenvolvem hábitos semelhantes depois de crescerem na mesma casa.

Mutações Convergentes

Entre as mudanças notadas, muitas pareciam surgir em pelo menos três linhagens crípticas. Os cientistas mapearam essas mutações na estrutura do vírus, destacando aquelas que eram comuns entre as variantes escondidas. Por algum motivo, duas das mudanças mais comuns na proteína Spike, K417T e Q493K, pareciam ser particularmente populares.

K417T era conhecida por ajudar o vírus a escapar dos anticorpos e, embora já estivesse por aí há um tempo, ainda era rara nas variantes mainstream. Por outro lado, Q493K era bem tímida - raramente vista fora das linhagens crípticas.

Inserções e Duplicações

Além das mutações, os pesquisadores também encontraram pequenas inserções nos genomas de algumas linhagens crípticas. Pense nisso como pequenos "extras" inesperados. Algumas dessas inserções vieram de seções correspondentes do próprio genoma do vírus, mostrando que ele pegou um pedacinho de si mesmo.

Descobriu-se que uma linhagem críptica foi detectada em dois sistemas de esgoto diferentes, separados por uma distância de cerca de 64 quilômetros. Isso levou os cientistas a se perguntarem se uma pessoa que viajava entre os dois locais poderia ser a fonte comum. Isso era como a clássica ideia de que "uma comunidade se faz com todos" - exceto que, nesse caso, poderia ser preciso vários sistemas de esgoto pra rastrear o vírus.

Como Tudo Se Encaixa

Enquanto rastrear essas linhagens crípticas é essencial, os pesquisadores também perceberam que a busca em grandes bancos de dados poderia subrepresentar quão comuns essas linhagens realmente são. O método que usaram depende muito de mudanças específicas que essas linhagens crípticas parecem sempre ter. No entanto, pode haver outras linhagens crípticas espreitando por aí sem os mesmos identificadores, prontas pra entrar em ação.

Apesar dos desafios, a equipe conseguiu mostrar que essa abordagem detecta efetivamente essas variantes escondidas e identifica suas mutações específicas. É como estar à caça de um tesouro escondido - às vezes, você precisa cavar um pouco mais fundo pra encontrar o que tá procurando.

A Visão Geral

O estudo das linhagens crípticas é crucial pra entender como o SARS-CoV-2 evoluiu. As inserções e mutações descobertas nessas linhagens podem dar dicas de como o vírus pode se adaptar a diferentes ambientes, como o trato gastrointestinal em comparação com as vias respiratórias.

Uma descoberta significativa foi que essas linhagens crípticas pareciam reverter a uma sequência encontrada em vírus de morcegos intimamente relacionados. Enquanto a maior parte do mundo vê o SARS-CoV-2 como principalmente um vírus respiratório, parece que essas variações crípticas são mais resilientes do que se pensava. Elas podem estar prosperando em áreas onde você não esperaria que um vírus assim estivesse.

Conclusão

Pra concluir, a vigilância de águas residuais é como ter uma bola de cristal que espreita o mundo escondido dos vírus. Ela permite que os cientistas entendam como o SARS-CoV-2 e seus parentes travessos estão evoluindo e se adaptando. Ao rastrear essas linhagens crípticas, os pesquisadores estão mais bem preparados pra responder a futuras variantes, tornando isso essencial pra saúde pública.

Então, da próxima vez que você ouvir sobre vigilância de águas residuais, lembre-se que tem muito mais rolando embaixo da superfície do que parece. Com um pouco de perseverança e muito trabalho de detetive, os cientistas continuam revelando os segredos desses vírus elusivos, um esgoto de cada vez.

Fonte original

Título: Detecting SARS-CoV-2 Cryptic Lineages using Publicly Available Whole Genome Wastewater Sequencing Data

Resumo: Beginning in early 2021, unique and highly divergent lineages of SARS-CoV-2 were sporadically found in wastewater sewersheds using a sequencing strategy focused on the most mutagenic region of SARS-CoV-2, the receptor binding domain (RBD). Because these RBD sequences did not match known circulating strains and their source was not known, we termed them "cryptic lineages". To date, more than 20 cryptic lineages have been identified using the RBD-focused sequencing strategy. Here, we identified and characterized additional cryptic lineages from SARS-CoV-2 wastewater sequences submitted to NCBIs Sequence Read Archives (SRA). Wastewater sequence datasets were screened for individual sequence reads that contained combinations of mutations frequently found in cryptic lineages but not contemporary circulating lineages. Using this method, we identified 18 cryptic lineages that appeared in multiple samples from the same sewershed, including 12 that were not previously reported. Partial consensus sequences were generated for each cryptic lineage by extracting and mapping sequences containing cryptic-specific mutations. Surprisingly, seven of the mutations that appeared convergently in cryptic lineages were reversions to sequences that were highly conserved in SARS- CoV-2-related bat Sarbecoviruses. The apparent reversion to bat Sarbecovirus sequences suggests that SARS- CoV-2 adaptation to replicate efficiently in respiratory tissues preceded the COVID-19 pandemic. Author SummaryWastewater surveillance has been used during the SARS-CoV-2 pandemic to monitor viral activity and the spread of viral lineages. Occasionally, SARS-CoV-2 sequences from wastewater reveal unique evolutionary advanced lineages of SARS-CoV-2 from an unknown source, which are termed cryptic lineages. Many groups nationwide also use wastewater surveillance to track the virus and upload that information to NCBIs SRA database. That sequence data was screened to identify 18 cryptic lineages worldwide and identify convergent mutations throughout the genome of multiple cryptic lineages that suggest reversion to residues common in SARS-CoV-2-related Sarbecoviruses.

Autores: Reinier Suarez, Devon A. Gregory, David A. Baker, Clayton Rushford, Torin Hunter, Nicholas R. Minor, Clayton Russ, Emma Copen, David H. O’Connor, Marc C. Johnson

Última atualização: Dec 27, 2024

Idioma: English

Fonte URL: https://www.medrxiv.org/content/10.1101/2024.12.24.24319568

Fonte PDF: https://www.medrxiv.org/content/10.1101/2024.12.24.24319568.full.pdf

Licença: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/

Alterações: Este resumo foi elaborado com a assistência da AI e pode conter imprecisões. Para obter informações exactas, consulte os documentos originais ligados aqui.

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