廃水分析でCOVID-19の変異株を追跡する
研究者たちは、下水を監視してCOVID-19の変異株を検出し、研究している。
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目次
最近、科学者たちはCOVID-19についてもっと知るために廃水を調べてるんだ。この方法は、地域で流行してるウイルスのさまざまなタイプを追跡するのに役立つんだ。廃水を調べることで、研究者たちは広く知られている変異株だけでなく、バックグラウンドに潜んでいるかもしれないあまり知られていないバリエーションも特定できるんだ。
隠れ系統とは?
検出された多くの変異の中には、「隠れ系統」と呼ばれるものがあるんだ。これらは廃水で見つかったウイルスのユニークなタイプで、まだ人間では直接見られていないんだ。隠れ系統は、下水システムの中で数ヶ月から数年続くことができる。科学者たちは、これらの系統が時間とともに進化し適応し続けると考えているんだ。隠れ系統の正確な起源はまだ謎だけど、人間から来ている可能性があるという示唆もある。たとえば、いくつかの研究では、これらの系統と長期間のCOVID-19感染者に見られる配列との類似点が示されているんだ。それでも、非人間のソースも排除できないことを忘れないでね。
MO45系統の追跡
特定の隠れ系統であるMO45は、2021年6月にミズーリの都市部で初めて観察されたんだ。それ以来、研究者たちはこれを注意深くモニターしてる。彼らは、この系統の遺伝的構成が時間とともに変化していることを発見したよ、それはまだ活動中だっていうことを示してるんだ。
モニタリングの仕組み
ウイルスの変異を把握するために、研究者たちはミズーリの廃水処理施設から週間サンプルを集めているんだ。最初はこのエリアで一番多かったのはアルファ変異株で、いくつかの古い系統もあったんだ。時が経つにつれ、ベータ、ガンマ、デルタ、ミュー/シータといった他の変異株も検出されたよ。2021年8月にはデルタ株が主流になり、2021年12月にはオミクロンが急速にその地位を奪ったんだ。それ以降、いろんなオミクロン変異株が出現して、新しいのが古いバージョンを押しのけることが多いんだ。
変異株の存在の推移
研究者たちは、廃水中でのさまざまな変異株の出現を視覚的に表現したグラフを作成したんだ。彼らはサンプルからウイルスのRNAを抽出し、先進的な配列解析技術を使ってその配列を分析するんだ。このデータは、廃水中で各変異株がどのくらい普及しているかを推定するのに役立つんだ。
よく知られている変異株に加えて、MO45の隠れ系統も時折現れるようになったよ。最初の検出は2021年6月で、最後の検出は2022年10月だった。初期の遺伝的配列は、元のウイルスと比べていくつかの変化があったんだ。これらの変化のいくつかは、より顕著な変異株でも見られたけど、他のいくつかは主要な変異株では見られなかったんだ。
隠れ系統の遺伝的変化
研究者たちがMO45系統を観察し続ける中で、ウイルスの構造にいくつかの遺伝的変化が見られたんだ。たとえば、2022年2月には特定の変化、N460Kが現れて、それが系統の安定した部分になったんだ。2022年の後半には他の注目すべき変化も起こり、一部は系統内で固定されたんだ。研究者たちは、何度も現れた変異も観察したけど、それは系統内で固定されることはなかったよ。
MO45隠れ系統の最後の検出時には、オミクロン変異株に多くの類似点があったんだ。特に、オミクロン系統で見られる変化と重なる12の遺伝的構造の変化があったんだ。
オミクロン変異株との違いと類似点
興味深いことに、隠れ系統で見られる多くの変化は、オミクロンが出現する前に起こったんだ。たとえば、T478KとE484Aは、オミクロンで一般的になる数ヶ月前に隠れ系統で見つかったんだ。これにより、隠れ系統とオミクロン変異株の関係について疑問が生まれるんだ。両者は適応と生存に似た圧力を受けているようだけど、それぞれの変異株の正確な起源は不明なんだ。
廃水モニタリングの重要性
これらの隠れ系統のための廃水モニタリングは重要なんだ。あまり知られていない変異株を調べることで、研究者たちは公衆衛生に影響を与えるウイルスの変化を予測できるようになることを期待しているんだ。これらの変異を事前に理解することで、将来ウイルスがどのように進化するかについての貴重な洞察を得ることができるんだ。
サンプル収集とテスト方法
必要なサンプルを集めるために、研究者たちは廃水処理施設から複合サンプルを収集するんだ。これらのサンプルは冷やされて保持され、通常は24時間以内に分析のためにラボに運ばれるんだ。最初のステップは、ウイルス材料を分離するためにサンプルをろ過して遠心分離することなんだ。
抽出されたRNAは、さらなる分析のためにウイルスの特定の部分を増幅する一連のテストを受けるんだ。研究者たちは、サンプルを深い配列解析のために準備するためにさまざまなPCR技術を使うんだ。この先進技術により、科学者たちはウイルスの遺伝子コードを読み取ることができ、さまざまな変異株の存在や発生した変異を明らかにすることができるんだ。
変異株検出のためのPCR技術
このプロセスは、特定のプライマーを使ってウイルスの所望のセグメントを増幅する一次RT-PCRから始まるんだ。一度一次増幅が完了すると、サンプルをさらに精製するために二次PCRが行われるんだ。場合によっては、より一般的なオミクロン変異株からの干渉を最小限に抑えつつ、特に隠れ系統をターゲットにする特別なプライマーが使われることもあるよ。
これらの増幅後、研究者たちは分析のために最終的な配列を追加するために三次PCRを行うんだ。プールしたサンプルは、得られたデータが正確であることを確保するために精製されるんだ。この最終的なライブラリは、高度な配列解析機器を使ってテストされ、研究者たちが分析できる広範なデータが生成されるんだ。
結論
廃水とその内容を研究することは、COVID-19ウイルスやその多くの変異株を理解するための強力なツールを提供するんだ。知られている系統と隠れ系統の両方に焦点を当てることで、研究者たちはウイルスとの戦いに役立つ重要な情報を集めることができるんだ。廃水の継続的なモニタリングと分析は、将来の公衆衛生への対応を計画するのに役立つ重要な手がかりをヘルスコミュニティに提供できるかもしれないよ。
科学者たちがこれらの隠れ系統を見守り続けることで、SARS-CoV-2が地域でどのように進化しているかに対するより広い理解に貢献し、COVID-19の影響を管理し軽減するための戦略を情報提供することができるんだ。
タイトル: Continued selection on cryptic SARS-CoV-2 observed in Missouri wastewater
概要: Deep sequencing of wastewater to detect SARS-Cov-2 has been used during the COVID-19 pandemic to monitor viral variants as they appear and circulate in communities. SARS-CoV-2 lineages of an unknown source that have not been detected in clinical samples, referred to as cryptic lineages, are sometimes repeatedly detected in specific locations. We have continued to detect one such lineage previously seen in a Missouri site. This cryptic lineage has continued to evolve, indicating continued selective pressure similar to that observed in Omicron lineages. Author SummaryMonitoring sewage for SARS-CoV-2 has been an important part of understanding the dynamics of the viruss spread and persistence within and across communities during the pandemic. We and others have also observed variants appearing in wastewater that do not appear in clinical sampling. Many of these variants not only possess genomic changes identical to or at the same position as those that have been observed in variants of concern, particularly currently circulating Omicron variants, but often acquire the changes before they have been observed in clinical samples. We report here the continued observation of a variant in Missouri wastewater, but not in clinical sampling, that has continued to evolve, gaining genomic changes that often are the same and predate changes seen in clinical samples. These observation add to our understanding of the selective pressures driving the evolution of SAR-CoV-2.
著者: Marc C Johnson, D. Gregory, C. Rushford, C.-H. Lin, C. Darby, N. Niehues, E. Semkiw, M. Reynolds, J. Wenzel
最終更新: 2023-09-20 00:00:00
言語: English
ソースURL: https://www.medrxiv.org/content/10.1101/2023.09.18.23295717
ソースPDF: https://www.medrxiv.org/content/10.1101/2023.09.18.23295717.full.pdf
ライセンス: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
変更点: この要約はAIの助けを借りて作成されており、不正確な場合があります。正確な情報については、ここにリンクされている元のソース文書を参照してください。
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