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ファージのライフサイクルと細菌ライシス

ファージがバイ菌を溶解させる仕組みの概略。

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ファージと細菌の細胞死ファージと細菌の細胞死ファージがバイ菌を溶かす方法。
目次

ファージ、またはバクテリオファージは、細菌に感染するウイルスだよ。彼らは細菌細胞に付着して、遺伝物質を注入し、その後細菌の機械を使って新しいファージを作り出すっていう複雑なライフサイクルを持ってる。このプロセスの後、多くのファージは細菌の宿主を破壊して、新しいウイルスを環境に放出するんだ。この破壊、または細菌細胞の崩壊は、ファージの広がりにとって重要なんだよ。

細菌細胞の構造

細菌は、特にグラム陰性細菌に複数の層からなる構造を持ってる。グラム陰性細菌をうまく破壊するには、ファージは内膜、外膜、ペプチドグリカンでできた細胞壁の三つの主なバリアを突破しなきゃいけないんだ。

破壊に関与するファージの成分

これらのバリアを突破するために、ファージはホリン、エンドリシン、スパニンなどのさまざまな成分を使うんだ。

ホリン

ホリンは細菌の内膜に穴を開けるタンパク質だよ。膜に集まった後に穴を作って、他のリシスタンパク質が入ってきて細胞壁を壊すのを助けるんだ。

エンドリシン

ホリンによって穴ができると、エンドリシンはペリプラスミックスペース(内外膜の間のエリア)に入って、細胞壁のペプチドグリカン層を壊し始める。このプロセスは細菌細胞のリシスにとって必須なんだ。

ホリンとエンドリシンの異なるタイプ

いくつかのファージは典型的なホリンを使用する一方で、他のファージはピンホリンと呼ばれる少し異なる形を使ってる。ピンホリンは小さな穴を作るけど、エンドリシンが機能を果たすのを効果的に可能にするんだ。これに加えて、いくつかのファージはホリンやエンドリシンのユニークなバリエーションも持っていて、リシスを達成するために独特な方法で協力することができる。

スパニン

スパニンは外膜に作用してリシスの最終段階を促進するタンパク質だよ。二成分系の一部であったり、単独のタンパク質として働いたりすることができる。スパニンの成分間の相互作用はリシスプロセスを完了するために重要なんだ。

LambdaSoとShewanella oneidensisにおける役割

特定のファージ、LambdaSoはShewanella oneidensisという細菌に見られる。研究によると、LambdaSoが活性化されると、その細菌をリシスさせることができて、DNAを環境に放出するのが重要なんだ。このDNAはバイオフィルム形成に大きな役割を果たして、バイオフィルムの構造的完全性に貢献するんだ。

LambdaSo遺伝子クラスターの重要性

LambdaSoファージの特定の遺伝子はリシスプロセスにとって重要なんだ。これらの遺伝子を削除すると、細菌がバイオフィルム形成に必要な物質を放出できなくなることが示されていて、リシスプロセスにおける重要性を示してる。

LambdaSoのリシス成分の特定

研究者たちは、LambdaSoリシスシステムのさまざまな成分を特定して、ピンホリン、SARエンドリシン、二成分スパニンシステムを含めていることを発見した。彼らは、リシスプロセスに不可欠な新しいタンパク質Lcc6も発見した。

LambdaSoホリンの役割

LambdaSoホリンは以前の研究で間違って特定されていた。新しい特定から、実際にリシスに関与するホリンは別のタンパク質SO_2971であることが示された。このタンパク質はピンホリン群の一部で、内膜に影響を与えてリシスを開始するのに重要な役割を果たすんだ。

エンドリシンの機能

LambdaSoファージのエンドリシンはSO_2973という遺伝子によって特定されていて、ホリンが膜に孔を開けた後にペプチドグリカンを分解するのに関与していると考えられている。ホリンと同様に、このエンドリシンの機能はリシスを阻害する遺伝子削除によって確認されたんだ。

新しいタンパク質Lcc6

研究者たちはLambdaSoリシスシステムの調査中にLcc6を発見した。この小さなタンパク質はファージが細菌細胞をリシスさせるために重要で、ホリンと密接に機能する。自体でリシスを引き起こすわけではないけど、プロセスの初期段階において重要な役割を果たしているようだ。

スパニンとその機能

スパニンは二つの部分で見つかって、リシスプロセスの最終段階には不可欠なんだ。研究者たちは、これらのタンパク質を担う遺伝子がLambdaSoゲノムで密接に配置されていることを特定していて、彼らが連続的なリシスシステムの一部として協力していることを示唆している。

LambdaSoのリシスのメカニズム

LambdaSoが活性化されると、特定されたタンパク質、ホリン、エンドリシン、スパニン、Lcc6が協力して働く。ホリンが内膜にチャネルを作り、エンドリシンが細胞壁を壊すことを可能にするんだ。次にスパニンが外膜に作用してリシスを完了する。

研究方法論

リシスプロセスを分析するためにさまざまな実験が行われた。これには、特定の遺伝子の削除を含めて、細胞のリシスやファージ粒子の放出の効果を観察することが含まれている。観察は顕微鏡を使って記録され、成長アッセイが行われてLambdaSoのリシス活性を定量化した。

ファージ誘導リシスの重要性

LambdaSoのようなファージは細菌の生態系やバイオテクノロジーに大きな影響を与えるんだ。彼らのリシスメカニズムを理解することで、細菌感染を克服するためのファージ治療の開発や、バイオフィルム管理のようなバイオテクノロジーの応用を促進するのに役立つんだ。

結論

細菌におけるファージ誘導リシスの研究、特にLambdaSoファージは、さまざまなタンパク質間の複雑なメカニズムや相互作用を明らかにするんだ。これらの発見はファージ生物学の理解を深め、医療や産業における実用的な応用の道を開くんだ。

オリジナルソース

タイトル: Identifying the components of the Shewanella phage LambdaSo lysis system

概要: Phage-induced lysis of Gram-negative bacterial hosts usually requires a set of phage lysis proteins, a holin, an endopeptidase and a spanin system, to disrupt each of the three cell envelope layers. Genome annotations and previous studies identified a gene region in the Shewanella oneidensis prophage LambdaSo, which comprises potential holin- and endolysin-encoding genes but lacks an obvious spanin system. By a combination of candidate approaches, mutant screening, characterization and microscopy we found that LambdaSo uses a pinholin/signal-anchor-release (SAR) endolysin system to induce proton-leakage and degradation of the cell wall. Between the corresponding genes we found that two extensively nested open reading frames encode a two-component spanin module Rz/Rz1. Unexpectedly, we identified another factor strictly required for LambdaSo-induced cell lysis, the phage protein Lcc6. Lcc6 is a transmembrane protein of 65 amino acid residues with hitherto unknown function, which acts at the level of holin in the cytoplasmic membrane to allow endolysin release. Thus, LambdaSo-mediated cell lysis requires at least four protein factors (pinholin, SAR-endolysin, spanin, Lcc6). The findings further extend the known repertoire of phage proteins involved in host lysis and phage egress. SignificanceFor the release of the assembled virions, phages have to breach the cell envelope. For Gram-negatives, this requires the disruption of three layers, the outer and inner membrane and the cell wall. In most cases, the lysis systems of phages infecting Gram-negatives comprises holins to disrupt or depolarize the membrane, thereby releasing or activating endolysins, which then degrade the cell wall. This, in turn, allows the spanins to become active and fuse outer and inner membrane, completing cell envelope disruption and allowing phage egress. Here we show that the presence of these three components may not be sufficient to allow cell lysis, implicating that also in known phages further factors may be required.

著者: Kai M Thormann, S. W. Thöneböhn, D. Fischer, V. Kreiling, A. Kemmler, I. I. Oberheim, F. Hager, N. E. Schmid

最終更新: 2024-01-24 00:00:00

言語: English

ソースURL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.01.23.576932

ソースPDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.01.23.576932.full.pdf

ライセンス: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/

変更点: この要約はAIの助けを借りて作成されており、不正確な場合があります。正確な情報については、ここにリンクされている元のソース文書を参照してください。

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