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フザリウム頭腐病の抵抗性を理解する

研究によると、F. asiaticumが殺菌剤にどのように適応するかが明らかになった。

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フザリウム耐性研究が明らかフザリウム耐性研究が明らかになった新しい知見。フェナマクリルに対する真菌の耐性に関する
目次

フサリウム頭部腐敗、通称スキャブは、小麦、トウモロコシ、大麦などの穀物に影響を与える深刻な病気で、世界中で広がってるんだ。この病気は穀物の生産量を減らすだけじゃなくて、有害な毒素(トリコテセン類)、特にデオキシニバレノールやゼアラレノンで穀物を汚染しちゃうから、食べられなくなるんだよ。

FHBの主な原因は、フサリウム・グラミネアラム種複合体という真菌のグループなんだ。このグループには15以上の種があって、中国ではF.アジアティクムとF.グラミネアラムが一番一般的だって。特にF.アジアティクムは中部や下流の長江地域で多いんだよね。

小麦の抵抗性の課題

農家は、フサリウムの真菌に自然に抵抗できる小麦の品種がほんの数種類しかないから、重大な課題に直面してるんだ。それに、F.アジアティクムに対する完全な遺伝的抵抗性はまだ完全には理解されていなくて、商業用の小麦品種には組み込まれてないんだ。だから、農家は小麦の開花期間中にFHBを管理するために殺菌剤に大きく頼らざるを得ないんだよ。

特に効果的な殺菌剤としては、フェナマクリルがFHBや他のフサリウム種による病気に対して効果があることが示されてるけど、問題は抵抗性の株が発生することなんだ。これらの抵抗性株は、殺菌剤やUV光に真菌をさらすラボプロセスを通じて作られることがあるよ。殺菌剤耐性行動委員会は、フェナマクリルを中程度から高い耐性リスクがあると分類してるんだ。

フサリウム種の抵抗性メカニズム

研究によると、フサリウム種におけるフェナマクリルへの抵抗性は、マイオシン5という特定のタンパク質の変化に関連してることがわかってるんだ。マイオシン5遺伝子のいくつかの変異がこの殺菌剤に対する抵抗性の異なるレベルを引き起こすんだ。例えば、ある変異は低い抵抗性をもたらす一方で、他の変異は高い抵抗性を与えることがある。

フェナマクリルはマイオシン5タンパク質に結合して、その機能を妨げ、真菌が成長するのを防ぐんだけど、抵抗性株には結合部位を変える変異があって、殺菌剤の存在下でも生き残れるようになってるんだ。

トランスクリプトーム解析の役割

最近、研究者たちは真菌が成長し、殺菌剤のストレスにどう反応するかを研究するためにトランスクリプトーム解析に注目しているんだ。このアプローチは、特定の条件下で生物が生成する全てのメッセンジャーRNA(mRNA)を調べることを含むんだ。この技術は感度が高いことで知られていて、さまざまな真菌が異なる殺菌剤にどう反応するかを理解するために使われてるんだ。

トランスクリプトーム解析は、フサリウム種の研究にもすでに応用されてて、異なる処理に対する反応を調べてるよ。この目的は、これらの真菌が殺菌剤にさらされたときに起こる遺伝的変化を明らかにすることなんだ。

研究の目的

研究の目標は、フェナマクリルがF.アジアティクムでどう作用するかを明らかにし、この殺菌剤によって影響される重要な遺伝子や経路を特定することなんだ。これを達成するために、研究者たちはマイオシン5遺伝子に既知の変異を持つ敏感株と抵抗株の両方を作成したんだ。

フェナマクリルで処理した後のこれらの株の遺伝子発現を比較することで、研究者たちは抵抗メカニズムやフェナマクリルがF.アジアティクムの成長をどのように抑制するかについて洞察を得たいと思ってるんだ。

ポイント変異株の作成

フェナマクリルの効果を研究するために、研究者たちは敏感株のF.アジアティクムを使って、マイオシン5遺伝子に特定のポイント変異を導入して抵抗株を作ったんだ。そのスクリーニングプロセスでは、敏感株と抵抗株を区別するために特定のマーカーを使ったよ。

成功した変異を確認した後、研究者たちはさらに分析するために純粋な株を分離したんだ。

菌糸成長と殺菌剤感受性の理解

研究者たちはF.アジアティクムの異なる株の成長を比較したんだ。全ての株は視覚的には似てるように見えたけど、その成長速度は特にフェナマクリルにさらされたときに異なってた。敏感株は低い濃度の殺菌剤に強い反応を示した一方で、抵抗株はあまり影響を受けず、高濃度のフェナマクリルでも成長できたんだ。

これは、異なる株をさまざまな濃度のフェナマクリルを含む培地に置くアッセイを通じて決定されたよ。結果は、さまざまな株の間の感受性の重要な違いを強調したんだ。

トランスクリプトームシーケンシングの実施

株間の違いをさらに調べるために、研究者たちはフェナマクリルで処理した後の敏感株と抵抗株のmRNAをシーケンスしたんだ。このプロセスでは、クリーンで高品質なリードを生成し、それを参照ゲノムと比較して発現している遺伝子を特定したよ。

全体で、すべての株にわたってかなりの数のユニークな遺伝子が特定されて、各株がフェナマクリル処理にどう反応するかについて包括的な視点を提供したんだ。

差次的遺伝子発現の分析

トランスクリプト研究の主な目的の一つは、処理後の敏感株と抵抗株の間で遺伝子発現の変化を見つけることだったんだ。いくつかの差次的に発現している遺伝子(DEGs)が特定されて、ある遺伝子は抵抗株での発現が増加し、他の遺伝子はダウンレギュレーションされてた。

分析結果は、抵抗株にはいくつかの遺伝子が著しくアップレギュレーションされていて、フェナマクリルに対する反応としてその代謝経路に変化があったことを示してる。一方で、敏感株は同じ条件下でダウンレギュレーションされる遺伝子の数が多かったんだ。

差次的に発現している遺伝子の機能解析

差次的に発現している遺伝子の機能をさらに理解するために、研究者たちは遺伝子オントロジー(GO)富化解析を行ったんだ。この分類システムは、遺伝子をその生物学的機能に基づいてグループ化するんだ。

分析から、抵抗株でのアップレギュレーションされた多くの遺伝子が栄養の取り込みや代謝に関連していることがわかった。これらの発見は、抵抗株が栄養をよりよく獲得できる可能性があることを示唆してて、殺菌剤の存在下でも成長できる理由になるんだ。

GO分類結果

抵抗株でアップレギュレーションされた遺伝子のために、異なる機能カテゴリーが特定されたんだ。小分子や有機酸の代謝、鉄の恒常性に関連するプロセスが含まれたよ。これらの機能を理解することで、抵抗株がフェナマクリルの存在下でどのように生き残るのかが明らかになってくるんだ。

抵抗性調節メカニズム

トランスクリプトームを比較することで、研究者たちは抵抗性の調節に関与する特定の遺伝子を特定したんだ。彼らは、抵抗株では一貫して発現してるけど敏感株では発現してない遺伝子のグループを見つけたよ。これらの遺伝子の多くは、厳しい条件下での成長を支える代謝プロセスにリンクしてたんだ。

さらに、彼らは抵抗株が利用可能な資源を効果的に活用できるように、栄養輸送や代謝経路に関与する遺伝子を特定したんだ。

フェナマクリルの抑制効果

この研究では、敏感株と抵抗株の両方に対するフェナマクリルの影響を受けた遺伝子も見てるんだ。分析から、株の種類に関係なくその発現が変化したコア遺伝子セットが明らかになったよ。これらの遺伝子にはエネルギー生産や解毒プロセスに関連するものが含まれてた。

これらの共通の抑制ターゲットを理解することで、研究者たちはフェナマクリルが異なる株にどのように作用するのかを理解して、新しい殺菌剤の開発の可能性を見出すことができるんだ。

研究のまとめ

この研究は、F.アジアティクムにおける殺菌剤の抵抗性の複雑さを強調してるんだ。遺伝子技術とトランスクリプトーム解析を組み合わせることで、研究者たちは抵抗メカニズムの複雑な網を解きほぐし、殺菌剤が真菌の成長に与える影響を探り始めることができるんだ。

研究結果は、抵抗株が治療を生き延びるために代謝経路を適応させて、栄養の取り込みやエネルギー生成に焦点を当てていることを示してる。この研究は、作物におけるフサリウム病の管理に向けた効果的な戦略を開発するためにこれらのメカニズムを理解することの重要性を強調してるんだ。

結論

FHBに対する継続的な戦いは、フサリウム真菌の抵抗株の発生によって複雑になってるんだ。これらの真菌がフェナマクリルのような殺菌剤に適応する方法を深く理解することで、研究者たちはより効果的な管理手法を提案できて、穀物作物生産のさらなる成功に貢献できるんだ。この研究から得られた洞察は、新しい殺菌剤開発のためのターゲットの発見にも役立つかもしれないし、この破壊的な病気のより良い制御への希望を提供するんだ。

オリジナルソース

タイトル: Comparative transcriptome analysis provides insights into the resistance regulation mechanism and inhibitory effect of fungicide phenamacril in Fusarium asiaticum

概要: Fusarium asiaticum is a destructive phytopathogenic fungus that causes Fusarium head blight of wheat (FHB), leading to serious yield and economic losses to cereal crops worldwide. Our previous studies indicated that target-site mutations (K216R/E, S217P/L, or E420K/G/D) of Type I myosin FaMyo5 conferred high resistance to phenamacril. Here, we first constructed a sensitive strain H1S and point mutation resistant strains HA, HC and H1R. Then we conducted comparative transcriptome analysis of these strains in F. asiaticum after 1 g{middle dot}mL-1 and 10 g{middle dot}mL-1 phenamacril treatment. Results indicated that 2135 genes were differentially expressed (DEGs) among the sensitive and resistant strains. Among them, the DEGs encoding ammonium transporter MEP1/MEP2, nitrate reductase, copper amine oxidase 1, 4-aminobutyrate aminotransferase, amino-acid permease inda1, succinate-semialdehyde dehydrogenase, 2, 3-dihydroxybenzoic acid decarboxylase, etc., were significantly up-regulated in all the phenamacril-resistant strains. Compared to the control group, a total of 1778 and 2097 DEGs were identified in these strains after 1 g{middle dot}mL-1 and 10 g{middle dot}mL-1 phenamacril treatment, respectively. These DEGs involved in 4-aminobutyrate aminotransferase, chitin synthase 1, multiprotein-bridging factor 1, transcriptional regulatory protein pro-1, amino-acid permease inda1, ATP-dependent RNA helicase DED, acetyl-coenzyme A synthetase, sarcoplasmic/endoplasmic reticulum calcium ATPase 2, etc., showed significantly down-regulated expression in phenamacril-sensitive strain but not in resistant strains after phenamacril treatment. In addition, cyanide hydratase, mating-type protein MAT-1, putative purine nucleoside permease, plasma membrane protein yro2, etc., showed significantly co-down-regulated expression in all the strains after phenamacril treatment. Taken together, This study provide deep insights into the resistance regulation mechanism and inhibitory effect of fungicide phenamacril and these new annotated proteins or enzymes are worth for the discovery of new fungicide targets. Author summaryFungicide phenamacril resistance occur in F. asiaticum and the resistance regulation mechanis are systematic and complex. Here, we conducted comparative transcriptome analysis of a sensitive strain H1S and point mutation resistant strains HA, HC and H1R in F. asiaticum after 1 g{middle dot}mL-1 and 10 g{middle dot}mL-1 phenamacril treatment. Among these annotated proteins or enzymes, amino-acid permease inda1, 1, 4-aminobutyrate aminotransferase, chitin synthase 1, multiprotein-bridging factor 1, ATP-dependent RNA helicase DED, acetyl-coenzyme A synthetase, sarcoplasmic/endoplasmic reticulum calcium ATPase 2, cyanide hydratase, mating-type protein MAT-1, putative purine nucleoside permease, plasma membrane protein yro2, etc., were involved in the resistance regulation mechanism and inhibitory effect of fungicide phenamacril. Our paper provides a reference basis for the study of drug resistance in other microorganisms. In addition, the relevant proteins or enzymes annotated in our study also have reference value for the discovery of new fungicide targets.

著者: Zhitian Zheng, H. Liu, X. Luo, R. Liu, A. Joe, H. Li, H. Sun, L. Yanling, Y. Li, Y. Wang

最終更新: 2024-01-29 00:00:00

言語: English

ソースURL: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.01.29.577693

ソースPDF: https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2024.01.29.577693.full.pdf

ライセンス: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/

変更点: この要約はAIの助けを借りて作成されており、不正確な場合があります。正確な情報については、ここにリンクされている元のソース文書を参照してください。

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